Supermix de síntese de cDNA de 1ª fita do HIFAIR ™ Advance para qPCR (GDNA Digester Plus) _ 11155es

YeasenSku: 11155ES10

Tamanho: 10 t
Preço:
Preço de venda$55.00
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Hifair™ AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix para qPCR (gDNA digester plus) é uma versão atualizada do Hifair™ Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix para qPCR (gDNA digester plus). Comparado com a geração anterior Hifair™ Ⅲ Transcriptase Reversa, este produto exibe tolerância aprimorada a inibidores, velocidade de transcrição reversa mais rápida e maior rendimento de cDNA, tornando-o adequado para reações de transcrição reversa de RNA de animais, plantas e microrganismos. O gDNA Digester Mix -V2 incluído neste produto foi significativamente melhorado em sua capacidade de remover DNA residual, digerindo efetivamente até 1000 ng de DNA, garantindo resultados mais confiáveis ​​ao eliminar a contaminação de DNA em modelos de RNA.

Hifair™ AdvanceFast SuperMix contém todos os componentes necessários para a transcrição reversa. Basta adicionar o modelo de RNA e o H livre de RNase2O para iniciar a reação, ao mesmo tempo em que encerra a atividade do gDNA Digester para garantir a integridade do cDNA.

Os produtos de transcrição reversa são adequados para qPCR baseado em corante e em sonda. No entanto, eles não são recomendados para amplificação de fragmentos longos, como clonagem de genes. Para tais aplicações, Hifair™ O kit de síntese de cDNA AdvanceFast 1st Strand (Cat#11150ES) é recomendado para transcrição reversa de alta eficiência.

Especificações

Cat.No.

11155ES10 / 11155ES60

Tamanho

10 toneladas / 100 E

Componentes

Componentes No.

Nome

11155ES10

11155ES60

11155-A

Hifair™ AdvanceFast SuperMix

60 μL

600 μL

11155-B

Mistura para Digestor de gDNA -V2

20 μL

200 µeu

11155-C

RNase livre H2O

200 μL

2×1 mL

Armazenar

Este produto deve ser armazenado a -25~-15℃ por 1 anos.

Instruções

1. Quando a remoção de DNA é necessária

1) Digestão de DNA

Prepare a seguinte mistura em um tubo de microcentrífuga livre de RNase, misture delicadamente por pipetagem e incubar a 37℃ por 2 min:

Componentes

Volume(μL)

Mistura para Digestor de gDNA -V2

2

RNA total

10 pg–2 µg*

ou mRNA

10 pg–500 ng

RNase livre H2O

Até 14

*É recomendado usar ≤ 2 µg de RNA Total. Se a expressão do gene alvo for baixa, a quantidade pode ser aumentada até 5 µg de RNA Total.

2) Configuração da reação de transcrição reversa (sistema de 20 µL):

Componentes

Volume(μL)

Mistura de reação da etapa 1

14

Hifair™ AdvanceFast SuperMix

6

3) Programa de Reação:

Temperatura

Tempo

50℃

5 minutos

85℃

5 segundos

2. Quando a remoção do DNA é Não Obrigatório

1) Configuração da reação de transcrição reversa (sistema de 20 µL):

Componentes

Volume(μL)

Hifair™ AdvanceFast SuperMix

6

RNA total

10 pg–2 µg*

ou mRNA

10 pg–500 ng

RNase livre H2O

Até 20

*É recomendado usar ≤ 2 µg de RNA Total. Se a expressão do gene alvo for baixa, a quantidade pode ser aumentada até 5 µg de RNA Total.

2) Programa de Reação:

Temperatura

Tempo

50℃

5 minutos

85℃

5 segundos

Notas

1. Este produto é somente para uso em pesquisa.

2. Por favor, opere com jalecos e luvas descartáveis,para sua segurança.

3. Execute todas as etapas de pipetagem e mistura no gelo para manter a integridade da amostra.

4. Inverta suavemente e centrifugue cada componente em baixa velocidade antes de usar para garantir uma mistura adequada.

Documento:

Manual

Storage

This product should be stored at -25~ -15℃ for 1 year.

FAQ

This product is subsequently used for qPCR of common RNA. Random primers N6 and Oligo dT have been added in a certain proportion in the reverse transcription premix, so no additional primers are required. If qPCR or long fragment PCR for special RNAs such as small RNAs or circular RNAs is to be conducted subsequently, it is recommended to use the separate primer reverse transcription kits 11139ES or 11149ES.
For molecular enzyme reagents, simply invert and mix them together, then perform a gentle centrifugation. It is not recommended to vigorously shake to mix them.
The 11155ES can accommodate RNA input ranging from 10 pg to 5 μg. However, an excessively high RNA input does not necessarily lead to a more forward Ct value. Additionally, an excessively high input of self-prepared RNA also brings about residual other components. These inhibitory components remaining in the reverse transcription product may inhibit the subsequent qPCR reaction, resulting in an increased Ct value, fluctuation of the curve, or precipitation of the product. Ultimately, it is necessary to dilute the cDNA for use to achieve the final result.
It is not recommended to use a longer reverse transcription time. Using a longer time may cause the Ct value to be delayed. It is recommended to follow the procedure suggested in the manual.
For the PCR instrument, proper settings should be made. It is recommended to set the temperature at 4℃ for an infinite duration (∞) after the reaction is completely terminated. This is to prevent the possibility of forgetting to remove the tube after the reaction is completed. The PCR hot lid, through heat conduction, keeps the product in a high-temperature heating state.
No need. The reverse transcription product is usually a mixture, besides the cDNA product, there are also residual RNA, proteins, salt ions, dNTPs, etc. Among them, dNTPs cause significant interference for the determination using a microplate spectrophotometer, and the final measured value obtained from the product determination is not the concentration of the product. The equal amount level has been controlled and added in the RNA section before reverse transcription.
The product has been tested and found to be stable for one week at room temperature without any adverse effects. Therefore, it can be used to complete the subsequent experiments.
After opening, ensure that the reagents have not been contaminated by the syringe tips. Then, they can be stored at 4℃. However, it is recommended to use them up within 2 weeks.
We recommend using products 11188–11190ES.

Citations

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Investigação

Perguntas frequentes

O produto é apenas para fins de pesquisa e não se destina ao uso terapêutico ou diagnóstico em humanos ou animais. Os produtos e o conteúdo são protegidos por patentes, marcas registradas e direitos autorais de propriedade da Yeasen Biotechnology. Os símbolos de marca registrada indicam o país de origem, não necessariamente o registro em todas as regiões.

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Yeasen se dedica à ciência ética, acreditando que nossa pesquisa deve abordar questões críticas, garantindo ao mesmo tempo padrões éticos e de segurança.