Hifair™ Kit de sonda RT-qPCR multiplex de uma etapa (UDG Mais) é um kit multiplex de PCR quantitativo baseado em RNA como molde. No processo do experimento, a transcrição reversa e a PCR quantitativa foram realizadas no mesmo tubo, o que simplificou a operação experimental e reduziu o risco de contaminação.

Neste kit, a primeira fita de cDNA foi sintetizada eficientemente pelo Hifair resistente ao calor^TM V Transcriptase reversa e amplificada quantitativamente por UNICON™ HotStart Taq DNA Polymerase. O kit contém principalmente tampão MP otimizado, mistura de enzimas, etc. A solução tampão já contém Mg²⁺ e dNTP. Além disso, os fatores que podem efetivamente inibir a amplificação de PCR não específica e melhorar a eficiência de amplificação de múltiplas reações de qPCR são adicionados, o que pode garantir a eficiência de amplificação e realizar até múltiplas reações de amplificação. O sistema dUTP/UDG foi adicionado para efetivamente prevenir o risco de contaminação por aerossol.

Características

1. Ggrande versatilidade: É adequado para amplificação de qPCR e detecção de ácidos nucleicos de microrganismos patogênicos, genomas humanos, plantas e outras espécies.

2. Alta sensibilidade: O sistema de buffer cuidadosamente otimizado melhora a sensibilidade de detecção de modelos de baixa concentração de até 250 cópias/mL.

3. Sistema dUP/UDG: O sistema antipoluição dUTP/UDG termolábil é introduzido para degradar a poluição por aerossol de produtos de forma eficiente, reduzir falsos positivos e garantir resultados autênticos.

4. Apoiaring programa rápido: compatível com programa rápido de 40 min.

5. Super estabilidade: estávele a 37℃ por 14 dias, congelamento e descongelamento repetidos 10 vezes.

Componentes

Observação: 1) 5×Hifair^TM Tampão MP é a abreviação de Hifair^TM Tampão de sonda RT-qPCR multiplex de uma etapa V, que inclui dNTPs, dUTP, Mg²⁺, estabilizadores, intensificadores e muito mais.

2) Mistura de enzimas Hifair contém principalmente Hifair resistente ao calor^TM V transcriptase reversa, UNICON^TM Polímeros de DNA HotStart Taq e UDGase.

3) O GC enhancer é opcional. Por favor, encontre a versão gratuita do GC enhancer: Gato: 16901ES.

4) O 16630-A e 16630-B são equivalentes ao 16901-A e 16901-B, respectivamente.

Especificações

Armazenar

Eele produto deve ser armazenado no -25°C~-15°C para 1 ano.

Figuras

Figura 1. Alta taxa de detecção

Instruções

1. Reação Composição

Observação：Misture bem antes de usar, evite bolhas excessivas causadas por vibração violenta.

a) Concentração do primer: Cartilha mistura incluindo primer multiplex, dependendo da situação, a concentração ideal do primer pode estar entre 0,1 e 1,0 μM.

b) Concentração da sonda: mistura de sondas incluindo diferença de marcação de sonda multiplex grupo fluorescente, dependendo da situação a concentração ótima da sonda pode estar entre 0,05 e 0.5 μM.

c) Diluição do template: qPCR é altamente sensível e é recomendado diluir o template. O valor de Ct de controle é adequado entre 20 e 35.

e) Preparação do sistema: cabeça un com elemento filtrante. Evite contaminação cruzada e contaminação por aerossol.

2. Protocolo de Ciclismo Otimizado

Observação：a) Rtranscrição reversa: A temperatura pode selecionar 42°C ou 50°C por 10-15 minutos.

b) Reação de amplificação: A temperatura é ajustada de acordo com o valor de Tm dos primers projetados.

c) Aquisição de sinal de fluorescência: Defina o procedimento experimental de acordo com os requisitos do manual do instrumento.