2×Hieff™ HotStart PCR Genotyping Master Mix (com corante) é uma solução pré-misturada de PCR pronta para uso contendo Hieff™ HotStart Taq DNA Polymerase, dNTPs e um sistema tampão otimizado. Ele simplifica significativamente os procedimentos experimentais, exigindo apenas a adição de primers e modelo para amplificação, permitindo operações de alto rendimento e melhorando a reprodutibilidade dos resultados experimentais. Hieff™ HotStart Taq DNA Polymerase é uma Taq DNA Polymerase termoestável modificada por ligante cuja atividade é modulada com mudanças de temperatura. Sua atividade enzimática é completamente bloqueada à temperatura ambiente e liberada após aquecimento a 95 °C. A ativação da Hieff™ HotStart DNA Polymerase requer apenas 2-3 minutos e é compatível com programas de PCR existentes. Este produto evita a amplificação não específica durante os estágios de preparação da amostra e ciclo de temperatura, tornando-o eficaz para experimentos de genotipagem.
Características
- Mistura prática e pronta para uso
- Termoestável — a meia-vida é superior a 40 min a 95 °C
- Gera produtos de PCR com saliências de 3'-dA
Aplicações
- Genotipagem de camundongos
- PCR de inicialização rápida
Especificações
| Fidelidade (vs. Taq) | 1 × |
| Início quente | Não |
| Saliência | 3'-A |
| Polimerase | Taq DNA Polimerase |
| Formato de reação | SuperMix ou Master Mix |
| Velocidade de reação | Padrão |
| Tipo de produto | Mistura Mestre de PCR (2×) |
Componentes
| Nome | 10108ES03 | 10108ES08 | 10108ES50 | 10108ES60 |
| 2× Hieff™ HotStart PCR Genotipagem Master Mix (com corante) | 1 mL | 5×1 mL | 50×1 mL | 100×1 mL |
Figura
Citado de" A eliminação de hnRNPA1 promove a metástase do NSCLC e a EMT regulando o splicing alternativo do exon 9 do LAS1L, Frente. Oncol. , 23 de junho de 2022. Oncologia Molecular e Celular, Volume 12 - 2022"
Envio e armazenamento
Enviado em bolsas de gelo. Armazene a -20°C com prazo de validade de 2 anos.
Reação de PCR (50 μL)
| Componentes | Volume 1 | Concentrado. |
| ddH2O | para 50 μL | - |
| ADN | / | - |
| Primário F (10 μM) | 2 μL | 0,4 μM |
| Primário R (10 μM) | 2 μL | 0.4 μM |
| 2×Hieff™ Master Mix de Genotipagem HotStart PCR (com corante) | 25 μL | 1× |
| Tipo de DNA | Entrada |
| DNA genômico | 50 ng-100 ng |
| Plasmídeos | 100 pg-20 ng |
| cDNA | 1-5 μL |
Ciclagem de PCR
| Temperatura. | Tempo | Ciclos |
| 95°C | 5 minutos | 1 |
| 95°C | 30 segundos | 35 |
| 50-60°C | 30 segundos | |
| 72°C | 30 seg/kb | |
| 72°C | 10 minutos | 1 |
[1] Han P, Cao P, Yue J, et al. Knockdown de hnRNPA1 promove metástase de NSCLC e EMT regulando o splicing alternativo do exon 9 de LAS1L. Front Oncol. 2022;12:837248. Publicado em 23 de junho de 2022. doi:10.3389/fonc.2022.837248(SE:5.738)
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