RNA から cDNA まで、YEASEN Hifair™ 逆転写 5 分シリーズ製品が迅速なブレークスルーを実現します。

モロニーマウス白血病ウイルス（M-MLV）逆転写酵素は、分子生物学実験において広く用いられている逆転写酵素の一つです。より高い逆転写効率、優れた熱安定性、そしてcDNA合成速度の向上を実現するために、従来の逆転写酵素は遺伝子工学的に改良されることがよくあります。現在市販されている逆転写試薬は、一般的に15分から30分の反応時間を必要とし、これは比較的長いです。反応サンプル数が多い場合、全体的な所要時間が大幅に増加する可能性があります。YESSENの既存の5分逆転写シリーズ製品は、わずか5分で逆転写プロセスを完了できるため、時間を節約し、高い効率を実現します。

製品ポジショニング​​	製品名	猫＃
迅速、効率的、高収量逆転写プレミックス	Hifair™ AdvanceFast 1st Strand cDNA合成スーパーミックス（qPCR用）	11156ES
迅速、効率的、高収量逆転写プレミックス（gDNA除去機能付き）	Hifair™ AdvanceFast 1st Strand cDNA合成スーパーミックス（qPCR用、DNAダイジェスタープラス）	11155ES
gDNA除去と逆転写プレミックスの迅速なワンステップ完了	Hifair™ AdvanceFast ワンステップ RT-gDNA 消化スーパーミックス（qPCR 用）	11151ES
フレキシブルプライマー選択迅速逆転写キット（gDNA除去機能付き）	Hifair™ AdvanceFast 1st Strand cDNA合成キット（染料なし）	11150ES
フレキシブルプライマー選択迅速逆転写キット（gDNA除去および追跡色素付き）	Hifair™ AdvanceFast 1st Strand cDNA合成キット	11149ES

1. 迅速、効率的、高収量逆転写プレミックス（gDNA除去機能付き）（カタログ番号11155ES）

さまざまなテンプレートからの高い逆転写収率

サンプル	293T細胞	シロイヌナズナ	ねずみ	魚の肝
11155ES	23.4↓	19.6↓	24.9↓	21.1↓
ブランドA	24.9	21.3	27.5	21.3
ブランドB	26.1	20.5	27.1	23.1
ブランドC	25.7	19.8	27.3	21.9
ブランドD	24.3	21.3	28.1	24.5

図。ヒト293T細胞、シロイヌナズナ、マウス肝臓、魚肝臓由来のRNAテンプレートを用いて逆転写反応を行った。ブランドA、B、C、Dはいずれも2段階消化逆転写試薬であり、逆転写時間は15分から20分と異なる。試験結果から、Hifair 11155ES 5分逆転写キットは、他のブランドと比較して収量が高く、Ct値が低いことが示された。

2. 5分間のワンステップ消化および逆転写プレミックス（カタログ番号11151ES）

高い逆転写収率

ヒト293T細胞由来RNA——3つの異なる遺伝子の平均Ct値
RNA入力	11151ES			ブランドA			ブランドB			ブランドC
1000 ng	22.4↓	21.5↓	20.3↓	27.5	25.5	23.7	23.4	25.4	25.5	30.6	29.9	30.9
10 ng	28↓	27.1↓	25.3↓	29.8	28.9	27.6	30	29.6	29.2	32.8	32.4	31.6

図。ヒト293T細胞RNAを鋳型として、それぞれ3つの遺伝子を試験した。ブランドA、B、CはいずれもワンステップgDNA除去および逆転写試薬である。試験結果によると、1μgのインプット量と10ngのTotal RNAを用いた場合、11151ESキットは他のブランドよりも逆転写収量が高く、Ct値が小さいことが示された。

アラビドプシス・タリアナ由来RNA——平均Ct値
RNA入力	11151ES	ブランドA	ブランドB	ブランドC
1000 ng	23.3↓	31.5	25.2	35.2
10 ng	29.3↓	31.1	32.6	36.1

図。シロイヌナズナRNAを鋳型として、ブランドA、B、CはすべてワンステップgDNA除去および逆転写試薬です。試験結果によると、1μgのインプット量と10ngのTotal RNAを用いた場合、11151ESキットは他のブランドよりも逆転写収量が高く、Ct値が小さいことが示されています。

優れた感度

図。ヒト293T細胞RNAを鋳型として、GC含有量が30%、50%、60%、70%の遺伝子を増幅した。100 pg、1 ng、10 ng、100 ng、1 μgのトータルRNAを逆転写反応に使用し、蛍光定量検出を行った。この結果は、11151ESが100 pgから1 μgまでのRNAインプットの逆転写反応に対応できることを示す。

3. 5分間迅速逆転写キット（品番11149/11150ES ）

最小検出限界が10 pgまでの高感度

図。293T細胞由来のtotal RNAを鋳型として、11149ESを用いて逆転写を行い、得られたcDNAをqPCR定量分析に供した。結果は、11149ESが10 pgから1 μgまでのRNA入力を逆転写し、正確な定量結果を保証することを示している。

良好な増幅性能、最長14 kbの断片の増幅

図. 293T細胞由来のtotal RNAを鋳型として、11149ESを用いて逆転写を行い、得られたcDNAをPCRで検出した。この結果から、11149ESは1 kbから14 kbの長さのcDNA断片を合成でき、その後のPCRには一定の適用シナリオがあることがわかる。10 kbを超える断片を直接逆転写する必要がある場合は、最終断片を確実に取得するために、逆転写時間を20～30分に延長することが推奨される。

逆転写効率の比較

RNA入力量	Ct値
	11149ES	ブランドA
1μg	15.2	15.5
100 ng	18.0	18.5
10 ng	21	21.7
1 ng	24.5	25.1
100ページ	29.1	29.7
10ページ	32.7	34.3

図。293T細胞由来のtotal RNAを鋳型として、11149ESとブランドAを用いて逆転写反応を行った。11149ESはgDNA除去ステップを経なかった。得られたcDNAをqPCR定量分析に供した。結果から、ブランドAの逆転写時間は13分であったのに対し、11149ESは5分であったことが示された。異なる製品の定量分析では、11149ESのCt値が競合ブランドのCt値よりも小さいか同等であることが明らかになった。これは、11149ESの5分間逆転写効率がブランドAよりも優れているか、ほぼ同等であることを意味する。

RNA入力量	Ct値
	11149ES	ブランドB
1μg	16.2	17.4
100 ng	19.0	20.5
10 ng	22	23.8
1 ng	26	27.9
100ページ	31.4	33.2
10ページ	32.9	35.6

図. 293T細胞由来のtotal RNAを鋳型として、11149ESとBrand Bを用いて逆転写反応を行った。11149ESはgDNA除去ステップを経なかった。得られたcDNAをqPCR定量分析に供した。結果から、Brand Bの逆転写時間は20分であったのに対し、11149ESは5分であったことが示された。異なる基質量の定量分析では、11149ESのCt値はBrand Bの値よりも小さいか、または同程度であることが明らかになった。これは、11149ESの5分間逆転写効率がBrand Bよりも優れているか、ほぼ同等であることを意味する。

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