O mRNA dos eucariotos forma uma estrutura especial na extremidade 5' após a transcrição, que é a estrutura cap. A estrutura cap desempenha um papel importante na estabilidade, transporte e tradução do mRNA. A enzima capping do vírus vaccinia é uma enzima eficaz que pode catalisar a formação da estrutura cap. É composta por duas subunidades D1 e D12. Também tem atividade de RNA trifosfatase, atividade de guanilato aciltransferase e atividade de guanina metiltransferase que podem conectar a estrutura cap 7-metilguanina (m7Gppp) à extremidade 5' do RNA (m7Gppp5'N). A enzima capping do vírus vaccinia pode capear o RNA na direção correta dentro de uma hora quando presente em uma concentração adequada de tampão de capping, trifosfato de guanosina (GTP), S-adenosilmetionina (SAM), etc.
Este produto é produzido de acordo com os requisitos do processo GMP e fornecido na forma líquida, usado para reação de encapsulamento de mRNA de pré-tradução in vivo/in vitro ou reação de marcação da extremidade 5' do mRNA.
Recurso
- Isolado de uma fonte recombinante
- Testado para ausência de endonucleases, exonucleases, RNases
Aplicativo
- Capping de mRNA antes de ensaios de tradução/tradução in vitro
- Marcação da extremidade 5´ do mRNA
Especificação
| Fonte | Recombinante E. coli com gene da enzima de encapsulamento do vírus vaccinia |
| Temperatura Ótima | 37℃ |
| Buffer de armazenamento | 20 mM Tris-HCl pH 8,0, 100 mM NaCl, 1 mM DTT, 0,1 mM EDTA, 0,1% Triton X-100, 50% glicerina |
| Definição de unidade | 1 unidade: A quantidade de enzima necessária para incorporar 10 pmol de GTP (α- 32P) em uma transcrição com 80 nucleotídeos (80 nt) a 37℃ em 1 hora. |
Componentes
| Componentes No. | Nome | 10614ES84 (2.000 U) | 10614ES92 (10.000 U) | 10614ES96 (100.000 U) | 10614ES99 (5 UM) |
| 10614 | Enzima de encapsulamento de vacínia mRNA grau GMP (10 U/μL) | 200 μL | 1 mL | 10 mL | 500 mL |
Envio e armazenamento
Os produtos de grau GMP da enzima de encapsulamento de vacínia mRNA são enviados com gelo seco e podem ser armazenados a -15℃ ~ -25℃ por um ano.
Figuras
Figura 1. A eficiência de encapsulamento quase atingiu 100% pelo sistema de encapsulamento de vaccinia da YEASEN. A espectrometria de massa de ácido nucleico antes da reação de encapsulamento foi mostrada na Figura 1A. A espectrometria de massa de ácido nucleico após a reação de encapsulamento foi mostrada na Figura 1B.
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