A ribonuclease A (RNase A) é um polipeptídeo de fita simples contendo 4 ligações dissulfeto com um peso molecular de cerca de 13,7 kDa. A RNase A é uma endorribonuclease que degrada especificamente o RNA de fita simples nos resíduos C e U. Especificamente, a clivagem reconhece a ligação fosfodiéster formada pela 5'-ribose de um nucleotídeo e o grupo fosfato na 3'-ribose do nucleotídeo pirimidina adjacente, de modo que os fosfatos 2', 3' - cíclicos são hidrolisados ​​para os fosfatos de nucleosídeos 3' correspondentes (por exemplo, pG-pG-pC-pA-pG é clivado pela RNase A para gerar pG-pG-pCp e A-PG). A RNase A é a mais ativa na clivagem de RNA fita simples. A concentração de trabalho recomendada é de 1-100 μ G/mL, compatível com vários sistemas de reação. Baixa concentração de sal (0-100 mM NaCl) pode ser usada para cortar RNA fita simples, RNA fita dupla e cadeias de RNA formadas pela hibridização RNA-DNA. Entretanto, em altas concentrações de sal (≥ 0,3 M), a RNase A cliva especificamente apenas o RNA fita simples.

A RNase A é mais comumente usada para remover RNA durante a preparação de DNA plasmídeo ou DNA genômico. Se a DNase está ou não ativa durante o processo de preparação pode facilmente afetar a reação. O método tradicional de fervura em banho-maria pode ser usado para inativar a atividade da DNase. Este produto não contém DNase e protease, e não requer tratamento térmico antes do uso. Além disso, este produto também pode ser usado em experimentos de biologia molecular, como análise de proteção de RNase e análise de sequência de RNA.

Este produto é fornecido como uma solução em uma concentração de 100 mg/mL. A concentração de trabalho recomendada é de 1-100 μg/mL, dependendo do tipo de aplicação.

Características

Ribonuclease A (RNase A), do pâncreas bovino

Atividade ≥80 Kunitz U/mg

Não Resíduo de DNase

Aplicações

RNases

Análise do Epitranscriptoma

Extração e purificação de DNA genômico

Especificações

Envio e armazenamento

O produto deve ser armazenado a -25°C ~ -15℃ por 2 anos.

O tampão de preservação foi 50 mM Tris-HCl (pH 7,4) e 50% (V/V) de glicerol.

Figuras

Amostra 1 não tem RNase A, Amostra 2-4 adicionaram 1 μl do 100 mg/mL RNase A. Em seguida, adicione 500 ng de RNA. Após incubar em temperatura ambiente por 5 minutos, adicione 1 μl de tampão de carregamento de RNA 10X. Em seguida, carregue todas as amostras em um gel de agarose de poro médio de 0,8% para eletroforese a 160 V por 10 minutos.

Documentos:

Ficha de dados de segurança

10406ES-MSDS-HB240223.PDF

Manuais

10406_Manual_Ver. HB240703_EN.pdf

Citações e referências:

[1] Chen Q, Xin M, Wang L, et al. A inibição de LDHA para induzir a liberação de eEF2 aumenta a trombocitopoiese. Sangue. 2022;139(19):2958-2971. doi:10.1182/blood.2022015620(IF:23.629)

[2] Chen K, Guo T, Li XM, et al. Regulação translacional da resposta da planta à alta temperatura por uma tRNAHis Guanylyltransferase de dupla função no arroz. Mol Plant. 2019;12(8):1123-1142. doi:10.1016/j.molp.2019.04.012(IF:10.812)