PNGase F é uma enzima amidase que é clonada de Estação da Paz Eliza e secretado principalmente por Neisseria meningitidis e outras bactérias Gram-negativas. A PNGase F da levedura é expressa de forma recombinante em leveduras (atividade específica: 100.000 U/mL), que pode clivar glicoproteínas oligossacarídicas complexas, híbridas e de alta manose ligadas pela asparagina. O sítio de clivagem da PNGase F é a ligação amida entre a N-acetilglucosamina interna (GlcNAc) e o resíduo de asparagina das glicoproteínas, enquanto converte a asparagina na proteína após hidrólise enzimática em ácido aspártico. Este produto é marcado com His e é comumente usado para desglicosilação completa de anticorpos e proteínas relacionadas.
Recurso
Alta pureza - Sem contaminação por protease ou glicosidase, pureza ≥95%.
Alta atividade— 100.000 U/mL.
Boa compatibilidade—Pode ser usado desnaturante ou condições sem desnaturação.
Aplicativo
Sequenciamento de glicanos
Proteômica
Análise de glicoproteína
.Expressão de glicoproteína recombinante
Especificação
| sinônimo em inglês | PNGase F; N-glicosidase F; N-glicosidase F |
| Fonte | Expressão recombinante de levedura |
| Peso molecular | 36 kDa |
| Atividade Específica | 100.000 U/mL |
| Buffer de armazenamento | 20 mM Tris-HCl pH 7,5, 50 mM NaCl, 5 mM EDTA, 50% Glicerol |
| Definição de unidade | 1 unidade de atividade enzimática refere-se à quantidade de enzima necessária para remover mais de 95% dos carboidratos de 10 μg de RNase B desnaturada em um sistema de reação de 10 μL a 37 °C em 1 hora. |
Componentes
| Componentes No. | Nome | Composição dos componentes | 20407ES01 | 20407ES02 |
| 20407-A | PNGase F | PNGase F | 15000 U | 75000 U |
| 20407-B1 | Tampão 1 (10×) | 5% SDS; 400 mM DTT | 150 μL | 750 μL |
| 20407-B2 | Tampão 2 (10×) | 200 mM Tris, pH 7.5 | 300 μL | 1500 μL |
| 20407-B3 | 10% NP-40 | 10% NP-40 em MilliQ-H2O | 300 μL | 1500 μL |
Armazenar
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