A ferramenta circular de pesquisa de RNA -RNase R

A ferramenta de pesquisa de RNA circular - RNAse R

—— Acelerando o desenvolvimento de medicamentos de RNA circular

Nos últimos anos, a vacina/medicamento de mRNA gradualmente entrou na visão do público. A vacina/medicamento de mRNA tem as vantagens de design rápido, baixo custo e fácil produção, mas como o próprio mRNA é fácil de degradar, atualmente é principalmente melhorada a estabilidade da preparação de mRNA adicionando um chapéu e cauda, ​​e tradução assistida de mRNA. Nos últimos anos, os pesquisadores descobriram um novo tipo de RNA - RNA circular (RNA circular, circRNA). Esses RNAs são uma estrutura de anel fechado covalente, que não é fácil de ser degradada. Comparado com o mRNA, o circRNA é mais estável e pode atingir tradução não dependente de chapéu. Portanto, a descoberta do CIRCRNA fornece possibilidades para o desenvolvimento de uma nova geração de vacinas e medicamentos de RNA com estabilidade mais simples e melhor.

Figura 1: O processo da vacina de RNA 1

O processo de produção do CIRCRNA inclui: preparação do molde, transcrição in vitro, remoção do molde de DNA, circular e purificação. Após o RNA ser circularizado, é necessário usar a ribonuclease R (Ribonuclease R, RNASE R) para digerir o RNA não tripulado para atingir o propósito de enriquecer o CirCRNA. A Yeasen tem engenharia enzimática molecular e plataforma de evolução racional. Ela garante a qualidade do produto ao mesmo tempo. A equipe de P&D da Yeasen desenvolveu com sucesso uma Enzima RNASE R com alta pureza e alta atividade.

RNASE R (CAT#14606ES) é uma exonuclease de ácido ribonucleico 3'→5' dependente de Mg2+ que é derivada de E. coli. Ela pode digerir todos os RNAs lineares e não digere CirCRNA, RNA lariat. Ela é frequentemente usada para remover moléculas de RNA linear e realizar o propósito de enriquecer RNA não linear, como CirCRNA e RNA lariat.

Características

Pureza da proteína (SDS-PAGE) ≥95%

Figura 2: Detecção de pureza de proteína: Diferentes volumes (1 μL, 2 μL, 3 μL) do produto (Cat#14606ES) apresentam alta pureza ≥95%.

Nenhum resíduo exonuclease

Figura 3: 20 U de RNASE R foram adicionados a 0,5 μg de λDNA-Hind III Digest, incubando a 37 ℃ por 4 horas. O resultado mostra que não há resíduos exonuclease foi detectada a partir dos produtos RNASE R (CAT#14606ES).

Capacidade de digestão de RNA linear e CircRNA

Figura 4: RNASE R (CAT#14606ES) pode digerir moléculas de RNA linear
Figura 5: CircRNA pode tolerar o tratamento de RNASE R (CAT#14606ES).

Produto

Gato

Tamanho

RNAse R (20U/μL)

14606ES

250U/2500U/10000U
RNase R (grau GMP, 20 U/μL) 14615ES 250U/2500U/10000U

T7 RNA polimerase grau GMP (250U/μL)

10625ES

10 KU/100 KU/2500 KU
CleaScrip™ T7 RNA Polimerase (baixo dsRNA, 250 U/μL) 10628ES 10 KU/100 KU/2500 KU

Referência

  1. Qu L, Yi Z, Shen Y, et al. Vacinas circulares de RNA contra SARS-CoV-2 e variantes emergentes. Célula.2022;185(10):1728-1744.e16.doi:10.1016/j.cell.2022.03.044
  2. Chen L, Wang C, Sun H, et al. A caixa de ferramentas de bioinformática para descoberta e análise de circRNA. Breve Bioinform. 2021;22(2):1706-1728. doi:10.1093/bib/bbaa001

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