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A DNase I é uma endonuclease que pode digerir DNA fita simples e fita dupla para produzir desoxinucleotídeos simples ou oligodesoxinucleotídeos fita simples ou fita dupla. Ela pode hidrolisar a ligação fosfodiéster para produzir monodesoxinucleotídeos e oligodesoxinucleotídeos contendo grupos 5'-fosfato e grupos 3'-OH. O produto médio da digestão é o menor politetranucleotídeo. A DNase I pode catalisar muitas formas de DNA, como DNA fita simples, DNA fita dupla e até mesmo cromatina (sua taxa de corte é afetada por histonas). A faixa de pH ideal é 7-8. A atividade da DNase I depende de Ca2+ e pode ser ativado por íons metálicos divalentes, como Co2+, MN2+, Zinco2+, etc. 5 mM Ca2+ pode proteger a enzima de ser hidrolisada. Na presença de Mg2+, a enzima pode reconhecer e cortar qualquer sítio em qualquer fita de DNA aleatoriamente; e na presença de Mn2+, ele pode reconhecer duas fitas de DNA ao mesmo tempo e cortar quase no mesmo local para formar pontas rombas, ou pontas pegajosas com 1-2 nucleotídeos salientes. A DNase I é amplamente usada na preparação de RNA livre de DNA; remover o DNA molde após a transcrição in vitro; preparar RNA livre de DNA antes das reações de RT-PCR e RT-qPCR; combinar com a DNA polimerase I para executar a marcação de DNA por meio da translocação de nick; construção de biblioteca de fragmentação de DNA.
Este produto é produzido de acordo com os requisitos do processo GMP e é fornecido na forma líquida.
Recurso
- Endonuclease específica de DNA
- Degrada o DNA fita dupla e fita simples
- Os produtos são oligos curtos com 5'-fosfato e 3'-OH
Aplicativo
- Remoção de DNA genômico contaminante de amostras de RNA
- Degradação de moldes de DNA em reações de transcrição
Especificação
| Fonte | Recombinante E. coli com gene DNase I |
| Temperatura ideal | 37℃ |
| Buffer de armazenamento | 10 mM Tris-HCl pH 7,6, 2 mM CaCl2, 50% (v/v) Glicerol |
| Definição de unidade | A quantidade de enzima necessária para degradar completamente 1 μg de DNA plasmídeo em 10 min a 37 °C. (O tampão de reação é: 10 mM Tris-HCl pH 7,6, 2,5 mM MgCl2, 0,5 mM CaCl22, 1 μg de DNA plasmídeo) |
Componentes
| Componentes No. | Nome | 10611ES76 (500 U) | 10611ES84 (2.000 U) | 10611ES92 (10.000 U) |
| 10611 | Desoxirribonuclease I (DNase I) grau GMP (2 U/μL) | 250 μL | 1 mL | 5 mL |
Envio e armazenamento
Os produtos de desoxirribonuclease I (DNase I) de grau GMP são enviados com gelo seco e podem ser armazenados a -15℃ ~ -25℃ por um ano.
Figuras
Figura 1. A DNase I da YEASEN pode efetivamente remover o molde de DNA durante a transcrição, em comparação com marcas concorrentes.
[1] Lu Z, Liu H, Song N, et al. METTL14 agrava a lesão do podócito e a progressão da glomerulopatia por meio da regulação negativa dependente de N<sup>6</sup>-metiladenosina de Sirt1. Cell Death Dis. 2021;12(10):881. Publicado em 27 de setembro de 2021. doi:10.1038/s41419-021-04156-y(IF:8.469)
[2] Yu Y, Wang Y, Zhang W, et al. Substituto biomimético de periósteo-osso composto de matriz derivada de pré-osteoblasto e hidrogel para reparo de grandes defeitos ósseos segmentares. Acta Biomater. 2020;113:317-327. doi:10.1016/j.actbio.2020.06.030(IF:7.242)
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