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UltraNuclease é um endonuclease geneticamente modificada de Serratia marcescens. A enzima digere todas as formas de moléculas de DNA/RNA em oligonucleotídeos de cerca de 5 pb. O produto é expresso em Escherichia coli (E. coli) e purificado sob os ambientes GMP. A nuclease é equivalente à benzonase em reduzindo resíduos de ácido nucleico do hospedeiro para grau pg, melhorando o desempenho e a segurança de produtos biológicos de aplicações incluindo purificação de vírus, fabricação de vacinas e fabricação farmacêutica de proteínas/polissacarídeos. Ele também pode ser usado em estudos de proteínas para reduzir a viscosidade do sobrenadante celular e do lisado celular, aumentar a eficiência da purificação de proteínas e aprimorar a pesquisa funcional de proteínas.
UltraNuclease é fornecido na forma de um reagente esterilizado, eluído em tampão (20 mM Tris-HCl pH 8,0, 2 mM MgCl2, 20 mM NaCl, 50% glicerina), com a aparência de um líquido incolor e transparente. Este produto é produzido por requisitos de processo GMP e fornecido em forma líquida.
Características
- Ampla gama de aplicações: degrada todas as formas de DNA e RNA
- Alta pureza e atividade: pureza ≥ 99%; atividade específica ≥ 1,5×106 U/mg
- Forte adaptabilidade: forte tolerância, adaptação a uma variedade de condições de reação
- Cumpre a farmacopeia: sem origem animal; sem antibióticos; menor endotoxina
- Qualificação: o produto recebe o preenchimento DMF da FDA, o que pode reduzir o tempo de espera dos clientes para a aplicação de novos medicamentos
- Fabricação de grau GMP: padrões rigorosos para atender às necessidades de uso em larga escala para pesquisa e fabricação
Aplicativo
- Purificação de vacinas virais, vetores virais para a vacina e vírus oncolíticos, removendo DNA/RNA de proteínas e outros produtos biológicos
- Redução da viscosidade causada por ácidos nucleicos
- Preparação de amostras em eletroforese e cromatografia
- Prevenção de aglomeração de células
Especificação
| Host de Expressão | E. coli recombinante com gene UltraNuclease |
| Peso molecular | 26,5 kDa |
| Ponto isoelétrico | 6,85 |
| Pureza | ≥ 99% (SDS-PAGE) |
| Buffer de armazenamento | 20 mM Tris-HCl pH 8,0, 2 mM MgCl2, 20 mM NaCl, 50% glicerina |
| Definição de unidade | A definição de uma unidade de atividade (U) é a quantidade de enzima usada para alterar o valor de absorção de △A260 em 1,0 em 30 minutos em um sistema de reação de 2,625 mL a 37 °C com um pH de 8,0 (equivalente à digestão completa de 37 μg de DNA de esperma de salmão em oligonucleotídeos). |
Componentes
| Componentes No. | Nome | 20157ES25 (25 KU) | 20157ES60 (100 KU) | 20157ES80 (1 UM) | 20157ES90 (5 UM) |
| 20157 | UltraNuclease grau GMP (250 U/μL) | 100 μL | 400 μL | 4 mL | 20 mL |
Envio e armazenamento
O produto é enviado com gelo seco e pode ser armazenado a -15℃ ~ -25℃ por dois anos. Se o produto for aberto e tiver sido armazenado a 4℃ por mais de uma semana, recomendamos filtrar o produto para evitar contaminação microbiana.
Figuras
- Qualidade
| Não. | Teste Unid | Concorrente | |
| 1 | Fonte | E. coli | E. coli |
| 2 | Atividade | ≥ 250 unidades/μL | 250-300 unidades/μL |
| 3 | Específico Atividade | ≥1,1×106 U/mg | ≥1,5×106 U/mg |
| 4 | Pureza | ≥ 99% (SDS) | ≥ 99% (HPLC) |
| 5 | Endotoxina | < 0,25 UE/1000 U | < 0,25 UE/1000 U |
| 6 | Protease | Nenhum Detectado | Nenhum Detectado |
- As condições de reação recomendam
Tabela 1. As condições de reação ideais para UCF.ME™ UltraNuclease
| Fator | Ótimo Doença | Eficaz doença |
| mg2+ | 1-5 mm | 0-10 mM |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| Temperatura | 37℃ | 0-42℃ |
| Na+/K+ | 0-20 mM | 0-150 mM |
| PO43+ | 0-10 mM | 0-100 mM |
| EDTA | 0-0,5 mM | 0-5 mM |
| Triton®X-100 | 0%-0,4% | 0%-1% |
Documentos:
Storage
FAQ
(1) Use nucleases.
(2) You can also use high-pressure homogenization. Both can achieve the effect of reducing viscosity. The difference lies in: When using nucleases, DNA and RNA can be broken down into small fragments or single nucleotides; with high-pressure homogenization, the DNA and RNA are processed into larger fragments through mechanical shearing force. Ultrasonic treatment is not a problem when dealing with small amounts of expression, but it is difficult when dealing with large amounts of protein expression. Another important application of nucleases is: If your target protein is a DNA-binding protein, it is best to treat it with nucleases before purification.
Citations
Documents
| Brochure |
|---|
| Advancing_UCF.ME_UltraNuclease.pdf |
Applications
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Investigação
Perguntas frequentes
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