D -luciferina, sal de sodio D -40901es
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D -luciferina, sal de sodio D -40901es
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La D-luciferina es un sustrato común para la luciferasa y se utiliza ampliamente en toda la biotecnología, especialmente en la tecnología de imágenes in vivo.  El mecanismo de acción es que la luciferina (el sustrato) se oxida para emitir luz en respuesta al ATP y la luciferasa (ver la figura a continuación). Se produce cuando hay demasiada luciferina. El número cuántico de luz se correlacionó positivamente con la concentración de luciferasa. Los plásmidos que llevan el gen codificador de la luciferasa (Luc) se transfectaron en células y se introdujeron en animales de estudio,...

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D -luciferina, sal de sodio D -40901es

YeasenSku: 40901ES01
Tamaño: 100 mg
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$100.00
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La D-luciferina es un sustrato común para la luciferasa y se utiliza ampliamente en toda la biotecnología, especialmente en la tecnología de imágenes in vivo. El mecanismo de acción es que la luciferina (el sustrato) se oxida para emitir luz en respuesta al ATP y la luciferasa (ver la figura a continuación). Se produce cuando hay demasiada luciferina. El número cuántico de luz se correlacionó positivamente con la concentración de luciferasa. Los plásmidos que llevan el gen codificador de la luciferasa (Luc) se transfectaron en células y se introdujeron en animales de estudio, como ratas y ratones. In vivo, luego se inyecta fluoresceína y se detectan los cambios en la intensidad de la luz utilizando imágenes de bioluminiscencia (BLI) para monitorear la progresión de la enfermedad o la eficacia del fármaco en tiempo real, etc. La influencia del ATP en el sistema de reacción también se puede utilizar para indicar energía o signos vitales según los cambios en la intensidad de la bioluminiscencia.

La D-luciferina también se utiliza comúnmente en estudios in vitro, incluidos el análisis de los niveles de luciferasa y ATP; análisis de genes reporteros; secuenciación de alto rendimiento y varias pruebas de contaminación. Actualmente existen tres formas de producto: D-luciferina (ácido libre), sales de D-luciferina (sales de sodio y potasio). La principal diferencia radica en la solubilidad: la primera es soluble en agua y la solubilidad del sistema tampón es débil, excepto soluble en bases débiles como soluciones de NaOH y KOH de baja concentración, soluble en metanol y DMSO; el último es fácilmente soluble en agua o tampón, fácil de usar, solvente no tóxico, especialmente adecuado para experimentos in vivo. Como solución, no existe una diferencia sustancial entre los tres productos en la gran mayoría de aplicaciones.

Características

  • Sin radiación, prácticamente inofensivo para los organismos vivos.
  • Bioluminiscencia, sin fuente de luz de excitación.
  • Es tan sensible que se puede detectar en unos cientos de células.
  • Buena penetración, aún se puede detectar una profundidad de tejido de 3-4 cm.
  • Alta relación señal-ruido, fuerte señal de fluorescencia y buena antiinterferencia.

Solicitud

  • En el experimento de tumorigénesis en ratones desnudos, se observó el crecimiento del tumor sin invasión en tiempo real, sin medición de extirpación del tumor.
  • Para probar el efecto de la administración sobre el crecimiento del tumor o la metástasis, el sustrato de fluoresceína puede eliminarse completamente en 3 horas, sin interferir en el experimento farmacológico.
  • Se detectó la localización y distribución de células extrañas en animales.
  • El gen objetivo o el promotor del gen objetivo se fusiona con el gen de la luciferasa para detectar cambios en la expresión genética durante el tratamiento farmacológico o la progresión de la enfermedad.
  • Monitoreo del trasplante de células madre, supervivencia y proliferación; seguimiento de la distribución y migración de células madre in vivo.

Presupuesto

sinónimo en inglés (S)-4,5-Dihidro-2-(6-hidroxi-2-benzotiazolil)-4-tiazolcarboxílico ácido sodio sal; D-Luciferina luciérnaga, sal sódica monohidrato;
NÚMERO CAS 103404-75-7
Fórmula NaClH7N2O3S2·H2O
Peso molecular 320,32 g/mol
Apariencia Polvo amarillo claro
Solubilidad Soluble en agua (100 mg/mL)
Pureza (CLAR) ≥95%

Componentes

Componentes No. Nombre 40901ES01 40901ES02 40901ES03 40901ES08 40901ES10
40901 D-luciferina, sal sódica 100 mg 500 mg 1 gramo 5g 10 g

Almacenamiento

El producto debe almacenarse a -15 ℃. ~-25℃ para 1 año.

Documentos:
Citas y referencias:

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Storage

The product should be stored at -15℃ ~ -25℃ for 1 year.

FAQ

There is no difference. The three are merely variations in naming by different companies, and they are all compounds (S)-2-(6-Hydroxy-2-benzothiazolyl)-2
- Thiazoline-4-carboxylic acid.
Besides being used for in vivo imaging, fluorescent dye products are also employed in other applications involving luciferase, such as in vitro reporter gene assays, microbial/viral monitoring, pyrosequencing, etc.
Sodium fluorescein: It can be used for cell permeability testing. The permeability of the pigment can be determined by measuring the absorbance value at OD490. D-Fluorescein sodium salt: Used in in vivo imaging and reporter gene systems. It is detected through a cold luminescence module and does not require excitation light stimulation.
The main differences among the three are as follows:
1) Solubility: The salt form is easily soluble in water. The solubility of potassium salt is 60mg/ml, and that of sodium salt is 100mg/ml. Free acid is not easily soluble in water. It can be dissolved by a weak alkaline solution of sodium bicarbonate, and its solubility in methanol is 10mg/ml, and in DMSO is 50mg/ml.
2) Toxicity: The salt form is more convenient to use during the process, especially in in vivo imaging experiments, as it can dissolve in water and thus has less reaction toxicity (Fluorescein is a low-molecular-weight organic compound composed of phenylthiazole and thiazole carboxylic acid groups, which has low toxicity). 3) Usage effect: There is no significant difference. In in vivo experimental studies, the usage rate of potassium salt is higher.
 It has an impact. The purity is above 99%, with a good level of 99%. For 99% pure fluorescein, there is 1% of solid impurities. If these 1 grams of impurities are dissolved in 25 ml of buffer solution (this dilution ratio is the standard dilution method for in vivo imaging experiments), the concentration of the impurities at this time is 0.4 g/L. Assuming the molecular weight of the impurities is 1000 g/mol, then the molar concentration of the impurities is 400 μM. This concentration may inhibit the action of certain enzymes in the cells and may reduce the experimental effect or cause harm to the animals.
The powder should be stored in a dark place at -20 or -70 degrees Celsius. Its validity period is at least one year.
D-fluorescein (D-Luciferin) is a commonly used substrate for luciferase. Its mechanism of action is that under the action of ATP and luciferase, the fluorescent substance (the substrate) can be oxidized and emit light. When there is an excess of fluorescent substance, the number of photons produced is positively correlated with the concentration of luciferase. 2. Native ctenoidin (Coelenterazine native) is an acting substrate for various luciferases such as sea kidney luciferase (Rluc) and Gaussia luciferase (Gluc).
Recommended instruments:
1. Instruments with a biochemiluminescence detection module. The light produced by luciferin can be detected by a photometer or a scintillation counter. Common in vivo imaging instruments: such as the IVIS® Lumina small animal in vivo imaging system, and the In-Vivo Xtreme multi-mode small animal in vivo imaging instrument from Bruker, Germany.
2. Multi-functional microplate readers: It is necessary to confirm with the instrument manufacturer whether it is a specific biochemiluminescence detection module (note: cannot use a fluorescence microscope).
Chemiluminescence, no excitation wavelength required. The emission wavelength of firefly luciferin is 560 nm. The emission wavelength of sea kidney luciferin is 465 nm.
It can pass through the blood-brain barrier, the placental barrier and the blood test barrier, and also enter living cells.
The recommended concentrations are derived from the literature:
1) Injection method: It can be done through intraperitoneal injection or tail vein injection.
2) Injection volume: The scientific approach is to evaluate the injection dose based on the kinetic curve. The initial attempted injection dose was set at 150mg substrate/kg of mouse body weight. Therefore, the purchase quantity can be calculated according to the above method: If there are 10 mice, 22 - 25g, then 33 - 37.5mg of substrate is required.
Approximately 3 minutes after intraperitoneal injection of fluorescein into mice, cells expressing luciferase began to emit light. The intensity reached a stable peak after 10 minutes, and this peak lasted for about 10 - 15 minutes before gradually diminishing. Detection can be conducted within 10 - 15 minutes after the injection. This is for reference only. It is recommended to conduct a preliminary experiment to establish the kinetics curve of luciferase, thereby determining the optimal time for signal detection and the signal plateau period.
To successfully conduct the in vivo imaging experiment, the following conditions are required: The target tissue or cells must express the luciferase gene; the injection of the luciferin substrate must be successful; and the thickness of the tissue at the luminescent site is also a factor. If the experiment fails, the reasons can be investigated from these aspects: whether the luciferase gene is expressed, whether the luciferin substrate was injected correctly, and whether the luminescent site is deep.

Citations

Documents

Brochure
In_vivo_imaging_Leaving_Tumor_Cells_Nowhere_to_Hide.pdf

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