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Descrição do produto
A fosfatase alcalina pode remover os grupos fosfato 5' do DNA e do RNA. É comumente usada para evitar a autoligação de vetores. Em experimentos de clonagem molecular, a DNA ligase requer a presença de grupos fosfato para catalisar a ligação do DNA. Após a digestão com enzimas de restrição, os vetores retêm um grupo fosfato no local de clivagem. No entanto, após a desfosforilação pela fosfatase alcalina, a extremidade 5' do vetor não tem um grupo fosfato e, portanto, não pode se conectar com sua própria extremidade 3'. Como resultado, a autoligação do vetor, que de outra forma ocorreria preferencialmente na reação de ligação, é evitada. Isso aumenta a taxa de inserção do fragmento alvo. Além disso, a fosfatase alcalina pode ser usada para preparar moldes de DNA para marcação da extremidade 5'.
Este produto é uma fosfatase alcalina derivada de camarão que pode degradar quase todos os monoésteres de fosfato. No entanto, não pode hidrolisar diésteres ou triésteres de fosfato. A enzima atua na desfosforilação terminal, independentemente de os terminais serem pegajosos ou rombos. A SAP também pode ser usada para degradar dNTPs em reações de PCR, o que é útil para sequenciamento subsequente e análise de SNP.
Características
- Remoção de grupos fosfato das extremidades do DNA e do RNA. Prevenção da autoligação de vetores.
- Preparação de moldes de DNA para marcação da extremidade 5'.
- Degradação de dNTPs em reações de PCR.
Aplicações
- Molecular csolitário
- Sequenciamento de DNA
- Análise SNP
Componentes
| Componentes No. | Nome | 10322ES72 |
| 10322-UM | Fosfatase Alcalina de Camarão (SAP) (1 U/µL) | 250 você |
| 10322-B | Buffer SAP 10× | 1 eueu |
Especificações
| De Pichia pastoris, o gene da fosfatase alcalina do camarão foi clonado de Pandalus borealis. | |
| Controle de qualidade | Livre de contaminação por ribonuclease e desoxirribonuclease. |
| Pureza | ＞95% |
| Inativação Térmica | Incubação aos 65 anos°C por 5 minutos resulta em perda completa e irreversível da atividade. |
| Definição de unidade | A quantidade de enzima necessária para desfosforilar 1 μg de DNA pUC19 digerido com HindIII (que produz saliências 5') em 30 min a 25°C é definido como uma unidade de atividade. |
Armazenar
O os produtos devem ser armazenados em -25~-15℃ para 3 anos.
Documentos:
Ficha de dados de segurança
10322ES-MSDS-HB.PDF
Manuais
10322_Manual_Ver. EN20250219_EN.pdf
Storage
FAQ
Citations
Documents
Applications
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Perguntas frequentes
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