Hifair™ AdvanceFast One-step RT-gDNA Digestion SuperMix สำหรับ qPCR แสดงถึงการทำซ้ำที่ปรับปรุงของ Hifair™ Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix สำหรับ qPCR (gDNA Digester Plus) ออกแบบมาเพื่อตอบสนองความต้องการในการทำปฏิกิริยาการถอดรหัสย้อนกลับและการกำจัดจีโนมภายในหลอดเดียว นอกจากนี้ ยังทำให้กระบวนการปฏิกิริยามีประสิทธิภาพ ลดเวลาในการทำปฏิกิริยาลงอย่างมาก และเพิ่มผลผลิตของผลิตภัณฑ์การถอดรหัสย้อนกลับ 4×Hifair® AdvanceFast One-Step RT SuperMix ประกอบด้วยรีเอเจนต์ที่จำเป็นสำหรับปฏิกิริยาการถอดรหัสย้อนกลับ ในระหว่างปฏิกิริยา คุณเพียงแค่ต้องเสริมด้วย gDNA Remover Mix, เทมเพลต RNA และน้ำ เพื่อสังเคราะห์สายเริ่มต้นของ cDNA อย่างมีประสิทธิภาพพร้อมๆ กับกำจัดการปนเปื้อนของ DNA ในจีโนมไปพร้อมกัน ผลิตภัณฑ์นี้เหมาะอย่างยิ่งสำหรับการถอดรหัสย้อนกลับของเทมเพลต RNA ที่ซับซ้อน และพิสูจน์แล้วว่ามีประสิทธิภาพสูงสำหรับการถอดรหัสย้อนกลับที่เกี่ยวข้องกับปริมาณเทมเพลตที่น้อยและยีนที่มีสำเนาน้อย
ผลิตภัณฑ์การถอดรหัสย้อนกลับที่สร้างโดยผลิตภัณฑ์เฉพาะนี้เข้ากันได้ดีกับวิธี qPCR ทั้งแบบใช้โพรบและแบบใช้สีย้อม สำหรับ qPCR แบบใช้โพรบ เราขอแนะนำให้ใช้มาสเตอร์มิกซ์ qPCR แบบมัลติเพล็กซ์ Hieff Unicon® Universal TaqMan (Cat#11211) ในขณะที่สำหรับ qPCR แบบใช้สีย้อม Hieff UNICON® Universal Blue qPCR SYBR Green Master Mix (Cat#11184) เป็นตัวเลือกที่แนะนำสำหรับการวิเคราะห์การแสดงออกของยีนประสิทธิภาพสูง
อย่างไรก็ตาม สิ่งสำคัญคือต้องทราบว่าผลิตภัณฑ์การถอดรหัสย้อนกลับที่ผลิตโดยผลิตภัณฑ์นี้ไม่เหมาะสำหรับการใช้งานในภายหลัง เช่น การขยายชิ้นส่วนยาว หากคุณต้องการการถอดรหัสย้อนกลับที่มีประสิทธิภาพสำหรับวัตถุประสงค์เหล่านี้ เราขอแนะนำให้ใช้ชุดสังเคราะห์ cDNA Hifair® AdvanceFast 1st Strand (Cat#11149, Cat#11150)
คุณสมบัติ
- 5 นาทีของ RT
-
การย่อย RT และ gDNA แบบบูรณาการในหลอดเดียว
แอปพลิเคชั่น
- RT-qPCR
- การสังเคราะห์ RNA แอนติเซนส์
ข้อมูลจำเพาะ
| ประเภทของผลิตภัณฑ์ขั้นสุดท้าย | cDNA (สายแรก) |
| วิธี PCR | การตรวจด้วยวิธีอาร์ที-พีซีอาร์ |
| ชนิดของสารเคมี | การถอดเสียงย้อนกลับ |
| ประเภทของตัวอย่าง | อาร์เอ็นเอ |
| อุณหภูมิปฏิกิริยาที่เหมาะสม | 37℃ |
| ทรานสคริปเทสย้อนกลับ | เอ็ม-เอ็มแอลวี |
ส่วนประกอบ
| เลขที่ | ชื่อ | 11151ES10 (10ต) | 11151ES60 (100ตัน) |
| 11151-ก | 4×ไฮแฟร์ AdvanceFast วันสเต็ป RT ซุปเปอร์มิกซ์ | 50 ไมโครลิตร | 500 ไมโครลิตร |
| 11151-ข | น้ำยาขจัดคราบ DNA | 10 ไมโครลิตร | 100 ไมโครลิตร |
| 11151-ค | น้ำปราศจาก RNase | 1 มล. | 2×1 มล. |
การขนส่งและการเก็บรักษา
ผลิตภัณฑ์จัดส่งพร้อมน้ำแข็งแห้งและสามารถจัดเก็บที่อุณหภูมิ -15℃ ~ -25℃ ได้นานถึง 12 เดือน
คำแนะนำการใช้งาน
ละลาย ส่วนประกอบ 11151-A/B/C บนน้ำแข็ง เขย่าเบาๆ และผสมส่วนประกอบรีเอเจนต์แต่ละส่วนให้เข้ากัน จากนั้นประกอบส่วนประกอบต่อไปนี้ ส่วนประกอบ ภายในหลอดที่ปราศจาก RNase:
| ส่วนประกอบ | ปริมาตร (μL) |
| ปราศจาก RNase น้ำ | ถึง 20 μL |
| 4×ไฮแฟร์ AdvanceFast วันสเต็ป RT ซุปเปอร์มิกซ์ | 5 ไมโครลิตร |
| น้ำยาขจัดคราบ DNA | 1 ไมโครลิตร |
| อาร์เอ็นเอทั้งหมด | 10 หน้า -5 ไมโครกรัม* |
| หรือ mRNA | 10 pg-500 ng* |
ตารางที่ 1: การเตรียมปฏิกิริยา
*เราขอแนะนำให้ใช้ปริมาณ RNA ไม่เกิน 2 μg ในกรณีที่มีการแสดงออกของยีนเป้าหมายในปริมาณต่ำ อาจเพิ่มปริมาณ RNA สูงสุดได้ไม่เกิน 5 μg
| อุณหภูมิ | เวลา |
| 37℃ | 5 นาที* |
| 85℃ | 30 วินาที |
ตารางที่ 2: โปรโตคอลการตอบสนอง
*กระบวนการนี้ครอบคลุมทั้งการถอดรหัสย้อนกลับและการย่อย gDNA
ผลิตภัณฑ์การถอดรหัสย้อนกลับเหมาะสำหรับการใช้งานทันทีในปฏิกิริยา qPCR หรือสามารถเก็บไว้ที่อุณหภูมิ -20°C เป็นระยะเวลาสั้นๆ สำหรับการจัดเก็บแบบขยายเวลา เราขอแนะนำให้แบ่งส่วนและจัดเก็บที่อุณหภูมิ -80°C เพื่อป้องกันการแช่แข็งและละลายซ้ำหลายครั้ง
ข้อควรระวัง:
1. ขั้นตอนทั้งหมดควรดำเนินการบนน้ำแข็ง โดยระมัดระวังสูงสุดเพื่อป้องกันการปนเปื้อนของ RNase
2. รับประกันความปลอดภัยและความเป็นอยู่ที่ดีของคุณด้วยการสวมเสื้อคลุมห้องปฏิบัติการและถุงมือแบบใช้แล้วทิ้ง
3. ผลิตภัณฑ์นี้มีวัตถุประสงค์เพื่อการวิจัยทางวิทยาศาสตร์เท่านั้น และไม่ควรนำไปใช้ในทางอื่น
Storage
FAQ
Yes. Scale up the reaction system proportionally according to the manual, and make sure to adjust the reaction volume settings on your PCR instrument accordingly.
Citations
Applications
คุณอาจชอบ
การสอบถาม
คำถามที่พบบ่อย
ผลิตภัณฑ์นี้มีวัตถุประสงค์เพื่อการวิจัยเท่านั้น และไม่ได้มีวัตถุประสงค์เพื่อใช้ในการรักษาหรือวินิจฉัยโรคในมนุษย์หรือสัตว์ ผลิตภัณฑ์และเนื้อหาได้รับการคุ้มครองโดยสิทธิบัตร เครื่องหมายการค้า และลิขสิทธิ์ที่เป็นของ
แอปพลิเคชั่นบางตัวอาจต้องใช้สิทธิ์ในทรัพย์สินทางปัญญาของบุคคลที่สามเพิ่มเติม