Nos últimos anos, com o rápido desenvolvimento de biofármacos e o surgimento de terapias celulares e genéticas, bem como vacinas de mRNA durante a pandemia, garantir a segurança e a confiabilidade dos produtos biológicos se tornou um foco importante e prioridade regulatória para governos e órgãos reguladores em todo o mundo. O micoplasma é um tipo de contaminação comum, mas frequentemente difícil de eliminar. Para bioprocessos envolvendo cultura de células, os regulamentos exigem que "não deve haver contaminação por micoplasma.
Pontos para teste de micoplasma exigidos por órgãos reguladores
2.1 Reatividade cruzada:
DNA de 14 linhagens de filos não flexibacterianos e 6 células de engenharia comumente usadas em biomedicina foram selecionados, e nenhum dos canais alvo atingiu o pico e a referência interna foi amplificada normalmente.
| EHusa Sespécies | |
| Staphylococcus epidermidis | Pseudo-hifas |
| Clostridium perfringens | Salmonella entérica Enteritidis subsp. entérica |
| Clostridium acetobutylicum | Bacillus subtilis (bacillus subtilis) |
| Acinetobacter baumannii (bactéria imóvel) | Bacilo cereus |
| Lactobacillus acidophilus | HEK293 |
| Enterobacter aerogenes (classe taxonômica de bactérias) | Vero |
| Micrococcus garciniae | CHO |
| estreptococo mutans | E. coli |
| Pseudomonas aeruginosa | HEK293T |
| Estreptococo pneumoniae | Sf9 |
2.2 Alguns dos dados são os seguintes:
- Eetecção euimitar
A extração de ácido nucleico e a detecção de cepas padrão de Mycoplasma de 10 UFC/mL foram realizadas de acordo com as instruções das cepas padrão e dos kits de extração e detecção.
As amostras de NCS e NTC foram testadas ao mesmo tempo em cada experimento, e os resultados de 24 poços replicados de amostras de 10 UFC/mL de cada cepa atenderam ao requisito de que ≥23 dos 24 testes fossem positivos quando os resultados de NCS e NTC fossem satisfatórios.
Tabela 1 Informações sobre cepas validadas
| Número de série. | Nome do micoplasma | Concentração de líquido bacteriano |
| 1 | Mycoplasma arginini | 10 UFC/mL |
| 2 | Mycoplasma orale | 10 UFC/mL |
| 3 | Mycoplasma gallisepticum | 10 UFC/mL |
| 4 | Mycoplasma pneumoniae | 10 UFC/mL |
| 5 | Mycoplasma synoviae | 10 UFC/mL |
| 6 | Mycoplasma fermentans | 10 UFC/mL |
| 7 | Mycoplasma hyorhinis | 10 UFC/mL |
| 8 | Acholeplasma leigoslawii | 10 UFC/mL |
| 9 | Spiroplasma citri | 10 UFC/mL |
| 10 | Mycoplasma salivarium | 10 UFC/mL |
Tabela 2 Resultados do limite de detecção
| 10 UFC/mL | Experimento 1 | Experimento 2 | Experimento 3 |
| Taxa de detecção | 8/8 | 8/8 | 8/8 |
| Total | 24/24 | ||
Informações do produto
| Produto | Número de catálogo | Nome do produto | especificação do produto |
| Kit de pré-tratamento de amostra | 18461ES | Kit de preparação de amostra de DNA residual magnético MolPure® | 25T/100T |
| 18467ES | Kit de preparação de amostra MolPure® Mag48 FN | 3×16T/ 6×16T | |
| Nucleico instrumento de extração ácida | 80511ES | Extrator de ácido nucleico automatizado de 48 canais | 48 canais |
| Kit de detecção de micoplasma | 40619ES | Kit de detecção de qPCR em tempo real de micoplasma MycAway® (2G) | 25T/100T |