설명
마이코플라스마 PCR 검출 키트(중첩 PCR)(2G)는 다양한 생물학적 시료(세포 배양액, 실험 동물 분비물, 동물 혈청 등)에서 마이코플라스마 감염을 검출하기 위한 중첩 PCR(중첩 PCR) 방식을 기반으로 합니다. 본 키트는 정량 PCR 기술을 사용하여 마이코플라스마 16S-23S rRNA 서열의 보존적 영역에 대한 두 세트의 프라이머를 설계하고, 두 번의 PCR 증폭을 수행한 후, 두 번째 증폭 산물을 기반으로 마이코플라스마 오염 여부를 판단합니다. 경구 마이코플라스마(M.orale), 폐렴균(M.pneumoniae), 히오리니스균(M.hyorhinis), 아르기닌 마이코플라스마(M.arginini), 갈리셉티쿰균(M.gallisepticum), 시노비아균(M.synoviae), 발효 마이코플라스마(M.fermentans), 시트르산 스피로플라스마(Spiroplasma citri), 살바리움균(M.salivarium) 등 34종의 마이코플라스마를 최대 2.5copy/uL의 민감도로 검출할 수 있습니다. 또한, 10 CFU/mL의 마이코플라스마 표준 균주에 대해서도 정상적으로 밴드를 증폭할 수 있습니다. 본 제품은 높은 특이성, 높은 민감도, 편리하고 빠른 작동을 특징으로 하며, 세포 배양 상층액 검출에 직접 사용할 수 있습니다.
기존의 PCR 마이코플라스마 검출 키트와 비교했을 때, 이 제품은 프라이머와 템플릿 간의 비특이적 페어링으로 인해 비특이적 생성물이 생성되는 것을 피할 수 있습니다. 또한 샘플에서 미량의 마이코플라스마 DNA를 민감하게 검출하여 거짓 음성을 피할 수 있습니다.
특징
- 종합 감지 : 첨단 중첩 PCR 기술을 사용하면 단일 검사로 최대 34종의 마이코플라스마 종을 검출할 수 있습니다.
- 뛰어난 특이성 : 프라이머는 클로스트리디움이나 락토바실러스와 같은 관련 종과 교차 반응성이 없는 보존된 16S–23S rRNA 영역을 표적으로 합니다.
- 초고감도 : 조기에 안정적으로 식별할 수 있도록 검출 한계를 2.5copy/μL로 낮춥니다.
- 빠르고 편리한 워크플로 : 간소화된 프로토콜을 통해 2시간 이내에 샘플 준비 및 검출이 가능합니다.
- 안전한 & 오염 없음 : 포함된 비감염성 양성 대조군은 안전을 보장하고 교차 오염 위험을 제거합니다.
명세서
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(장비)와 함께 사용 |
기존 PCR 장비 |
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샘플 유형 |
균주, 세포 상층액 등 |
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중합효소 |
Taq DNA 중합효소 |
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검출 방법 |
중첩된 PCR |
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마이코플라스마 유형 검출 |
약전 에서 다루는 마이코플라스마 9종을 포함한 34종 |
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검출 한계 |
1차 PCR: 1x103개/uL 2차 PCR: 2.5 copies/μL / 5CFU/mL |
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반응시간(빠른 PCR 과정) |
48분 |
구성 요소
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구성품 번호 |
이름 |
40614ES10 |
40614ES20 |
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40614 -A * |
GMyc-1st PCR 믹스 |
460 μL |
460 μL×2 튜브 |
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40614 -B * |
GMyc-2nd PCR 믹스 |
490 μL |
490 μL×2 튜브 |
|
40614 -C ** |
양성 대조군 템플릿 |
20 μL |
40 μL |
【주의】: *PCR 반응은 매우 민감합니다. 위양성을 방지하려면 샘플을 추가할 때 양성 대조군을 마지막에 추가하세요.
**40614-C: 양성 대조군 템플릿, 양성 대조군.
배송 및 보관
본 제품은 -25~-15℃에서 1 년간 보관하시기 바랍니다 .
*키트 전체를 장기간 사용하지 않을 경우 직사광선을 피해 보관하십시오. 40614-C는 장기간 사용하지 않을 경우 -85~-65℃에서 냉동 보관할 수 있습니다.
애플리케이션
마이코플라스마 오염; 마이코플라스마 검사; 세포 배양 품질 관리
수치
1. 워크플로
2. 특성
그림 1. GMyc-PCR 마이코플라스마 검출 키트(2G)의 특이성 및 매트릭스 내성
(A)/(B). 샘플 매트릭스 간섭: 14개의 일반적인 샘플 매트릭스와 키트 내 양성 대조군 및 그 첨가물(2.5 카피/μL 양성 대조군)과 음성 대조군(PCR 혼합물)을 검증을 위해 선택했습니다. 14개의 매트릭스 모두에서 마이코플라스마가 검출되지 않았습니다.
(C). 검출 범위: GMyc-PCR 마이코플라스마 검출 키트(2G)는 10 CFU/mL의 민감도로 중국 및 국제 약전에서 요구하는 8가지 마이코플라스마 종을 모두 검출할 수 있습니다.
3. 높은 검출 감도
그림 2. 민감도 테스트
4. 안정
그림 3. 안정성 시험
(A) 동결-해동 안정성: 이 키트는 성능 저하 없이 -25~-15°C에서 10번의 동결-해동 사이클을 견뎌냅니다.
(B) 가속 안정성: Mycoplasma 2G 중첩 PCR 키트는 37°C에서 14일 후에도 안정을 유지합니다.
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