T7 RNA polymerase gmp -grade (250 u/μl) -10625es

YeasenSKU: 10625ES10

ขนาด: 10 ku
ราคา:
ราคาขาย$140.00
คลังสินค้า:
ในสต็อก

ผลิตภัณฑ์นี้เป็นแบคทีเรียโฟจ T7 RNA โพลิเมอเรสที่ได้จากการแสดงออกของโปรตีนรีคอมบิแนนท์ใน Escherichia coli เป็นตัวเร่งปฏิกิริยาการสังเคราะห์ RNA จาก 5'→3' บน DNA สายคู่จากลำดับโปรโมเตอร์ T7 (5'-TAATACGACTCACTATAG*-3') และใช้ NTP เป็นสารตั้งต้น DNA ที่มีปลายทู่เชิงเส้นสายคู่หรือปลายยื่น 5' สามารถใช้เป็นแม่แบบสำหรับแบคทีเรียโฟจ T7 RNA โพลิเมอเรส จึงสามารถใช้พลาสมิดเชิงเส้นและผลิตภัณฑ์ PCR เป็นแม่แบบสำหรับการทดลองในหลอดทดลองได้ การสังเคราะห์ RNA

หมายเหตุ: G* เป็นเบสแรกของทรานสคริปต์ RNA

ผลิตภัณฑ์นี้ผลิตตามข้อกำหนด GMP และจัดมาให้ในรูปแบบของเหลว

คุณสมบัติ

  • สังเคราะห์ทรานสคริปต์ยาวและทรานสคริปต์สั้น สามารถผลิต RNA ได้ 100-200 μg ด้วยเทมเพลต DNA 1 μg
  • ผลผลิตสูงและใช้งานง่าย
  • เอนโดทอกซินต่ำ
  • ทดสอบการไม่มีเอ็นโดนิวคลีเอส เอ็กโซนิวคลีเอส RNases

แอปพลิเคชัน

  • การเตรียมโพรบ RNA ที่มีฉลากกัมมันตรังสี
  • การสร้าง RNA เพื่อศึกษาโครงสร้าง การประมวลผล และการเร่งปฏิกิริยาของ RNA
  • การควบคุมการแสดงออกผ่านแอนติเซนส์อาร์เอ็นเอ
  • การสังเคราะห์ mRNA, sgRNA

ข้อมูลจำเพาะ

แหล่งที่มา แสดงออกใน อี.โคไล ด้วยยีนโพลีเมอเรส RNA T7 แบบรีคอมบิแนนท์
อุณหภูมิที่เหมาะสม 37℃
บัฟเฟอร์เก็บข้อมูล ทริส-HCl 50 มิลลิโมลาร์, EDTA 1 มิลลิโมลาร์, DTT 10 มิลลิโมลาร์, NaCl 100 มิลลิโมลาร์, ไทรทัน X-100 0.1%, 50% (v/v) กลีเซอรีน, pH7.9 ที่ 25℃
คำจำกัดความของหน่วย ปริมาณเอนไซม์ที่ต้องการเพื่อรวม 1 nmol ของ [3H] GMP ลงในตะกอนที่ไม่ละลายในกรดภายใน 1 ชั่วโมงที่ 37°C และ pH 8.0 กำหนดให้เป็น 1 หน่วย


คุณภาพ

รายการ COA มาตรฐาน
กิจกรรม 250-300U/ไมโครลิตร
โปรตีน ความเข้มข้น ≥0.5มก./มล.
ความบริสุทธิ์ ≥95%
เอนโดทอกซิน <20 EU/มก.
โปรตีเอสตกค้าง เชิงลบ
เอ็กโซนิวคลีเอสตกค้าง เชิงลบ
ไนคาเซ่ตกค้าง เชิงลบ
เอนไซม์ RNase ที่เหลือ เชิงลบ
อี. โปรตีนโฮสต์โคไล <50ppm
อีโคไลโฮสต์ ดีเอ็นเอ <10 กรัม/หน่วย
ไมโคพลาสมา ดีเอ็นเอ เชิงลบ

ส่วนประกอบ

ส่วนประกอบ หมายเลข ชื่อ 10625ES10 (10 ก.พ.) 10625ES60 (100 ก.ว.) 10625ES86 (2,500 คู) 10625ES99 (100 มิว)
10625 โพลิเมอร์ RNA ของ T7 เกรด GMP (250 U/μL) 40 ไมโครลิตร 400 ไมโครลิตร 10 มล. 400 มล.

การขนส่งและการเก็บรักษา

ผลิตภัณฑ์เกรด GMP ของ T7 RNA Polymerase จัดส่งด้วยน้ำแข็งแห้งและสามารถจัดเก็บที่อุณหภูมิ -15℃ ~ -25℃ ได้นานหนึ่งปี

ตัวเลข

รูปที่ 1 สังเคราะห์ RNA มาตรฐานในหลอดทดลองโดยใช้ชุดสังเคราะห์ RNA T7

ปฏิกิริยาถูกบ่มในเครื่อง PCR ที่อุณหภูมิ 37℃ เป็นเวลา 2 ชั่วโมง จากนั้นจึงทำการทำให้บริสุทธิ์ด้วยลูกปัดแม่เหล็ก (Cat#12602) ผลลัพธ์ที่ได้จะถูกวิเคราะห์โดยเครื่องสเปกโตรโฟโตมิเตอร์ NanoDrop ดังแสดงในรูปที่ 1

รูปที่ 2 การสาธิตการถอดรหัสของ RNA ที่มีความยาวต่างกันโดยใช้ชุด T7 ตามลำดับในอิเล็กโทรโฟเรโตแกรม (รูปที่ 2A) ไดอะแกรมอิเล็กโทรโฟเรซิสแบบแคปิลลารี (รูปที่ 2B) และโครมาโทแกรม (รูปที่ 2C)

รูปที่ 3 การสังเคราะห์ RNA ที่ถูกปิดฝาในหลอดทดลอง

ปฏิกิริยาถูกบ่มในเครื่อง PCR ที่อุณหภูมิ 37℃ เป็นเวลา 2 ชั่วโมง จากนั้นจึงทำการทำให้บริสุทธิ์ด้วยลูกปัดแม่เหล็ก (Cat#12602) ผลที่ได้จะถูกวิเคราะห์โดยเครื่องสเปกโตรโฟโตมิเตอร์ NanoDrop ตามที่แสดงในรูปที่ 3A ผลความสมบูรณ์จะถูกวิเคราะห์โดยอิเล็กโทรโฟรีซิสแบบแคปิลลารีตามที่แสดงในรูปที่ 3B

เอกสาร:

เอกสารข้อมูลความปลอดภัย
คู่มือการใช้งาน

10625_คู่มือ_HB221111_EN.pdf

การอ้างอิง & เอกสารอ้างอิง:

Stamatakos, CP, Nguyen, HT, Shekhani, R., Sidhu, G., Maximuck, WJ, Ellington, AD, & Marcotte, EM (2024) การเพิ่มประสิทธิภาพประสิทธิภาพสูงของโปรโมเตอร์ T7 เพื่อปรับแต่งการถอดรหัสในหลอดทดลอง ชีวเคมี, 63(18), 2307–2318. https://doi.org/10.1021/acs.biochem.4c00188

Storage

The products are shipped with dry ice and can be stored at -15℃ ~ -25℃ for 1 year.

FAQ

Internal testing demonstrates that our T7 enzyme achieves a relative fidelity comparable to that of Thermo Fisher, with a mutation rate of approximately 4 parts per million (ppm). Overall, the fidelity of our wild-type T7 enzyme meets standard benchmarks and fully satisfies customer requirements. Currently, there are no plans to develop a higher-fidelity variant in the ongoing project.
Yes, measurements were taken post-LiCl purification, and we have recorded the corresponding data. The A260/280 ratio typically ranges between 2.0 and 2.1, which is also consistently achieved when using our carboxyl magnetic beads for purification. Specific dataset details can be compiled and shared upon request.
This phenomenon is an inherent characteristic of the T7 transcription system and cannot be entirely eliminated. According to relevant literature, the primary strategies to control mRNA 3' self-extension include:
1)ptimizing the sequence immediately upstream of the template's 3' end;
2)Controlling the IVT yield, as excessively high transcription levels tend to increase the frequency of self-extension events.

Citations

Documents

Applications

คุณอาจชอบ

การสอบถาม

คำถามที่พบบ่อย

ผลิตภัณฑ์นี้มีวัตถุประสงค์เพื่อการวิจัยเท่านั้น และไม่ได้มีวัตถุประสงค์เพื่อใช้ในการรักษาหรือวินิจฉัยโรคในมนุษย์หรือสัตว์ ผลิตภัณฑ์และเนื้อหาได้รับการคุ้มครองโดยสิทธิบัตร เครื่องหมายการค้า และลิขสิทธิ์ที่เป็นของ Yeasen เทคโนโลยีชีวภาพ สัญลักษณ์เครื่องหมายการค้าระบุประเทศต้นกำเนิด ไม่จำเป็นต้องจดทะเบียนในทุกภูมิภาค

แอปพลิเคชั่นบางตัวอาจต้องใช้สิทธิ์ในทรัพย์สินทางปัญญาของบุคคลที่สามเพิ่มเติม

Yeasen มุ่งมั่นเพื่อวิทยาศาสตร์ที่มีจริยธรรม โดยเชื่อว่าการวิจัยของเราควรจะตอบคำถามสำคัญในขณะเดียวกันก็ต้องรับประกันความปลอดภัยและมาตรฐานทางจริยธรรม