細胞汚染源

物理的汚染:放射線、温度変動など

化学的汚染:培地、血清、水中の不純物、エンドトキシン、可塑剤、洗剤など。

微生物汚染:細菌、真菌、ウイルス、マイコプラズマ、細胞株間の相互汚染。

微生物汚染が発生した場合の対処法

1.細菌汚染

タイプ:細菌汚染

形態:球状(球菌)、桿菌(桿菌)、螺旋状

培養培地の色:黄色

顕微鏡観察:細菌密度が高く、流砂のような方向性のある動き

推奨されるソリューション:

軽度の汚染: 10 倍抗生物質・抗真菌溶液で治療します

重度の汚染:徹底的に消毒し、培養物を廃棄することをお勧めします。

図1. 培養培地と細菌汚染の顕微鏡画像

図1. 培養培地と細菌汚染の顕微鏡画像

2.真菌汚染 — 酵母汚染

タイプ:酵母汚染

形態:球状

培養培地の色:最初は目立った変化はありませんが、時間の経過とともに黄色に変わります。

顕微鏡観察:単一の楕円形または円形の酵母細胞。出芽が起こり、より小さな娘細胞を形成することがある。

推奨されるソリューション:

推奨:汚染された培養物をそのまま廃棄します。

救済策: PBSで洗浄し、培地を交換した後、アムホテリシンBを添加することができます(注:アムホテリシンBは細胞毒性があるため推奨されません)。あるいは、汚染が制御されるまで300μg/mLのフルコナゾールで培養し、その後150μg/mLに減らして2~3継代培養します。

図2. 酵母汚染の顕微鏡画像

図2. 酵母汚染の顕微鏡画像

3.真菌汚染 — カビ汚染

タイプ:カビ汚染

形態:糸状

培養液の色:最初は変化なし、後期になると端が濁る

顕微鏡観察:菌糸は細長い糸状で、時には密集した胞子塊を形成する。

推奨される解決策:汚染された培養物は速やかに廃棄してください。CO₂インキュベーターをエタノールで徹底的に消毒し、その後、第四級アンモニウム系消毒剤(例:塩化ベンザルコニウム)で拭き取ってください。水トレイに飽和硫酸銅を添加して、真菌のさらなる増殖を抑制してください。

図3. カビ汚染の顕微鏡画像

図3. カビ汚染の顕微鏡画像

4.マイコプラズマ汚染

タイプ:マイコプラズマ汚染

細胞形態:小さな黒い点の出現

培養培地の色:明らかな変化なし

顕微鏡観察:細胞増殖の遅延と異常な形態

検出方法: マイコプラズマ検出キット

推奨されるソリューション:マイコプラズマ除去試薬を使用してください予防的管理のためにマイコプラズマ予防試薬を適用する

図4. マイコプラズマ汚染の顕微鏡画像

図4. マイコプラズマ汚染の顕微鏡画像

製品概要

製品名

仕様

カタログ番号

ゲンタマイシン硫酸塩

1g/5g/25g

60214ES03/08/25

ペニシリン-ストレプトマイシン溶液、100倍、細胞培養に適しています

100mL

60162ES76

ペニシリン・ストレプトマイシン・ネオマイシン溶液(PSN)、100×、細胞培養に適しています

100mL

60290ES60

ペニシリン-ストレプトマイシン-アムホテリシンB溶液、100×、細胞培養に適しています

100mL

60291ES60

MycAway™ マイコプラズマ qPCR 検出キット (2G)

25トン/100トン

40619ES25/60

MycAway™ 処理液 (1000×) - マイコプラズマ除去試薬

100μL/1mL/5×1mL

40607ES01/03/08

MycAway™ 予防薬 (2000×) - マイコプラズマ予防試薬

1mL/5mL

40608ES03/08

GMyc-PCRマイコプラズマ検査キット

10アッセイ/20アッセイ

40601ES10/20

MycAway™ Plus-Color ワンステップマイコプラズマ検出キット

25トン/100トン

40612ES25/60


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