MicroRNA, uma classe de RNAs não codificantes com um comprimento de cerca de 22 nt, é amplamente preocupada e desempenha um papel muito importante na regulação da expressão genética em plantas e animais. Este kit usa o método de fluorescência quimérica SYBR Green I para a detecção quantitativa da fluorescência de miRNA. O 2×Hieff™ miRNA Universal qPCR Master Mix é uma nova geração de reagente de detecção de PCR quantitativa fluorescente pré-misturado especialmente desenvolvido para a detecção quantitativa de miRNA. Ele contém corante de referência passivo ROX especial. Adequado para a maioria dos instrumentos qPCR, não há necessidade de ajustar a concentração de ROX em diferentes instrumentos, basta adicionar primers e modelos na preparação do sistema de reação que pode ser amplificado. A DNA Polimerase usa polimerase ativada por calor quimicamente modificada, combinada com um sistema especial de tampão, para tornar a reação mais específica, mais sensível e pode ser quantificada com precisão em uma faixa mais ampla.
Este produto é recomendado para uso com nosso kit de síntese de cDNA de primeira fita de miRNA Hifair™ (Tailing) (Cat# 11148) para obter resultados experimentais ideais.

Características

• Em toda a plataforma: não há necessidade de alterar a concentração de ROX usando cores pré-misturadas
• Alta taxa de detecção de sensibilidade: 10 pg de DNA podem ser detectados
• Bom desempenho de amplificação: Excelente eficiência de amplificação
• Alta especificidade: capaz de distinguir diferenças de base única entre miRNAs da mesma família

Aplicações

• Expressão genética

Especificações

Componentes

Armazenar

O produto deve ser armazenado a -25℃ ~ -15℃ por 1 ano.

Figuras

Figura 1. Bom desempenho de amplificação: excelente eficiência de amplificação.

Os genes miR-let-7b-5p, miR-let-7c-5p, miR-let-7e-5p e miR-let-7f-5p foram amplificados usando células 293T humanas e RNA total de fígado de camundongo como modelos.Os resultados mostraram que, em comparação com produtos similares, o Hifair™ miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (Cat# 11148ES) correspondeu ao sistema de reação do Hieff™ miRNA Universal qPCR SYBR Master Mix (Cat# 11171ES) com excelente desempenho.

Figura 2. Alta especificidade: ser capaz de distinguir diferenças de base única entre miRNAs da mesma família.

A família humana hsa-let-7 tem vários miRNAs, com poucas bases que diferem entre si, ou mesmo apenas uma única diferença de base. Amplifique esses miRNAs com diferentes primers e use a Fórmula 2- Δ CT x 100% de taxa de correspondência calculada. Os resultados mostraram que membros da família de subtipos intimamente relacionados poderiam ser efetivamente distinguidos.