La T7 RNA polimerasi utilizza DNA a doppio filamento contenente la sequenza promotore T7 (5'-TAATACGACTCACTATAG*-3') come stampo e NTP come substrati per sintetizzare RNA complementare al filamento inverso di DNA a valle del promotore. Sia il DNA lineare a doppio filamento con estremità smussate o sporgenze 5' possono fungere da substrati stampo per la T7 RNA polimerasi, il che significa che plasmidi linearizzati o prodotti PCR possono essere utilizzati come stampi per la sintesi di RNA in vitro.

Questo kit impiega un principio di saggio immunoenzimatico a sandwich (ELISA) per rilevare la RNA polimerasi T7 residua. Gli standard e i campioni di prova della RNA polimerasi T7 vengono aggiunti ai pozzetti della micropiastra pre-rivestiti con anticorpi anti-RNA polimerasi T7 (36705-A). Vengono quindi aggiunti anticorpi di rilevamento della RNA polimerasi T7 marcati con biotina diluiti (36705-C), seguiti da Streptavidina-HRP (SA-HRP) (36705-D), formando un complesso anticorpo + antigene + anticorpo-biotina + SA-HRP. Dopo il lavaggio, viene aggiunto il substrato TMB (36705-H) per lo sviluppo del colore. Il TMB è catalizzato da HRP per passare da incolore a blu e infine a giallo dopo l'aggiunta della soluzione di arresto (36705-I). L'intensità del colore giallo è correlata positivamente alla quantità di RNA polimerasi T7 rilevata nel campione.

Componenti

*Lo standard 36705-B è una polvere liofilizzata.

Compatibile con T7 RNA Polimerasi: 10625, 10628 E 10629.

Dati di convalida

Tabella 1. Intervallo di linearità: 1～32 ng/mL ,R2=0,999 ,CV≤5%。

Tabella 2. Elevata specificità

Tabella 3. LOQ: Il limite di quantificazione per questo prodotto è determinato diluendo il punto di concentrazione più basso della curva standard, dove il coefficiente di variazione (CV) alla concentrazione più bassa è inferiore al 20%. Questo è definito come limite di quantificazione, che è 1 ng/mL.

Tabella 4. LOD: Il limite di rilevamento di questo prodotto è definito come la concentrazione standard corrispondente al valore di rilevamento medio del controllo negativo (NC) più due volte la deviazione standard. Misurando 24 standard NC, calcolando la media e la deviazione standard, il limite di rilevamento è determinato essere 0,318 ng/mL.

Spedizione e stoccaggio

Conservare a 2-8°C. La durata di conservazione è di 1 anno se non aperto e di 6 mesi dopo l'apertura.

Al ricevimento del prodotto, controllare che tutti i componenti siano completi e conservarli immediatamente alla temperatura di conservazione corrispondente.