마이코플라스마 검출, 예방, 제거 - 모두 한 번에!
마이코플라스마
마이코플라스마(Mycoplasma)는 현재까지 발견된 가장 작고 단순한 원핵생물로, 직경이 0.1~0.3μm입니다. 필터를 통과할 수 있으며, 구형, 막대형, 사상형, 분지형 등 다양한 형태로 나타나는 높은 다형성을 보입니다. 실험실 및 생물의약품 생산 과정에서 세포 배양은 마이코플라스마 오염에 취약합니다. 문헌에 따르면, 보관 세포주에서 마이코플라스마 오염 발생률은 약 15~35%이며, 생물의약품 산업에서는 0.44~6.70%에 이릅니다 [1] .
그림 1: 마이코플라스마의 형태
마이코플라스마 오염의 영향
세균 및 곰팡이 오염은 비교적 쉽게 감지, 예방 및 제거할 수 있지만, 마이코플라스마 오염은 알아차리기 어렵습니다. 10^7-10^9 CFU/ml의 높은 증식 밀도에서도 탁도나 pH 변화와 같은 명확한 오염 징후가 나타나지 않을 수 있습니다. 마이코플라스마 오염은 세포에 다양한 변화를 초래할 수 있습니다(그림 2 참조).
그림 2: 마이코플라스마 오염 후 세포 상태 변화
마이코플라스마 검출을 위한 응용 시나리오
마이코플라스마 오염의 일반적인 출처
- 세포 간 교차 오염
- 작업 환경이나 실험 장비의 오염
- 실험자의 무균 기술이 부족함
- 배양 배지 또는 기타 시약의 오염
- 세포 준비에 사용된 원래 조직이나 장기가 오염된 경우.
세포 배양에서 마이코플라스마 오염이 발생할 경우 대처 방법
그림 3: 마이코플라스마 오염에 대한 총체적 솔루션
세포 내 마이코플라스마 오염에 대한 3-in-1 솔루션
1. 마이코플라스마 검출
1단계 등온 마이코플라스마 검출:
예센(Yeasen)의 원스텝 등온 마이코플라스마 검출 시약은 독창적인 등온 증폭 기술을 사용하여 청자색(음성)에서 하늘색(양성)까지 더욱 강력한 색상 구분력을 제공하여 시각적 식별을 더욱 용이하게 합니다. 또한, 위양성을 방지하기 위한 오염 방지 성분이 포함되어 있습니다.
그림 4: 1단계 마이코플라스마 검출의 작동 과정
PCR 기반 마이코플라스마 검출:
Yeasen의 PCR 마이코플라스마 검출법은 기존의 1단계 PCR과 달리, 프라이머 한 쌍 대신 세 쌍을 사용하여 마이코플라스마의 16S 및 23S 보존 영역을 타겟팅하여 중첩 PCR 증폭을 수행합니다. 이를 통해 민감도는 크게 향상되고 비특이성은 감소하여 마이코플라스마 단 한 개만 검출할 수 있습니다.
그림 5: 다양한 마이코플라스마 농도를 갖는 샘플의 PCR 증폭에 대한 겔 전기영동 이미지
그림 6: 다양한 마이코플라스마 농도를 갖는 샘플의 PCR 증폭에 대한 겔 전기영동 이미지
표 1: Yeasen의 1단계 등온 마이코플라스마 검출 시약으로 검출 가능한 마이코플라스마 유형
참고: 파란색 부분은 1단계 등온 검출법과 PCR 방법 모두로 검출 가능한 마이코플라스마 유형을 나타냅니다.
2. MycAway 마이코플라스마 제거 시약 (1000×)
MycAway 마이코플라스마 제거 시약(1000배)은 마이코플라스마 성장에 필요한 DNA와 필수 단백질 합성을 억제하여 세포에 해를 끼치지 않으면서 마이코플라스마를 효과적으로 제거하는 혼합 제형입니다. 세포 손상을 최소화하고 마이코플라스마 오염으로 인한 손실을 줄여줍니다.
그림 7: 세포 제거 효과 시연
마이코플라스마 제거 시약의 특징:
- 낮은 독성: 세포 독성이 최소이며 세포 생존력 테스트 및 형질 전환과 같은 후속 세포 실험에 영향을 미치지 않습니다 .
- 높은 안정성 : 효능을 유지하면서 장기간 -20°C에 보관 가능
- 사용이 간편합니다 . 제품을 마이코플라스마에 오염된 배양 배지에 넣고 배양하기만 하면 됩니다.
- 빠른 효과 : 단 3일 만에 눈에 띄는 효과가 나타납니다.
- 광범위 : 대부분의 실험실 마이코플라스마 유형에 효과적입니다.
그림 8: 마이코플라스마 제거 시약의 세포독성 시험 다이어그램
3. 마이코플라스마 예방
제품 정보
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범주 |
제품명 |
카탈로그 번호 |
명세서 |
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발각 |
40612ES25/60 |
25/100 티 |
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40615ES25/60 |
25/100 티 |
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40619ES25/60 |
25/100 티 |
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40614ES10/20 |
10/20 분석 |
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제거 |
MycAway™ 스프레이(바로 사용 가능) |
40605ES02/03 |
1/2×500mL |
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40607ES03/08 |
1/5×1mL |
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방지 |
40608ES03/08 |
1/5×1mL |
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40609ES60 |
100ml |
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40610ES60 |
100ml |