hieff unicon ™ colorgps qpcr master mix (Low Rox) _ 11189ES
ม้วนภาพเพื่อซูมเข้า คลิกที่ภาพเพื่อซูม
hieff unicon ™ colorgps qpcr master mix (Low Rox) _ 11189ES
hieff unicon ™ colorgps qpcr master mix (Low Rox) _ 11189ES
Hieff UNICON™ ColorGPS qPCR Master Mix (Low Rox) เป็นสารละลายเบื้องต้นสำหรับการขยายสัญญาณ PCR เชิงปริมาณแบบเรียลไทม์ 2 เท่า ที่มีความเข้มของฟลูออเรสเซนต์สูง ความไวและความจำเพาะสูง และผลผลิตการขยายสัญญาณสูง ส่วนประกอบหลักคือ Hieff UNICON™ Taq DNA Polymerase ซึ่งเริ่มต้นอย่างรวดเร็วด้วยวิธีแอนติบอดี ซึ่งสามารถยับยั้งการขยายสัญญาณแบบไม่จำเพาะที่เกิดจากการอบไพรเมอร์ระหว่างการเตรียมตัวอย่างได้อย่างมีประสิทธิภาพ ในเวลาเดียวกัน สูตรจะเพิ่มปัจจัยเพื่อเพิ่มประสิทธิภาพการขยายสัญญาณของปฏิกิริยา PCR และตัวกระตุ้นเพื่อปรับให้การขยายสัญญาณของยีนที่มีเนื้อหา GC ต่างกัน (30~70%) เท่ากัน เพื่อให้ PCR เชิงปริมาณสามารถได้ความสัมพันธ์เชิงเส้นที่ดีในช่วงกว้างของภูมิภาคเชิงปริมาณ ผลิตภัณฑ์นี้ใช้ปฏิกิริยาเปลี่ยนสีผสมของสีย้อมต่าง ๆ เพื่อตรวจสอบการทำงานของการปิเปต ซึ่งช่วยลดการเกิดข้อผิดพลาดในการปิเปตได้อย่างมีประสิทธิภาพ คุณสมบัติ การติดตามการปิเปต: ลดความเสี่ยงของข้อผิดพลาดที่พลาด/การเพิ่มเติม การขยายที่ยอดเยี่ยม: ความเป็นเส้นตรงที่ดีในช่วงเส้นตรงที่กว้าง ความแม่นยำสูง: สามารถแยกแยะเทมเพลตได้อย่างแม่นยำด้วยความแตกต่างของความเข้มข้น 2 เท่า ความสามารถในการทำซ้ำที่ดี: ความแปรปรวนระหว่างหลุมที่น้อยในหลุมจำลอง ส่งผลให้สามารถทำซ้ำได้ดีขึ้น เสถียรและเชื่อถือได้: ระบบปฏิกิริยาสามารถเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้องได้ 24 ชั่วโมง และผลิตภัณฑ์ยังคงไม่ได้รับผลกระทบหลังจากการแช่แข็งและละลาย 20 รอบ แอปพลิเคชั่น การวิเคราะห์ความแตกต่างของการแสดงออกของยีน การวิเคราะห์เชิงปริมาณสัมบูรณ์ ข้อมูลจำเพาะ ความเข้มข้น 2 (qPCR มิกซ์) วิธีการตรวจจับ วิธีการย้อมสี วิธี PCR คิวพีซีอาร์ โพลิเมอเรส ดีเอ็นเอโพลีเมอเรส ประเภทของตัวอย่าง ดีเอ็นเอ อุปกรณ์การใช้งาน Applied Biosystems 7500, 7500 Fast, ViiA7;Stratagene MX4000, MX3005P, MX3000P และเครื่องมือ PCR เชิงปริมาณเรืองแสงอื่นๆ ที่ต้องมีการเติม ROX...

Color-Traceable qPCR: Zero Mispipetting

Frequently Bought Together

hieff unicon ™ colorgps qpcr master mix (Low Rox) _ 11189ES

บันทึก $15.00
YeasenSKU: 11189ES03
ขนาด: 1 มล.
ราคา:
$40.00 $55.00
คลังสินค้า:
ในสต็อก

Hieff UNICON™ ColorGPS qPCR Master Mix (Low Rox) เป็นสารละลายเบื้องต้นสำหรับการขยายสัญญาณ PCR เชิงปริมาณแบบเรียลไทม์ 2 เท่า ที่มีความเข้มของฟลูออเรสเซนต์สูง ความไวและความจำเพาะสูง และผลผลิตการขยายสัญญาณสูง ส่วนประกอบหลักคือ Hieff UNICON™ Taq DNA Polymerase ซึ่งเริ่มต้นอย่างรวดเร็วด้วยวิธีแอนติบอดี ซึ่งสามารถยับยั้งการขยายสัญญาณแบบไม่จำเพาะที่เกิดจากการอบไพรเมอร์ระหว่างการเตรียมตัวอย่างได้อย่างมีประสิทธิภาพ ในเวลาเดียวกัน สูตรจะเพิ่มปัจจัยเพื่อเพิ่มประสิทธิภาพการขยายสัญญาณของปฏิกิริยา PCR และตัวกระตุ้นเพื่อปรับให้การขยายสัญญาณของยีนที่มีเนื้อหา GC ต่างกัน (30~70%) เท่ากัน เพื่อให้ PCR เชิงปริมาณสามารถได้ความสัมพันธ์เชิงเส้นที่ดีในช่วงกว้างของภูมิภาคเชิงปริมาณ ผลิตภัณฑ์นี้ใช้ปฏิกิริยาเปลี่ยนสีผสมของสีย้อมต่าง ๆ เพื่อตรวจสอบการทำงานของการปิเปต ซึ่งช่วยลดการเกิดข้อผิดพลาดในการปิเปตได้อย่างมีประสิทธิภาพ

คุณสมบัติ

การติดตามการปิเปต: ลดความเสี่ยงของข้อผิดพลาดที่พลาด/การเพิ่มเติม

การขยายที่ยอดเยี่ยม: ความเป็นเส้นตรงที่ดีในช่วงเส้นตรงที่กว้าง

ความแม่นยำสูง: สามารถแยกแยะเทมเพลตได้อย่างแม่นยำด้วยความแตกต่างของความเข้มข้น 2 เท่า

ความสามารถในการทำซ้ำที่ดี: ความแปรปรวนระหว่างหลุมที่น้อยในหลุมจำลอง ส่งผลให้สามารถทำซ้ำได้ดีขึ้น

เสถียรและเชื่อถือได้: ระบบปฏิกิริยาสามารถเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้องได้ 24 ชั่วโมง และผลิตภัณฑ์ยังคงไม่ได้รับผลกระทบหลังจากการแช่แข็งและละลาย 20 รอบ

แอปพลิเคชั่น

การวิเคราะห์ความแตกต่างของการแสดงออกของยีน

การวิเคราะห์เชิงปริมาณสัมบูรณ์

ข้อมูลจำเพาะ

ความเข้มข้น

2 (qPCR มิกซ์)

วิธีการตรวจจับ

วิธีการย้อมสี

วิธี PCR

คิวพีซีอาร์

โพลิเมอเรส

ดีเอ็นเอโพลีเมอเรส

ประเภทของตัวอย่าง

ดีเอ็นเอ

อุปกรณ์การใช้งาน

Applied Biosystems 7500, 7500 Fast, ViiA7;Stratagene MX4000, MX3005P, MX3000P และเครื่องมือ PCR เชิงปริมาณเรืองแสงอื่นๆ ที่ต้องมีการเติม ROX Reference Dye ในความเข้มข้นต่ำ

ประเภทสินค้า

พรีมิกซ์สำหรับ PCR เชิงปริมาณฟลูออเรสเซนต์แบบเรียลไทม์

สมัครเข้าใช้งาน (ใบสมัคร)

การแสดงออกของยีน

ส่วนประกอบ

ส่วนประกอบ หมายเลข

ชื่อ

11189ES03

11189ES08

11189อีเอส60

11189-ก

ไฮฟ์ ยูนิคอน™ คัลเลอร์จีพีเอส qPCR มาสเตอร์มิกซ์ -ลโอ้ว ร็อกซ์)

1 มล.

5×1 มล.

100×1 มล.

11189-บี

บัฟเฟอร์เจือจาง 10×

1 มล.

1 มล.

20×1 มล.

การขนส่งและการเก็บรักษา

ควรเก็บผลิตภัณฑ์นี้ไว้ที่ -25~-15℃ เป็นเวลา 1 ปี

ตัวเลข

รูปที่ 1 สามารถได้ผลลัพธ์ที่เชื่อถือได้ภายในช่วงไดนามิก

การใช้เทมเพลตพลาสมิด 2 µL ที่มีระดับความชัน 10^1-10^7 ทำให้ยีนที่เกี่ยวข้องได้รับการขยาย Hieff UNICON™ มาสเตอร์มิกซ์ ColorGPS สามารถตรวจจับช่วงปริมาณเทมเพลตได้อย่างมีประสิทธิภาพที่ระดับ 7 ลำดับขนาด โดยให้ความเป็นเส้นตรงที่ดีภายในช่วงเชิงเส้นที่กว้าง

รูป2. สามารถแยกแยะความแตกต่างของความเข้มข้นของเทมเพลตได้แม่นยำถึง 2 เท่า

การใช้พลาสมิด 2 µL ที่เจือจางแบบไล่ระดับ 2 เท่าเป็นแม่แบบ ยีนที่เกี่ยวข้องจะถูกขยาย Hieff UNICON™ มาสเตอร์มิกซ์ ColorGPS สามารถแก้ไขความแตกต่างของความเข้มข้นของเทมเพลตได้อย่างแม่นยำ

รูป3สังเกตเห็นความแปรปรวนระหว่างหลุมที่เล็ก แสดงให้เห็นถึงความสามารถในการทำซ้ำได้ดีกว่า

โดยใช้พลาสมิดหลายสิบชุดเป็นแม่แบบ การขยายพันธุ์จะดำเนินการโดยใช้รีเอเจนต์เรืองแสงเชิงปริมาณต่าง ๆ ตามขั้นตอนที่ระบุไว้ในคู่มือการใช้งานของแต่ละรีเอเจนต์ ค่า SD บ่งชี้ว่าเมื่อเทียบกับรีเอเจนต์ถอดรหัสย้อนกลับอื่น ๆ ผลิตภัณฑ์ใหม่นี้มีความแตกต่างระหว่างหลุมจำลองน้อยกว่าและมีความสามารถในการทำซ้ำได้ดีกว่า

รูป4. มีความยืดหยุ่นมากขึ้น เหมาะกับขั้นตอนมาตรฐานหรือแบบรวดเร็ว

ในขั้นตอนมาตรฐาน เวลาแปรสภาพและเวลาขยายจะถูกตั้งไว้ที่ 10 วินาทีและ 30 วินาทีตามลำดับ ในขณะที่ขั้นตอนด่วน เวลาแปรสภาพและเวลาขยายจะถูกตั้งไว้ที่ 3 วินาทีและ 10 วินาทีตามลำดับ เพื่อตรวจจับค่า Ct ที่สอดคล้องกับยีนเป้าหมาย 10 ตัว ผลลัพธ์แสดงให้เห็นว่าค่า Ct ที่ได้จากผลิตภัณฑ์ใหม่ทั้งในขั้นตอนมาตรฐานและขั้นตอนด่วนมีความสัมพันธ์กันอย่างมาก และผลิตภัณฑ์ใหม่สามารถให้ผลลัพธ์ที่ดีได้โดยใช้ขั้นตอนด่วน

รูป5. หลังจากที่เตรียมระบบปฏิกิริยาแล้ว สามารถคงความคงตัวที่อุณหภูมิห้องได้เป็นเวลา 24 ชั่วโมง

โดยใช้ยีนต่าง ๆ จากหนู เซลล์มนุษย์ 293 และ Arabidopsis thaliana เป็นเป้าหมาย หลังจากเตรียมระบบปฏิกิริยาแล้ว ระบบจะถูกวางไว้ในที่มืดที่อุณหภูมิต่างกันเป็นเวลา 24 ชั่วโมงก่อนการตรวจจับ เมื่อเปรียบเทียบกับการประมวลผลทันที ความแตกต่างของการตรวจจับสำหรับยีนต่าง ๆ จะไม่เกิน 0.5 Ct ซึ่งบ่งชี้ว่าสามารถได้ผลลัพธ์ที่เสถียรด้วยการดำเนินการระยะยาวได้เช่นกัน

เอกสาร:

คู่มือการใช้งาน

11189_คู่มือ_เวอร์ชั่นEN20241218.pdf

Storage

This product should be stored at -25~-15℃ for 18 months.

FAQ

Please refer to the "YiSheng Biotechnology YiSheng Biotechnology Dye Method Fluorescence Quantitative PCR Mix Selection Table" for details. Click here to learn more and help you choose the appropriate reagents.
For molecular enzyme reagents, simply invert and mix them together, then perform a gentle centrifugation. It is not recommended to vigorously shake to mix them.
Refer to the manual. Ultimately, it is necessary to ensure that after being mixed with the template, the volume is exactly 1×. For example, for 20 μL of cDNA stock solution, add 180 μL of sterile ultrapure water to dilute it 10 times, resulting in 200 μL of diluted template. Take 90 μL of the diluted template and add 10 μL of 10× Dilution Buffer, mix well, and then use it. You can choose not to do this, but it will not affect the result.
You can choose to use the cDNA stock solution or dilute it. Just make sure that the Ct value of the gene you want falls within the range of 15 to 30. Generally, for every 10-fold dilution of cDNA, the Ct value increases by 3.3.
Store in a dark place and the reaction system must not be left open. These two points are essential. It can be placed in a 4℃ refrigerator or at room temperature for 24 hours. Before using, gently shake and centrifuge the sample before loading it onto the instrument. Before loading, carefully check if the tubes or plates have been contaminated.
https://cdn.shopify.com/s/files/1/0803/9419/1166/files/bbbb_1024x1024.png?v=1769394213 When designing primers, it is best to cross introns. The design method can refer to "Enjoyable! A single article to understand qPCR primer design, a must-have skill for experimental experts!" Also, validated primers can be selected. The selection method can refer to "Where to find ready-made qPCR primer sequences?"
The possible reasons are as follows:
1. The instrument has not been calibrated for a long time or it is aging. Usually, the instrument needs to be calibrated once a year. It is necessary to have an instrument engineer perform the calibration or replace the aging components.
2. A 10 μL reaction system was used. The normal system is a 20 μL system. Using half of the normal system would result in an excessively low total concentration of Rox, increasing the probability of BadRox occurrence. It is recommended to conduct the experiment using the 20 μL system.
The specificity of qPCR products can usually be determined through the melting curve. If it is still necessary to determine the products through gel electrophoresis, the qPCR product can undergo electrophoresis. Electrophoresis requires Loading Buffer, and the product cannot be directly loaded for electrophoresis.
1. Confirm whether the signal acquisition function is enabled in the program. If a two-step method is used, the signal acquisition should be set during the annealing extension stage.
2.Is the length of the product too long? If the length of the product is set to 500bp or more, this situation may occur. It is recommended that during primer design, the length of the product be controlled within the range of 80-300bp.
3. Are the primers inappropriate? If the primers are not designed correctly, they need to be redesigned. If the primers are correctly designed but seem to be degraded, PAGE electrophoresis can be used to check the integrity of the primers.
4. Template degradation: Prepare the template anew and repeat the experiment.
The analysis is conducted by observing the melting curve. The melting curve shows that the melting peak shape of NTC does not overlap with that of the corresponding gene, and the TM value of NTC is smaller than that of the corresponding gene. In this case, the product corresponding to NTC is a primer dimer. If the melting curve peak shape of the corresponding gene is a single peak, the collection of the signal of the related gene will not be affected. The melting curve shows that the melting peak shape of NTC overlaps with that of the corresponding gene. In this case, the product corresponding to NTC is likely to be the product of the corresponding gene. The system has been contaminated. We need to check one by one whether the water, primers, or reagents have been contaminated. If none of them have been contaminated, it might be aerosol contamination. Based on the obtained amplification data, the ΔCT value is calculated to determine whether the contamination has a significant impact on the system. If ΔCT ≥ 5, it indicates that the contamination has a minor effect and can be ignored.
It indicates the presence of genomic DNA contamination. It is recommended to use an RNA extraction kit that removes the genome for RNA extraction or during reverse transcription by adding a step to remove the genome. Alternatively, when designing the primers, a design across introns should be adopted.
1. If the CT value is less than 30, but the repeatability is very poor, what should we do? Improve the accuracy of sample addition. Avoid adding small volumes and reduce the error of addition. This can be achieved by preparing a large sample system, for example, mixing primers, water, and qPCR mix into a large system or using the method of mixing primers and water into a large system. The large system needs to be mixed evenly. Improve the accuracy of the pipette's aspiration. Pipettes usually need to be calibrated regularly, once a year.
2. What if CT is ≥ 30 but the repeatability is very poor? At this point, due to the low abundance of the effective template, the randomness of collisions between the template and the primers increases, thereby causing a greater difference between the replicons. It is recommended to try adding 2-3 replicons, and then eliminate the data with large differences for data analysis.
The overlapping peaks in the melting curve are located to the left of the main peak. This might be a situation caused by primer dimerization. One possible solution could be to increase the annealing temperature, reduce the primer concentration, or redesign the primers. The overlapping peaks in the melting curve are located to the right of the main peak. a. It is possible that the non-specific amplification occurred due to poor specificity of the primers. The primers need to be redesigned. b. It is possible that the template DNA was contaminated with genomic DNA. It is recommended to use an RNA extraction kit that removes the genomic DNA for RNA extraction, or to add a step of removing the genomic DNA during reverse transcription to reprepare the cDNA template.

Citations

Documents

Applications

คุณอาจชอบ

การสอบถาม

คำถามที่พบบ่อย

ผลิตภัณฑ์นี้มีวัตถุประสงค์เพื่อการวิจัยเท่านั้น และไม่ได้มีวัตถุประสงค์เพื่อใช้ในการรักษาหรือวินิจฉัยโรคในมนุษย์หรือสัตว์ ผลิตภัณฑ์และเนื้อหาได้รับการคุ้มครองโดยสิทธิบัตร เครื่องหมายการค้า และลิขสิทธิ์ที่เป็นของ Yeasen เทคโนโลยีชีวภาพ สัญลักษณ์เครื่องหมายการค้าระบุประเทศต้นกำเนิด ไม่จำเป็นต้องจดทะเบียนในทุกภูมิภาค

แอปพลิเคชั่นบางตัวอาจต้องใช้สิทธิ์ในทรัพย์สินทางปัญญาของบุคคลที่สามเพิ่มเติม

Yeasen มุ่งมั่นเพื่อวิทยาศาสตร์ที่มีจริยธรรม โดยเชื่อว่าการวิจัยของเราควรจะตอบคำถามสำคัญในขณะเดียวกันก็ต้องรับประกันความปลอดภัยและมาตรฐานทางจริยธรรม