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A protease TEV recombinante (rTEV Protease) é uma protease recombinante modificada e purificada por engenharia genética, que não só mantém a atividade funcional da TEV Protease natural, mas também mostra maior estabilidade e especificidade em uma ampla faixa de temperatura. A rTEV Protease é uma enzima comumente usada para cortar rótulos de afinidade em proteínas de fusão. Ela é específica para a sequência de sete aminoácidos EXXYXQ↓(G/S), e o sítio de corte é entre glutamina e glicina/serina. A sequência de sete aminoácidos comumente usada é Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln↓-Gly. A protease rTEV é otimamente ativa em pH 7,0, 30°C, mas é ativo em uma ampla faixa de pH 6,0-8,5 e temperaturas de 4-30°C (ver Tabela 1), permitindo que a escolha das condições de reação seja flexível dependendo da proteína alvo. Além disso, o 6×Seu rótulo de N-terminal também pode ser usado para remover a protease rTEV pela resina Ni-NTA para purificar a proteína alvo.
O produto foi otimizado com base no 20403ES e, em comparação com o 20403ES, possui maior pureza, atividade mais forte e menor E. coli Resíduo de gDNA, adequado para aplicações com maiores requisitos de pureza, atividade e resíduo enzimático.
Características
Alta eficiência de clivagem:A etiqueta de proteína é removida mais completamente.
Baixo gDNA residual do hospedeiro: Reduz efetivamente o risco de introdução de resíduos de substâncias exógenas.
Aplicações
Remoção de tags de fusão
Especificações
| Definição de unidade | A quantidade de enzima necessária para cortar >85% dos 3 µg substrato em um 1×Tampão rTEV (50 mM Tris, pH 8,0, 0,1 mM EDTA, 1 mM DTT) a 30oC por 1 h foi definido como uma unidade de atividade |
| Pureza da proteína | ≥95% |
| Fonte | Expresso em E. coli |
Componentes
| Componentes No. | Nome | 20427ES80 | 20427ES10 | 20427ES50 |
| 20427-UM | Protease rTEV (5 U/μL) | 200 μL | 2×1 mL | 10 mL |
| 20427-B | Buffer rTEV (10×) | 600 μL | 6 mL | 30 mL |
Envio e armazenamento
Protease rTEV, armazenada a -25~-15oC por 6 meses; Armazenar em -85~-65oC por 1 ano.
Buffer rTEV, armazenado em -25~-15oC por 1 ano.
Observação: é recomendável armazenar cada componente separadamente ao receber a mercadoria ou usá-la pela primeira vez para evitar congelamento e descongelamento repetidos.
Figuras
Figura 1. Verificação da atividade de clivagem de UCF.METM Protease rTEV
Nota: Usando uma proteína de fusão (3 μg) ccontendo o UCF.METM Sítio de clivagem da protease rTEV como substrato, UCF.METM A protease rTEV foi adicionada em 10, 5 e 3 U, respectivamente. A reação foi realizada em 30 oC por 1 hora, e o efeito de clivagem foi detectado por eletroforese em gel de agarose. Os resultados mostraram que quando a quantidade de UCF.METM A protease rTEV era maior que 3 U, podendo clivar o substrato de forma eficiente com uma eficiência de clivagem de >90%.
Documentos:
Ficha de dados de segurança
20427_FISPQ_Ver.EN20250120.pdf
Manuais
Storage
FAQ
Citations
Applications
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Investigação
Perguntas frequentes
O produto é apenas para fins de pesquisa e não se destina ao uso terapêutico ou diagnóstico em humanos ou animais. Os produtos e o conteúdo são protegidos por patentes, marcas registradas e direitos autorais de propriedade da
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