HIFAIR ™ AdvanceFast 1st Strand ADNc Synthesis Supermix pour qPCR (GDNA Digester Plus) _ 11155ES

YeasenSKU: 11155ES10

Taille: 10 T
Prix:
Prix ​​de vente$55.00
Action:
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Hifair™ AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix pour qPCR (digesteur d'ADNg plus) est une version améliorée de Hifair™ III Supermix de synthèse d'ADNc 1er brin pour qPCR (digesteur d'ADNg plus). Comparé à la génération précédente de Hifair.™ Ⅲ Transcriptase inverse : ce produit présente une tolérance accrue aux inhibiteurs, une vitesse de transcription inverse plus rapide et un rendement en ADNc plus élevé, ce qui le rend adapté aux réactions de transcription inverse d'ARN d'origine animale, végétale et microbienne. Le mélange digesteur d'ADNg V2 inclus dans ce produit a été considérablement amélioré pour éliminer l'ADN résiduel, digérant efficacement jusqu'à 1 000 ng d'ADN, garantissant des résultats plus fiables en éliminant la contamination des matrices d'ARN par l'ADN.

Hifair™ AdvanceFast SuperMix contient tous les composants nécessaires à la transcription inverse. Il suffit d'ajouter la matrice d'ARN et l'ARNase H.2O pour initier la réaction, tout en mettant fin simultanément à l'activité du digesteur d'ADNg pour assurer l'intégrité de l'ADNc.

Les produits de transcription inverse conviennent à la qPCR avec ou sans sonde. Cependant, ils ne sont pas recommandés pour l'amplification de longs fragments, comme le clonage de gènes. Pour ces applications, Hifair™ Le kit de synthèse d'ADNc AdvanceFast 1st Strand (Cat#11150ES) est recommandé pour une transcription inverse à haute efficacité.

Caractéristiques

N° de cat.

11155ES10 / 11155ES60

Taille

10 T / 100 T

Composants

Composants n°

Nom

11155ES10

11155ES60

11155-A

Hifair™ AdvanceFast SuperMix

60 μL

600 μL

11155-B

Mélange de digesteur d'ADN génomique - V2

20 μL

200 μL

11155-C

H sans RNase2O

200 μL

2×1 mL

Stockage

Ce produit doit être conservé à -25~-15℃ pendant 1 années.

Instructions

1. Quand l'élimination de l'ADN est nécessaire

1) Digestion de l'ADN

Préparez le mélange suivant dans un tube à microcentrifugeuse sans RNase, mélangez doucement en pipetant et incubez à 37 °C pendant 2 minutes :

Composants

Volume(μL)

Mélange de digesteur d'ADN génomique - V2

2

ARN total

10 pg–2 µg*

ou ARNm

10 pg–500 ng

H sans RNase2O

Jusqu'à 14

*Il est recommandé d'utiliser ≤ 2 µg d'ARN total. Si l'expression du gène cible est faible, la quantité peut être augmentée jusqu'à 5 µg d'ARN total.

2) Configuration de la réaction de transcription inverse (système 20 µL) :

Composants

Volume(μL)

Mélange réactionnel de l'étape 1

14

Hifair™ AdvanceFast SuperMix

6

3) Programme de réaction :

Température

Temps

50℃

5 minutes

85℃

5 secondes

2. Lorsque l'élimination de l'ADN est Pas Requis

1) Configuration de la réaction de transcription inverse (système 20 µL) :

Composants

Volume(μL)

Hifair™ AdvanceFast SuperMix

6

ARN total

10 pg–2 µg*

ou ARNm

10 pg–500 ng

H sans RNase2O

Jusqu'à 20

*Il est recommandé d'utiliser ≤ 2 µg d'ARN total. Si l'expression du gène cible est faible, la quantité peut être augmentée jusqu'à 5 µg d'ARN total.

2) Programme de réaction :

Température

Temps

50℃

5 minutes

85℃

5 secondes

Remarques

1. Ce produit est destiné à la recherche uniquement.

2. Veuillez travailler avec des blouses de laboratoire et des gants jetables,pour votre sécurité.

3. Effectuez toutes les étapes de pipetage et de mélange sur de la glace pour maintenir l’intégrité de l’échantillon.

4. Retournez délicatement et centrifugez chaque composant à basse vitesse avant utilisation pour assurer un mélange correct.

Document:

Manuel

Storage

This product should be stored at -25~ -15℃ for 1 year.

FAQ

This product is subsequently used for qPCR of common RNA. Random primers N6 and Oligo dT have been added in a certain proportion in the reverse transcription premix, so no additional primers are required. If qPCR or long fragment PCR for special RNAs such as small RNAs or circular RNAs is to be conducted subsequently, it is recommended to use the separate primer reverse transcription kits 11139ES or 11149ES.
For molecular enzyme reagents, simply invert and mix them together, then perform a gentle centrifugation. It is not recommended to vigorously shake to mix them.
The 11155ES can accommodate RNA input ranging from 10 pg to 5 μg. However, an excessively high RNA input does not necessarily lead to a more forward Ct value. Additionally, an excessively high input of self-prepared RNA also brings about residual other components. These inhibitory components remaining in the reverse transcription product may inhibit the subsequent qPCR reaction, resulting in an increased Ct value, fluctuation of the curve, or precipitation of the product. Ultimately, it is necessary to dilute the cDNA for use to achieve the final result.
It is not recommended to use a longer reverse transcription time. Using a longer time may cause the Ct value to be delayed. It is recommended to follow the procedure suggested in the manual.
For the PCR instrument, proper settings should be made. It is recommended to set the temperature at 4℃ for an infinite duration (∞) after the reaction is completely terminated. This is to prevent the possibility of forgetting to remove the tube after the reaction is completed. The PCR hot lid, through heat conduction, keeps the product in a high-temperature heating state.
No need. The reverse transcription product is usually a mixture, besides the cDNA product, there are also residual RNA, proteins, salt ions, dNTPs, etc. Among them, dNTPs cause significant interference for the determination using a microplate spectrophotometer, and the final measured value obtained from the product determination is not the concentration of the product. The equal amount level has been controlled and added in the RNA section before reverse transcription.
The product has been tested and found to be stable for one week at room temperature without any adverse effects. Therefore, it can be used to complete the subsequent experiments.
After opening, ensure that the reagents have not been contaminated by the syringe tips. Then, they can be stored at 4℃. However, it is recommended to use them up within 2 weeks.
We recommend using products 11188–11190ES.

Citations

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Enquête

FAQ

Le produit est destiné à des fins de recherche uniquement et n'est pas destiné à un usage thérapeutique ou diagnostique chez l'homme ou l'animal. Les produits et le contenu sont protégés par des brevets, des marques déposées et des droits d'auteur appartenant à Yeasen Biotechnology. Les symboles de marque indiquent le pays d'origine, pas nécessairement l'enregistrement dans toutes les régions.

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