RNA polimerase de RNA CLEASSCR ™ (dsRNA baixo, 250 U/μl) _ 10628es
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Esta é uma variante de RNA polimerase T7 projetada (baixo dsRNA) derivada da RNA polimerase T7 de tipo selvagem e produzida em Escherichia coli. Ela reduz significativamente a produção de RNA fita dupla (dsRNA) enquanto incorpora eficientemente análogos de cap, e exibindo transcrição in vitro (IVT) altamente eficiente comparável à RNA polimerase T7 do tipo selvagem. Ele catalisa a síntese 5'→3' de RNA em DNA fita dupla a partir de sua sequência promotora T7 (5'-TAATACGACTCACTATAG*-3') e usa NTPs como substratos. Nota: G* é a primeira base do transcrito de RNA. Recurso Nível...

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RNA polimerase de RNA CLEASSCR ™ (dsRNA baixo, 250 U/μl) _ 10628es

YeasenSku: 10628ES10
Tamanho: 10 Ku
Preço:
$180.00
Estoque:
Em estoque

Esta é uma variante de RNA polimerase T7 projetada (baixo dsRNA) derivada da RNA polimerase T7 de tipo selvagem e produzida em Escherichia coli. Ela reduz significativamente a produção de RNA fita dupla (dsRNA) enquanto incorpora eficientemente análogos de cap, e exibindo transcrição in vitro (IVT) altamente eficiente comparável à RNA polimerase T7 do tipo selvagem. Ele catalisa a síntese 5'→3' de RNA em DNA fita dupla a partir de sua sequência promotora T7 (5'-TAATACGACTCACTATAG*-3') e usa NTPs como substratos.

Nota: G* é a primeira base do transcrito de RNA.

Recurso

  • Nível de dsRNA reduzido para cerca de 1/100000
  • Compatível com Trilink CleanCap AG
  • Altos rendimentos comparáveis ​​ao WT
  • Entrada de Cap Inferior
  • Livre de origem animal (AOF)

Encontre informações sobre o desenvolvimento desta enzima.

Componentes

Componentes No.

Nome

10628ES10

10628ES60

10628ES72

10628ES86

(10 KU)

(100 KU)

(250 KU)

(2.500 KU)

10628

CleaScrip™ T7 RNA Polimerase (baixo dsRNA, 250 U/μL)

40 μL

400 μL

1 mL

10 mL

Especificações

Fonte

Recombinante E. coli com gene T7 RNA Polimerase

Temperatura Ótima

37℃

Buffer de armazenamento

50 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, 10 mM DTT, 100 mM NaCl, 0,1% Triton X-100, 50% (v/v) glicerina, pH 7,9 em 25℃

Definição de unidade

A quantidade de enzima necessária para incorporar 1 nmol de [3H] GMP no precipitado insolúvel em ácido dentro de 1 hora a 37°C e pH 8,0 é definido como 1 unidade.

Mg2+ recomendado

Acetato de magnésio 30 mM

Controle de qualidade Padrão

EUtemas

Especificação/Padrão

Enzima atividade

250-300U/μL

Pureza da Proteína

≥95%

Endotoxina

<20 UE/mg

Protease

Negativo

Exonuclease

Negativo

Nickase

Negativo

RNase

Negativo

Proteína hospedeira E. coli

<50 ppm

E.hospedeiro coli ADN

<10 fg/U

Exame de micoplasma

Negativo

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Figuras

Comentários dos clientes:
Figura 1. Teste de mutantes da RNA polimerase T7. Conteúdo de dsRNA: O conteúdo de dsRNA foi reduzido em mais de 10 vezes (A). Integridade do mRNA: Mantida em mais de 90% (B). Eficiência de encapsulamento de fragmentos 2K: Excedeu 99% (C, D).
Tabela 1. Os rendimentos da RNA polimerase T7 de baixo dsRNA são comparáveis ​​aos da WT.

Figura 2. Avaliação da imunogenicidade dos produtos IVT na AR murinaW264.7 células (Figuras 2A e 2B). Os níveis de mRNA e proteína do IFN-β foram reduzidos na ARW264.7 células transfectadas com mRNA produzido por mutantes em comparação com o tipo selvagem, indicando que o mRNA sintetizado pelo RNAP T7 do tipo selvagem provocou a resposta imune mais forte, enquanto o mRNA dos mutantes mostrou uma resposta significativamente reduzida.

Figura 3. O conteúdo de dsRNA no mRNA sintetizado com a RNA polimerase CleaScript™ T7 é menor do que no mRNA sintetizado com a enzima selvagem após o tratamento com celulose.

Envio e armazenamento

O Os produtos são enviados com gelo seco e podem ser armazenados a -15℃ ~ -25℃ por um ano.

Publicação:

A RNA polimerase T7 projetada reduz a formação de dsRNA ao diminuir as atividades da transferase terminal e da RNA polimerase dependente de RNA, The FEBS Journal 03 de março de 2025

FADS e design semi-racional modificado T7 RNA polimerase reduziram a produção de dsRNA, com menores atividades de transferase terminal e RDRP, bioxRxiv, 31 de maio de 2024


Documentos


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