Hifair™ AdvanceFast One-step RT-gDNA Digestion SuperMix for qPCRは、Hifair™ Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR（gDNA Digester Plus）の強化版です。逆転写反応とゲノム除去反応の両方を1本のチューブで実施するという要求を満たすように設計されています。さらに、反応プロセスを効率化し、反応時間を大幅に短縮し、逆転写産物の収量を増加させます。4×Hifair® AdvanceFast One-Step RT SuperMixには、逆転写反応に必要なすべての試薬が含まれています。反応中は、gDNA Remover Mix、テンプレートRNA、水を補充するだけで、cDNAの最初の鎖を効率的に合成し、同時にゲノムDNAの混入を排除できます。本製品は複雑なRNAテンプレートの逆転写に適しており、少量のテンプレートや低コピー遺伝子を含む逆転写に非常に効果的です。

この製品で生成される逆転写産物は、プローブベースおよび色素ベースの両方のqPCR法に完全に適合します。プローブベースqPCRには、Hieff Unicon® Universal TaqMan マルチプレックスqPCRマスターミックス（カタログ番号11211）の使用を推奨します。一方、色素ベースqPCRには、高性能遺伝子発現解析のためにHieff UNICON® Universal Blue qPCR SYBR Green マスターミックス（カタログ番号11184）の使用をお勧めします。

ただし、本製品で生成される逆転写産物は、長い断片の増幅などの後続の用途には適していないことにご注意ください。これらの目的で効率的な逆転写が必要な場合は、Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA合成キット（カタログ番号11149、カタログ番号11150）のご利用をお勧めします。

特徴

• 5分間のRT

• 1本のチューブにRTとgDNA消化を統合

アプリケーション

• RT-qPCR
  
• アンチセンスRNA合成

仕様

コンポーネント

配送と保管

製品はドライアイスと一緒に発送され、-15℃～-25℃で12ヶ月間保管可能です。

使用方法

11151-A/B/Cの各試薬を氷上で解凍し、各試薬を優しく撹拌してよく混合します。次に、以下の試薬をRNaseフリーチューブに充填します。

表1: 反応の準備

*total RNAのインプット量は2μgを超えないことを推奨します。標的遺伝子の発現量が低い場合は、total RNAのインプット量を最大5μgまで増やすことができます。

表2: 反応プロトコル

*このプロセスには、逆転写と gDNA 消化の両方が含まれます。

逆転写産物は、qPCR反応にすぐに使用することも、短期間であれば-20℃で保存することもできます。長期間保存する場合は、複数回の凍結融解サイクルを避けるため、小分けにして-80℃で保存することをお勧めします。

予防：

1. すべての手順は、RNase 汚染を防ぐために最大限の注意を払って氷上で実行する必要があります。

2. 実験着と使い捨て手袋を着用して、安全と健康を確保します。

3. 本製品は科学研究目的のみに使用してください。それ以外の目的で使用しないでください。

文書:

安全データシート

11151_MSDS_HB250721.pdf

マニュアル

11151_マニュアル_Ver.EN20250721.pdf

関連ブログ：

qPCR実験におけるCt値の妥当な範囲