Descrição do produto

2×Hieff Canace™ Plus PCR Master Mix (com corante) é uma solução pré-misturada 2× pronta para uso contendo Hieff Canace™ Além de DNA polimerase de alta fidelidade, dNTPs e um sistema de buffer otimizado. A mistura inclui dois anticorpos monoclonais que inibem a atividade da polimerase e a atividade da exonuclease 3'→5' em temperatura ambiente, permitindo PCR de início quente altamente específico. A adição de fatores de alongamento permite a amplificação de fragmentos longos, com fragmentos alvo de até 13 kb. Esta enzima exibe atividade de DNA polimerase 5'→3' e atividade de exonuclease 3'→5', com uma fidelidade 83 vezes maior que a da DNA polimerase Taq e 9 vezes maior que a da DNA polimerase Pfu comum. É adequada para amplificar moldes complexos, produzindo produtos de PCR de ponta romba.

2×Hieff Canace™ Plus PCR Master Mix (com corante) oferece vantagens como simplicidade, alta sensibilidade, forte especificidade e excelente estabilidade. O sistema de reação requer apenas a adição de primers e template, e um protocolo de PCR de duas etapas pode ser usado para simplificar o procedimento e economizar tempo. O produto inclui corante de rastreamento de eletroforese, permitindo o carregamento direto de produtos de PCR para análise de gel. Além disso, ele contém um agente protetor especial que garante atividade estável mesmo após ciclos repetidos de congelamento e descongelamento.

Especificações

Armazenar

Este produto deve ser armazenado a -25~-15℃ por 1 anos.

Instruções

1. Sistemas de reação de PCR recomendados.

*A concentração final 1× da mistura contém 1 U/50 μL de polimerase, 2 mmol/L de Mg²⁺, e 200 μmol/L dNTPs.

**A concentração final recomendada de primers na reação de PCR é de 0,2-1 μmol/L, sendo preferencial 0,4 μmol/L.

***Quantidades de modelo recomendadas para um sistema de reação de 25 μL:

2. Programa de reação.

1）Protocolo de duas etapas (preferencial):

2）Protocolo de três etapas (convencional):

*Desnaturação inicial: recomendada a 98°C por 3 min (5-10 min para modelos de alto GC).

**Annealing: Recomendado a 60°C por 20 seg (ajustável entre 10-30 seg). O annealing prolongado pode causar manchas nos géis.

***Extensão: Recomenda-se a 72°C por 30 s/kb (até 60 s/kb para modelos complexos).

3）Protocolo de Recozimento de Gradiente (Recomendado para Alvos Difíceis):

4）Características dos diferentes protocolos de PCR:

Notas

1.Este produto é somente para uso em pesquisa.

2. Por favor, opere com jalecos e luvas descartáveis，para sua segurança.