RNA สายคู่ (dsRNA) เกิดขึ้นเป็นผลพลอยได้ระหว่างการถอดรหัส mRNA ในหลอดทดลอง ผลพลอยได้นี้มีคุณสมบัติกระตุ้นภูมิคุ้มกันในร่างกายมนุษย์ สามารถกระตุ้นการตอบสนองของภูมิคุ้มกัน ส่งผลให้ระดับ mRNA ลดลง ซึ่งทำให้ dsRNA กลายเป็นสิ่งเจือปนในกระบวนการที่ยุ่งยาก จำเป็นต้องกำจัดออกอย่างละเอียดและควบคุมการมีอยู่ของ dsRNA อย่างเข้มงวด

เพื่อแก้ไขข้อกังวลนี้ ชุดตรวจหา ELISA แบบ Double-stranded RNA (dsRNA) ใช้หลักการทดลองของเอนไซม์เชื่อมโยงภูมิคุ้มกันแบบแซนวิชแอนติบอดีคู่ (ELISA) สำหรับการวัดปริมาณ dsRNA ที่เหลืออยู่ ชุดทดสอบนี้ไม่เพียงแต่ใช้ในการตรวจจับ dsRNA ทั่วไปเท่านั้น แต่ยังใช้ในการตรวจจับ peudo UTP, N1-Me-peudo UTP ได้อีกด้วย และ dsRNA ที่ได้รับการดัดแปลงด้วย 5-OMe-UTP

ขั้นตอนนี้เกี่ยวข้องกับการเติมทั้งมาตรฐานและตัวอย่างทดสอบลงบนแผ่นเอนไซม์ (กำหนดเป็น 36717-A) ที่เคลือบด้วยแอนติบอดีต่อ dsRNA ไว้ก่อนหน้านี้ จากนั้นจึงเติมแอนติบอดีตรวจจับ dsRNA ที่ติดฉลากด้วยไบโอติน (36717-F) ในรูปแบบเจือจาง ในที่สุด สเตรปตาวิดิน-เอชอาร์พี (SA-HRP) (36717-G) จะถูกใส่เข้าไปเพื่อสร้างสารเชิงซ้อนที่ประกอบด้วยแอนติบอดี แอนติเจน ไบโอติน และ SA-HRP

หลังจากการล้างด้วยแผ่นแล้ว การเติมสารละลายโครโมเจนิก TMB (36717-K) จะเริ่มการพัฒนาสี ภายใต้อิทธิพลของการเร่งปฏิกิริยาเอนไซม์ HRP TMB จะเปลี่ยนแปลงจากไม่มีสีเป็นสีน้ำเงิน จากนั้นจึงหยุดการเปลี่ยนแปลงนี้โดยการใช้สารละลายหยุด (36717-L) ในที่สุด การเปลี่ยนแปลงนี้จะส่งผลให้เกิดโทนสีเหลือง ซึ่งความเข้มข้นของสีจะสัมพันธ์ในเชิงบวกกับปริมาณของ dsRNA ที่ระบุในตัวอย่าง

ชุดผลิตภัณฑ์นี้มีวัตถุประสงค์ที่หลากหลาย ช่วยให้เพิ่มประสิทธิภาพของกระบวนการทำให้บริสุทธิ์ของผลิตภัณฑ์ทางชีวภาพ การควบคุมสิ่งเจือปนในขั้นตอนกลาง และการทดสอบการปล่อยเพื่อประเมินผลิตภัณฑ์ขั้นสุดท้าย

พีผลิตภัณฑ์ วีการขจัดความเหนื่อยล้า รายงาน

ส่วนประกอบ

การขนส่งและการเก็บรักษา

ชุดทดสอบนี้มาพร้อมกับถุงน้ำแข็งและสามารถเก็บไว้ได้ที่อุณหภูมิ 2°C ถึง 8°C ผลิตภัณฑ์ที่ไม่ได้เปิดจะมีอายุ 1 ปี เมื่อเปิดน้ำยาแล้ว จะมีอายุ 6 เดือน ห้ามแช่แข็งผลิตภัณฑ์นี้

คำแนะนำ

1. การเตรียมตัวก่อนการทดลอง

1) อุปกรณ์การทดลองที่ไม่มีให้ในชุดนี้แต่จำเป็นสำหรับการทดลอง:

ก. เคล็ดลับปลอด RNase;

ข. หลอดเซนตริฟิวจ์แบบปลอด RNase

ค. กระดาษปลอดฝุ่น

d. แผ่นเตรียมตัวอย่างก่อนการทดลองที่ปราศจาก RNase

e. น้ำดีไอออนไนซ์ หรือ น้ำกลั่นสองครั้ง

2) เครื่องมือและอุปกรณ์ที่ต้องมีแต่ไม่ได้จัดให้มี:

ก. เครื่องอ่านไมโครเพลทแบบอเนกประสงค์ (รวมถึงโหมดตรวจจับความยาวคลื่นคู่ ครอบคลุม 450 นาโนเมตรและ 650 นาโนเมตร สามารถใช้ 450 นาโนเมตรเป็นความยาวคลื่นตรวจจับ และ 650 นาโนเมตรเป็นความยาวคลื่นอ้างอิง)

ข. เครื่องล้างจานแบบอัตโนมัติเต็มรูปแบบ เครื่องผสมแบบน้ำวน เครื่องผสมอุณหภูมิคงที่ เครื่องเหวี่ยง

c. ไมโครปิเปตความแม่นยำและไมโครปิเปตหลายช่องที่มีข้อกำหนดต่างกัน

d. ตัวตั้งเวลา ตู้เย็น 4℃;

e. เครื่องเขย่าไมโครเพลท

2. การวิเคราะห์ผลลัพธ์

ก. หากค่า OD ของตัวอย่างที่ต้องการทดสอบเกินค่า OD ที่จุดสูงสุดของกราฟมาตรฐาน จำเป็นต้องเจือจางตัวอย่างแล้ววัดค่าใหม่

ข. ขั้นตอนการพัฒนากราฟ: สร้างกราฟมาตรฐานโดยวาดค่าความเข้มข้นมาตรฐานบนแกน x และวาดค่าการดูดกลืนแสงมาตรฐานที่ปรับเทียบแล้วบนแกน y เครื่องมือวาดภาพและซอฟต์แวร์สถิติต่างๆ สามารถช่วยในการสร้างกราฟมาตรฐานและการกำหนดความเข้มข้นของตัวอย่างที่ไม่ทราบค่าได้ ขอแนะนำให้ใช้วิธีการปรับค่าสี่พารามิเตอร์หรือห้าพารามิเตอร์สำหรับการทดลองนี้ในที่สุด ให้คำนวณปริมาณที่เหลือของ dsRNA ในตัวอย่างโดยอ้างอิงจากเส้นโค้งมาตรฐานและพิจารณาปัจจัยการเจือจางของตัวอย่าง

c. กราฟมาตรฐานที่ให้มาเป็นเพียงตัวอย่างประกอบ (เพื่อใช้เป็นข้อมูลอ้างอิงเท่านั้น) เนื้อหาตัวอย่างจริงควรพิจารณาโดยใช้กราฟมาตรฐานที่สร้างขึ้นโดยเฉพาะสำหรับมาตรฐานการทดลองเดียวกัน

3. แผนผังขั้นตอนการทดลอง

รูปที่ 5 แผนผังขั้นตอนการทดลอง

4. ประสิทธิภาพของสินค้า

ประสิทธิภาพของชุดนี้ได้รับการประเมินอย่างสมบูรณ์แล้ว สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม โปรดติดต่อเจ้าหน้าที่ด้านเทคนิคเพื่อรับรายงานการตรวจสอบประสิทธิภาพที่เกี่ยวข้อง

5. หมายเหตุ

1. โปรดอ่านคู่มือการใช้งานฉบับนี้โดยละเอียดก่อนใช้ชุดนี้
2. โปรดใช้ผลิตภัณฑ์นี้ภายในระยะเวลาที่มีอายุการใช้งาน และห้ามผสมสารเคมีที่เกี่ยวข้องจากชุดที่แตกต่างกัน
3. ต้องนำสารเคมีทั้งหมดกลับไปไว้ที่อุณหภูมิห้องก่อนใช้งาน
4. เพื่อความปลอดภัยและสุขภาพของคุณ โปรดสวมเสื้อคลุมแล็บและถุงมือแบบใช้แล้วทิ้ง
5. ผลิตภัณฑ์นี้มีวัตถุประสงค์เพื่อการวิจัยทางวิทยาศาสตร์เท่านั้น
   
   

   เอกสาร:

   เอกสารข้อมูลความปลอดภัย

   คู่มือ