Genel bakış
Coelenterazine, doğada bol miktarda bulunan doğal bir floresindir ve çoğu Deniz lüminesans organizmasının (75%'ten fazla) ışık enerjisi depolama molekülüdür. Coelenterazine, deniz böbreği lüsiferaz (Rluc), Gaussia salgılı lüsiferaz (Gluc) ve aequorin ve Obelia gibi Fotoproteinler gibi birçok lüsiferaz enzimi için bir substrat olarak kullanılabilir. Ateş böceği lüsiferaz/lüsiferaz sisteminin aksine, Coelenterazine/lüsiferaz sistemi adenozin trifosfat (ATP) gerektirmez ve bu da biyofloresansı canlı organizmada incelemeyi kolaylaştırır. Bu nedenle, Coelenterazine genellikle muhabir gen analizlerine ve canlı hayvan analizlerine dayalı floresan analizleri için bir lüminesans substratı olarak kullanılır.
Şu anda kullanılan ana ticari Coelenterazine, Coelenterazine native'dir. Ayrıca Coelenterazine h, Coelenterazine 400a, Coelenterazine cp, Coelenterazine f, Coelenterazine hcp, Coelenterazine n equals gibi birçok coelenterin türevi sentezlenmiştir. Teorik olarak, bu coelenterinler aynı deneylerde kullanılabilir, ancak ışık dalga boyu, hücre zarı geçirgenliği ve ışık kuantum verimliliğindeki farklılıklar nedeniyle aynı uygulamada farklı deneysel etkiler gösterirler.
Coelenterazin türleri
Ayrıca Coelenterazine serbest asidi olarak da bilinir. Renilla luciferase (Rluc) ve Gaussia luciferase (Gluc) gibi birçok luciferase enziminin substratıdır ve ayrıca denizanası lüminesan proteininin kofaktörüdür.
Uygulama senaryoları: Canlı hücrelerde kalsiyum iyon konsantrasyonunun tespiti, gen raporu analizi, BRET (Biyolüminesans Rezonans Enerji Transferi) çalışması, ELISA, HTS ve doku veya hücrelerde ROS düzeylerinin kemilüminesans ile tespiti vb.
Renilla lüsiferaz (Rluc) ve Gaussia lüsiferaz (Gluc) gibi birçok lüsiferaz enziminin substratıdır ve aynı zamanda denizanası ışıldayan proteininin kofaktörüdür.
Uygulama senaryosu: Işık şiddeti Coelenterazine Native'den 10 kat daha fazla olup, canlı hücrelerde muhabir gen analizi ve kalsiyum iyon konsantrasyonu tespiti için uygundur.
Coelenterazine hcp
Coelenterazine Native'in türevlerinden biridir. Coelenterazine hcp-Aequorin kompleksinin floresan yoğunluğu, Coelenterazine Native kompleksinden 190 kat daha yüksektir, yüksek kuantum verimi ve hızlı Ca2+ Kalsiyum iyon düzeylerinin tespiti için oldukça uygun bir reaksiyon hızına sahiptir.
Uygulama senaryosu: Kalsiyum iyon seviyesi tespiti için uygundur.
DeepBlue CTM olarak da bilinir, Coelenterazine Native'in türevlerinden biridir. Renilla luciferase (Rluc) için iyi bir substrattır ve emisyon dalga boyu yaklaşık 400 nm'dir, GFP reseptör proteininin sinyaline çok az müdahale eder ve Gaussia salgılı luciferase (Gluc) tarafından oksitlenemez.
Uygulama senaryosu: BRET (Biyolüminesans Rezonans Enerji Transferi) araştırmaları için tercih edilen Coelenterazine substratıdır.
Aequorin için tercih edilen substrattır ve Coelenterazine Native'den tek yapısal farkı, R-1 fenol grubundaki hidroksil grubunun flor (F) ile değiştirilmiş olmasıdır.Coelenterazine Native-Apoaequorin kompleksi tarafından üretilen toplam foton sayısıyla karşılaştırıldığında, bu kompleks foton enerjisinin sadece %80'ini üretmektedir. Avantajı ise aequorin kompleksinin oluşmasının çok az zaman almasıdır. Ca ile temas ettiğinde2+, Coelenterazine Native'den 20 kat daha fazla üretim yoğunluğuna sahip, hızlı ve yüksek verimde ışık yayar. Ayrıca hücre geçirgenliği iyidir.
Uygulama senaryosu: Aşırı yüksek Ca2+ Denizanası protein rejenerasyon deneylerini incelemek için yüksek algılama hassasiyeti gerektiğinden, substratların kullanılması önerilir.
Coelenterazine cp
Coelenterazine Native'in bir türevidir. Apoaequorin proteini ile oluşturulan fotoprotein kompleksi Coelenterazine Native'den 15 kat daha parlaktır ve daha hızlı bir Ca2+ tepkime hızı.
Uygulama senaryosu: G-protein-bağlantılı reseptörler (GPCR) ilaçlarının yüksek verimli taramasında kullanılabilir.
Coelenterazine n
Floresan yoğunluğu tüm Coelenterazine türevlerinde daha zayıftır ve Ca'ya reaksiyon hızı2+ Coelenterazine Native'den önemli ölçüde daha düşüktür.
Coelenterazine ve
Coelenterazine Native'den yapısal olarak bir etil grubu daha fazla olan Coelenterazine Native türevi. Renilla luciferase için bir substrat olarak, floresan yoğunluğu Coelenterazine Native'in %137'sidir. Coelenterazine e, denizanası lüminesan proteininin yüksek in vitro reaktivitesine ve çift emisyon tepe noktalarına (405 ve 465) sahiptir, bu da Ca'nın belirlenmesini sağlar2+ pCa5-7 aralığındaki konsantrasyon, çift dalga boylarının oranına göre. Bu yöntem, Koelenterazin konsantrasyonundan bağımsızdır, bu nedenle tespit doğruluğunu artırır. Bu türevin hücre geçirgenliği zayıf olduğundan, hücre içi ile ilgili deneyler için bu avantaja sahip değildir.
Uygulama senaryosu: Ca için çok kullanışlı bir substrat2+ düşük hassasiyetli algılama.
Coelenterazine 2-metil
Güçlü bir hücresel antioksidandır. Tekli oksijen ve süperoksit anyonları gibi hücre içi reaktif oksijen türleri üzerinde etkili bir şekilde etki edebilir ve oksidatif stres apoptozis sürecinde bir ara halkadır. Ayrıca, bileşiğin toksik olmama ve membran geçirgenliği özellikleri vardır, bu nedenle apoptozu incelemek için kullanılabilir.
Ürün Uygulaması:
1) Apoptozu incelemek için önemli bir araç olarak;
2) Ayrıca kemilüminesans yöntemiyle süperoksit anyon ve peroksinitrit anyon düzeylerinin tespiti de yapılabilmektedir.
| Ürün adı | Moleküler ağırlık | Moleküler formül | Em (nm) | RLC* | Bağıl yoğunluk | Yarım yükselme süresi (ms)** |
| 423.46 |
| 466 | 1.00 | 1 | 6-30 | |
| 407.48 |
| 466 | 0,75 | 16 | 6-30 | |
| Coelenterazine hcp | 399,48 |
| 445 | 0,65 | 500 | 2-5 |
| Coelenterazine cp | 415,48 |
| 442 | 0,63 | 28 | 2-5 |
| 425.46 |
| 472 | 0,80 | 20 | 6-30 | |
| Coelenterazine n | 457.52 |
| 468 | 0,25 | 0,15 | 6-30 |
| Coelenterazine ve | 449,5 |
| 405 ve 465 | 0,5 | 4 | 0,15-0.3 |
| 2-metil Coelenterazine | 331.37 |
| / | / | / | / |
| 391,48 |
| 400 | / | / | / |
Ürün bilgisi
| Ürün adı | Katalog numarası | Özellikler |
| 40901ES01/02/03/08 | 100mg/500mg/1g/5g | |
| 40902ES01/02/03/09 | 100mg/500mg/1g/5g | |
| 40903ES01/02/03 | 100mg/500mg/1g | |
| 40904ES02/03/08 | 1×500 μg/2×500 μg/5mg | |
| 40905ES02/03 | 1×500 μg/2×500 μg | |
| 40906ES02/03/08 | 1×500 μg/2×500 μg/5mg | |
| 40908ES02/03 | 1×500 μg/2×500 μg |
Kullanıcıların yayınlanmış literatürü (eksik istatistikler)
- Xie J, Zheng H, Chen S, Shi X, Mao W, Wang F. Vivo'da RNA Aberran Eklemesinin Kantitatif Görüntülenmesi için Etkinleştirilebilir Bir Muhabirin Rasyonel Tasarımı. Mol Ther Methods Clin Dev. 2020;17:904-911. 18 Nisan 2020'de yayınlandı.
- Lin GY, Lin L, Cai XQ ve diğerleri. Yüksek verimli tarama kampanyası, relaksin ailesi peptit reseptörü 4'ün küçük bir molekül agonistini tanımladı [baskıdan önce çevrimiçi olarak yayınlandı, 31 Mart 2020]. Acta Pharmacol Sin. 2020;10.1038/s41401-020-0390-x.
- Shao L, Chen Y, Zhang S, Zhang Z, Cao Y, Yang D, Wang MW. RAMP'ların glukagon reseptör ailesinin sinyal profilleri üzerindeki düzenleyici etkileri, Acta Pharmaceutica Sinica B.
- Haifeng Zheng, Si Chen, Xinan Wang, Jinrong Xie, Jie Tian ve Fu Wang. Canlı Deneklerde Pre-mRNA Eklemesinin Gerçek Zamanlı Görüntülenmesi için İntron Tutmalı Biyolüminesans Muhabir. CAnal. Chem. 2019, 91, 12392−12398
- Peiyu Xu, Sijie Huang, Chunyou Mao, ..., Xi Cheng, Yan Zhang, H. Eric Xu. İnsan dopamin D3 reseptör-Gi komplekslerinin yapıları.2021, Molecular Cell 81, 1147–1159
- Moxuan Ji, Xinan Wang, Haifeng Zheng, Wenjie Mao, Xiaorui Shi, Si Chen, Chu Tang ve Fu Wang Ci. Piroptotik Hücre Ölümünün Kan Takibi için Gizli Bir Muhabir. Anal. Kimya
- F Hu, Y Zhang, Q Liu, Z Wang. PurA, Edwardsiella piscicida'nın NF-κB sinyal aktivasyonundan kaçmasını kolaylaştırır. Balık ve Kabuklu Deniz Ürünleri İmmünolojisi, 2022 - Elsevier
- Haifeng Zheng, Xinan Wang, Si Chen, Xiaorui Shi, Jinrong Xie, Wenjie Mao, Jie Tian ve Fu Wang. Çift lusiferaz raportörünü kullanarak nöron farklılaşması sırasında nörona özgü mikroRNA dinamiklerinin gerçek zamanlı fonksiyonel biyogörüntülemesi. ACS Kimya Neurosci.DOI: 10.1021/acschemneuro.8b00614