As células HEK293 derivadas de células renais embrionárias humanas são amplamente utilizadas para produzir várias proteínas terapêuticas, partículas semelhantes a vírus (VLP) em vacinas, vetores virais em terapia celular e genética ou para pesquisas científicas relacionadas. Durante a produção e purificação desses produtos, impurezas da proteína da célula hospedeira (HCP) serão inevitavelmente introduzidas. Essas impurezas podem reduzir a eficácia do produto e causar toxicidade adversa ou reações imunológicas. Portanto, é necessário reduzir as impurezas de HCP ao menor nível prático.
Este kit usa o princípio experimental do imunoensaio enzimático (ELISA) de sanduíche de anticorpo duplo para detectar resíduos de HCP HEK293. O método ELISA é simples, altamente sensível e objetivo. Para detectar resíduos de HCP HEK293, adicione o padrão HEK293 HCP (36713-B) e a amostra a ser testada à placa ELISA pré-revestida com anticorpo anti-HEK293 HCP (36713-A). Em seguida, adicione o anticorpo de detecção HEK293 HCP marcado com biotina diluído (36713-C) e, finalmente, adicione Streptavidin-HRP (SA-HRP) (36713-D) para formar o complexo anticorpo+antígeno+anticorpo-Biotina+SA-HRP. Após lavar a placa, adicione a solução cromogênica TMB (36713-H) para desenvolver a cor. O TMB é transformado de incolor para azul sob a catálise da enzima HRP e finalmente transformado em amarelo sob a ação da solução de parada (36713-I). A tonalidade de amarelo é positivamente correlacionada com a quantidade de HEK293 HCP detectada na amostra. Este kit pode ser usado para otimizar o processo de purificação de produtos biológicos, controlar impurezas no processo intermediário e detectar a liberação de produtos finais
Componentes
| Não. | Nome | 36713ES96 |
| 36713-A | Tiras de microtitulação revestidas com anti-HEK293 | 96 T |
| 36713-B | Padrão: HEK293 HCP (10 μg/ml) | 100 μL |
| 36713-C | Detecção Anticorpo: conjugado com biotina Anticorpos（50×) | 300 μL |
| 36713-D | Estreptavidina-HRP (100×) | 300 μL |
| 36713-E | Tampão de diluição 1 | 50 mL |
| 36713-F | Concentrado de tampão de lavagem (20×) | 50 mL |
| 36713-G | Tampão de diluição 2 | 30 mL |
| 36713-H | Substrato TMB | 12 mL |
| 36713-I | Parar solução | 10 mL |
| 36713-J | Selador de placas | 5 cada |
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