รูปที่ 3 การผูกชิ้นส่วนที่ยาวมาก ผลการทดลองแสดงให้เห็นว่าจำนวนโคโลนีใน 10923ES สูง โดยมีอัตราการเกิดบวก 100%A: แผ่นแปลงรีคอมบิแนนท์ อัตราส่วนโมลาร์ของเวกเตอร์ (21 kb) ต่อชิ้นส่วนแทรก (4.5 kb) คือ 1:2B: การวิเคราะห์ด้วยอิเล็กโทรโฟรีซิสเพื่อระบุชนิด PCR ของชิ้นส่วนแทรก M:
Hieff Clone™ Universal II One Step Cloning Kit คือชุดโคลนนิ่งที่ได้รับการอัพเกรดใหม่ 2× Hieff Clone™ รุ่นที่ 2 ที่ผ่านการปรับแต่งอย่างพิถีพิถัน Universal II Enzyme Premix ผสมผสานเอนไซม์รีคอมบิแนนท์และบัฟเฟอร์ที่จำเป็นสำหรับปฏิกิริยารีคอมบิแนนท์ พร้อมด้วยสารเพิ่มประสิทธิภาพรีคอมบิแนนท์เฉพาะตัว เพื่อปรับปรุงประสิทธิภาพของการโคลนรีคอมบิแนนท์ให้ดีขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ ชุดอุปกรณ์นี้สามารถนำไปใช้โคลนผลิตภัณฑ์ PCR ไปยังไซต์ใดก็ได้ของเวกเตอร์ใดๆ เข้ากันได้กับผลิตภัณฑ์ PCR ที่ไม่บริสุทธิ์ ผลิตภัณฑ์ PCR ที่กู้คืนโดยตรง ผลิตภัณฑ์ที่กู้คืนจากยางที่มีความเข้มข้นต่ำ ผลิตภัณฑ์นี้สามารถประกอบเนื้อหา GC ของแขนโฮโมโลคัสที่มีชิ้นส่วนข้อต่อ 30%-70% ขึ้นมาใหม่ได้ เวกเตอร์ได้รับการทำให้เป็นเส้นตรงอย่างสมบูรณ์ และลำดับโฮโมโลคัสของปลายเวกเตอร์เชิงเส้นขนาด 15-25 bp ถูกนำเข้าสู่ปลาย 5' ของไพรเมอร์ PCR เชิงบวกและย้อนกลับของชิ้นส่วนที่แทรกเข้าไป ดังนั้นปลาย 5' และ 3' ของผลิตภัณฑ์ PCR ของชิ้นส่วนที่แทรกเข้าไปจึงมีลำดับเดียวกันอย่างแน่นอน ซึ่งสอดคล้องกับปลายทั้งสองของเวกเตอร์เชิงเส้นตามลำดับ ภายใต้การกระทำของเอนไซม์รีคอมบิแนนท์ ปฏิกิริยารีคอมบิแนนท์ของผลิตภัณฑ์ PCR และเวกเตอร์เชิงเส้นสามารถเสร็จสิ้นได้ในเวลาเพียง 5 นาทีที่ 50℃ อัตราการโคลนเชิงบวกสามารถไปถึงมากกว่า 95% คุณสมบัติ ง่ายๆ: โคลนชิ้นส่วน DNA สูงสุด 6 ชิ้นในปฏิกิริยาเดียว ความยืดหยุ่น: แนวทางการออกแบบช่วยให้สามารถประกอบเป็นเวกเตอร์ใดๆ ก็ได้ตามต้องการ มีประสิทธิภาพ: มีประสิทธิภาพในการผูกชิ้นส่วนตั้งแต่หนึ่งถึงเจ็ดชิ้น แอปพลิเคชั่น รวดเร็ว การโคลนนิ่ง: ช่วยให้สามารถเชื่อมโยงชิ้นส่วน DNA ที่ทับซ้อนกันหลายชิ้นได้อย่างราบรื่นในปฏิกิริยาไอโซเทอร์มอลขั้นตอนเดียวที่ใช้เวลา 5–50 นาที การโคลนแบบกำหนดทิศทาง; การกลายพันธุ์ตามจุดที่กำหนด ข้อมูลจำเพาะ การผูกมัด มากถึง 7 ชิ้น...
Hieff Clone™ Universal II One Step Cloning Kit คือชุดโคลนนิ่งที่ได้รับการอัพเกรดใหม่
2× Hieff Clone™ รุ่นที่ 2 ที่ผ่านการปรับแต่งอย่างพิถีพิถัน Universal II Enzyme Premix ผสมผสานเอนไซม์รีคอมบิแนนท์และบัฟเฟอร์ที่จำเป็นสำหรับปฏิกิริยารีคอมบิแนนท์ พร้อมด้วยสารเพิ่มประสิทธิภาพรีคอมบิแนนท์เฉพาะตัว เพื่อปรับปรุงประสิทธิภาพของการโคลนรีคอมบิแนนท์ให้ดีขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ
ชุดอุปกรณ์นี้สามารถนำไปใช้โคลนผลิตภัณฑ์ PCR ไปยังไซต์ใดก็ได้ของเวกเตอร์ใดๆ เข้ากันได้กับผลิตภัณฑ์ PCR ที่ไม่บริสุทธิ์ ผลิตภัณฑ์ PCR ที่กู้คืนโดยตรง ผลิตภัณฑ์ที่กู้คืนจากยางที่มีความเข้มข้นต่ำ ผลิตภัณฑ์นี้สามารถประกอบเนื้อหา GC ของแขนโฮโมโลคัสที่มีชิ้นส่วนข้อต่อ 30%-70% ขึ้นมาใหม่ได้ เวกเตอร์ได้รับการทำให้เป็นเส้นตรงอย่างสมบูรณ์ และลำดับโฮโมโลคัสของปลายเวกเตอร์เชิงเส้นขนาด 15-25 bp ถูกนำเข้าสู่ปลาย 5' ของไพรเมอร์ PCR เชิงบวกและย้อนกลับของชิ้นส่วนที่แทรกเข้าไป ดังนั้นปลาย 5' และ 3' ของผลิตภัณฑ์ PCR ของชิ้นส่วนที่แทรกเข้าไปจึงมีลำดับเดียวกันอย่างแน่นอน ซึ่งสอดคล้องกับปลายทั้งสองของเวกเตอร์เชิงเส้นตามลำดับ ภายใต้การกระทำของเอนไซม์รีคอมบิแนนท์ ปฏิกิริยารีคอมบิแนนท์ของผลิตภัณฑ์ PCR และเวกเตอร์เชิงเส้นสามารถเสร็จสิ้นได้ในเวลาเพียง 5 นาทีที่ 50℃ อัตราการโคลนเชิงบวกสามารถไปถึงมากกว่า 95%
คุณสมบัติ
ง่ายๆ: โคลนชิ้นส่วน DNA สูงสุด 6 ชิ้นในปฏิกิริยาเดียว
ความยืดหยุ่น: แนวทางการออกแบบช่วยให้สามารถประกอบเป็นเวกเตอร์ใดๆ ก็ได้ตามต้องการ
มีประสิทธิภาพ: มีประสิทธิภาพในการผูกชิ้นส่วนตั้งแต่หนึ่งถึงเจ็ดชิ้น
แอปพลิเคชั่น
รวดเร็ว การโคลนนิ่ง: ช่วยให้สามารถเชื่อมโยงชิ้นส่วน DNA ที่ทับซ้อนกันหลายชิ้นได้อย่างราบรื่นในปฏิกิริยาไอโซเทอร์มอลขั้นตอนเดียวที่ใช้เวลา 5–50 นาที
การโคลนแบบกำหนดทิศทาง; การกลายพันธุ์ตามจุดที่กำหนด
ข้อมูลจำเพาะ
| การผูกมัด | มากถึง 7 ชิ้น |
| ประเภทสินค้า | การประกอบดีเอ็นเอ |
ส่วนประกอบ
| ส่วนประกอบ หมายเลข | ชื่อ | 10923ES05-5 ต- | 10923ES20-20 ต.- | 10923ES50-50 ตัน- |
| 10923-ก | 2 โคลนไฮฟ์ทีเอ็ม พรีมิกซ์เอนไซม์ยูนิเวอร์แซล II | 50 ไมโครลิตร | 200 ไมโครลิตร | 500 ไมโครลิตร |
| 10923-บี | ตัวควบคุม 500 bp (25 นาโนกรัม/ไมโครลิตร- | 5 ไมโครลิตร | 5 ไมโครลิตร | 5 ไมโครลิตร |
| 10923-ซี | เวกเตอร์ควบคุม pUC 19 แบบเส้นตรง (50 ng/ไมโครลิตร- | 5 ไมโครลิตร | 5 ไมโครลิตร | 5 ไมโครลิตร |
พื้นที่จัดเก็บ
ควรเก็บผลิตภัณฑ์นี้ไว้ที่ -25~-15℃ เป็นเวลา 1 ปี.
ตัวเลข
เอฟรูปภาพ 1. เชื่อมต่อชิ้นส่วนเดี่ยวอินพุตต่ำ 10 นาโนกรัมในสถานะรับที่ไม่ฟื้นคืนชีพของระบบขนาดเล็ก 6μL ผลการทดลองแสดงให้เห็นว่า 10923ES มีประสิทธิภาพดีกว่าผลิตภัณฑ์คู่แข่ง โดยมีประสิทธิภาพการเชื่อมต่อสูง มีโคโลนีมากกว่า และอัตราการเกิดผลบวก 100% AB: แผ่นโคลน อัตราส่วนโมลาร์ของตัวพา (10 kb) ต่อชิ้นส่วนแทรก (1 kb) คือ 1:2 C: แผนที่อิเล็กโทรโฟรีซิสที่ระบุโดย PCR ชิ้นส่วนแทรก M:
รูปที่ 2 ชิ้นส่วนจำนวน 6 ชิ้น (ความยาวรวม 7.6 กิโลเบส) ถูกโคลนลงในพลาสมิดขนาด 11.6 กิโลเบส ผลการทดลองแสดงให้เห็นว่า 10923ES มีประสิทธิภาพดีกว่าผลิตภัณฑ์คู่แข่ง โดยมีโคโลนีมากกว่าและอัตราการเกิดผลบวก 100% AB: แผ่นโคโลนี อัตราส่วนโมลาร์ของตัวพา (11.6 kb) ต่อชิ้นส่วนที่แทรกเข้าไปคือ 1:2 C: การวิเคราะห์อิเล็กโทรโฟรีซิสของชิ้นส่วนที่แทรกเข้าไป M:
การอ้างอิงและเอกสารอ้างอิงที่เกี่ยวข้อง:
[1] Zhang H, Shao S, Zeng Y และคณะ การแยกเฟสแบบกลับได้ของ HSF1 จำเป็นต่อการตอบสนองการถอดรหัสแบบเฉียบพลันระหว่างภาวะช็อกจากความร้อน แนทเซลล์ไบโอล. 2022;24(3):340-352. (ไอเอฟ:28.824)
[2] Xu Y, Yu Q, Wang P และคณะ ตัวย่อยสลาย c-Myc โมเลกุลเล็กแบบเลือกสรรอย่างมีประสิทธิภาพในการยับยั้งการแสดงออกของเนื้องอกที่มากเกินไปของ c-Myc ที่ร้ายแรง วิทยาศาสตร์ขั้นสูง (เหวนห์). 2022;9(8):e2104344. (ไอเอฟ:16.806)
[3] Guan B, Jiang YT, Lin DL, Lin WH, Xue HW กรดฟอสฟาติดิกยับยั้งออโตฟาจีผ่านการยับยั้งแบบแข่งขันโดยการจับกับโปรตีน GAPC (glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase) และ PGK (phosphoglycerate kinase) [เผยแพร่ทางออนไลน์ก่อนพิมพ์ 15 มีนาคม 2022] ออโตฟาจี. 2022;1-15. (ถ้า:16.016)
[4] He X, Li Y, Chen Q และคณะ การกระตุ้น O-GlcNAcylation และการทำให้ SIRT7 เสถียรขึ้นจะส่งเสริมความก้าวหน้าของมะเร็งตับอ่อนโดยการบล็อกปฏิกิริยาระหว่าง SIRT7-REGγ [เผยแพร่ทางออนไลน์ก่อนพิมพ์ 14 เมษายน 2022] การตายของเซลล์แตกต่างกัน. 2022;10.1038/s41418-022-00984-3.(ไอเอฟ:15.828)
[5] Zhou T, Zhu X, Ye Z และคณะ Lupus enhancer risk variant ทำให้เกิดการทำงานผิดปกติของ IRF8 ผ่านการทำงานร่วมกันของ lncRNA และกลไกการเมทิลเลชันของ DNA นัท คอมมูน 2022;13(1):1855. เผยแพร่เมื่อวันที่ 6 เมษายน 2022 (ไอเอฟ:14.919)
[6] Li T, Chen X, Qian Y และคณะ อุปกรณ์ออปโตเจเนติกส์แบบสังเคราะห์ที่ใช้ BRET สำหรับการแสดงออกของทรานส์ยีนแบบเป็นจังหวะซึ่งช่วยให้รักษาสมดุลของกลูโคสในหนูได้ นัท คอมมูน 2021;12(1):615. เผยแพร่เมื่อวันที่ 27 มกราคม 2021 (ไอเอฟ:14.919)
[7] Wu P, Zhang T, Liu B และคณะ การควบคุมเชิงกลของโครงสร้างเปปไทด์-MHC คลาส I กำหนดการรับรู้แอนติเจน TCR เซลล์โมล 2019;73(5):1015-1027.e7. (รหัส:14.548)
[8] Xiong L, Liu S, Chen S และคณะ ระบบต่อต้านไวรัสประเภทใหม่ที่ใช้ฟอสโฟโรไธโอเอชันของดีเอ็นเอในอาร์เคีย นัท คอมมูน 2019;10(1):1688. เผยแพร่เมื่อวันที่ 11 เมษายน 2019 (ไอเอฟ:11.878)
-9] Jiang L, Wang Y, Xia A และคณะ ตัวแปรโพลีมอร์ฟิซึมนิวคลีโอไทด์เดี่ยวตามธรรมชาติในซัลไฟต์รีดักเตสมีอิทธิพลต่อการดูดซึมกำมะถันในข้าวโพด นิวไฟทอล 2564;232(2):692-704. (ไอเอฟ:10.152)
Storage
FAQ
The maximum size of the assembled fragments for 10922 can reach up to 23k, and for 10923 it can reach up to 25k. Additionally, 10923 can be used in small-scale experiments with a minimum volume of 6μL.
Using universal M13 primers as the template, a band of over 500 base pairs was amplified.
Both ampicillin and carbenicillin are fine. I recommend carbenicillin because ampicillin loses its effectiveness relatively quickly.
No. The upgraded version of 10923ES has improved the cloning success rate. Although there were instances of freezing, after multiple verification tests, it was confirmed that freezing and thawing do not affect the product performance. Please refer to the verification results below.
Citations
Documents
| Manual |
|---|
| 10923ES-Manual-Ver.EN20250805.pdf |
| MSDS |
|---|
| 10923-MSDS-HB250805.pdf |
| Brochure |
|---|
| Hieff_Clone_Universal_II_One_Step_Cloning_Kit.pdf |
คุณอาจชอบ
การสอบถาม
คำถามที่พบบ่อย
ผลิตภัณฑ์นี้มีวัตถุประสงค์เพื่อการวิจัยเท่านั้น และไม่ได้มีวัตถุประสงค์เพื่อใช้ในการรักษาหรือวินิจฉัยโรคในมนุษย์หรือสัตว์ ผลิตภัณฑ์และเนื้อหาได้รับการคุ้มครองโดยสิทธิบัตร เครื่องหมายการค้า และลิขสิทธิ์ที่เป็นของ
แอปพลิเคชั่นบางตัวอาจต้องใช้สิทธิ์ในทรัพย์สินทางปัญญาของบุคคลที่สามเพิ่มเติม