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O Quick Fuse Amplifier Reagent é um reagente de biologia molecular projetado para a amplificação isotérmica rápida, eficiente e específica de fragmentos de ácido nucleico. Utilizando uma combinação de recombinase e polimerase, este reagente permite a rápida amplificação de ácidos nucleicos alvo sob uma faixa de temperatura constante de 39–42°C. É amplamente aplicado em pesquisa biológica, diagnósticos clínicos e testes moleculares. Este produto é adequado para empresas de diagnóstico molecular que desenvolvem kits rápidos e multiplex de detecção de DNA.
Componentes do produto
| Não. | Nome | 16702ES16 | 16702ES50 |
| 16702-A | Buffer de Amplificação de Fusível | 320 μL | 1 mL |
| 16702-B | Mistura de enzimas de amplificação de fusível 1 | 108 μL | 338 μL |
| 16702-C | Fuse Amplification Enzyme Mix 2(com exo III) | 48 μL | 150 μL |
| 16702-D | 200 milímetros MgAC2 | 45 μL | 140 μL |
*O Fuse Amplification Buffer é relativamente viscoso. Ao manusear, aspire lentamente para garantir uma medição precisa do volume. Ele não contém acetato de magnésio.
**O Fuse Amplification Enzyme Mix 2 (com exo III) já contém exo III.
Condições de armazenamento
Armazene de -25°C a -15°C. Prazo de validade: 1 ano. Aliquote o reagente com antecedência para evitar ciclos repetidos de congelamento-degelo.
Instruções de uso
1. Etapas da operação
(1) Preparação do sistema de reação: Adicione cada componente na ordem listada na tabela, de cima para baixo.
| Não. | Componentes | Volume(μL) |
|
| 100 μM cartilha F | 0.2 |
|
| 100 μM cartilha R | 0,2 |
|
| Sonda de 50 μM | 0,12 |
| 16702-B | Mistura de enzimas de amplificação de fusível 1 | 6,75 |
| 16702-C | Fuse Amplification Enzyme Mix 2 | 3 |
| 16702-A | Buffer de amplificação 2X | 20 |
|
| DEPC H2O | 1,93 |
|
| Total | 32.2 |
(2) Adicione 5 μL do modelo ao sistema acima.
(3) Agite bem no vórtex e misture os componentes da reação, depois adicione 2,8 μL de acetato de magnésio 200 mM (16702-D) ao sistema para iniciar a reação de amplificação. Conclua as etapas subsequentes o mais rápido possível em 5 minutos.
(4) Tampe o tubo de PCR, agite bem no vórtex para misturar e centrifugue brevemente. Realize a amplificação de acordo com o protocolo de amplificação de referência.
2. Protocolo de amplificação de referência
| Etapa | Temperatura. | Tempo | Ciclos |
| 1 | 39℃* | 1 minuto** | 30 |
| 2 | 95℃ | 2 minutos | 1 |
*A temperatura ideal de reação pode ser selecionada entre 39°C e 42°C, dependendo do sistema específico.
**Coleta do sinal de fluorescência: Escolha o canal apropriado com base no rótulo fluorescente da sonda projetada.
Precauções
1. Este produto é destinado apenas para uso em pesquisa.
2. Para sua segurança e saúde, use jaleco e luvas descartáveis durante o manuseio.
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Perguntas frequentes
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