Hifair ™ Advancefast 1st Strand CDNA Sintesi Supermix per qPCR (GDNA Digester Plus) _ 11155es

YeasenSku: 11155ES10

Misurare: 10 t
Prezzo:
Prezzo di vendita$55.00
Azione:
In magazzino

Hifair™ AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix per qPCR (gDNA digester plus) è una versione aggiornata di Hifair™ III Sintesi di cDNA a 1° filamento SuperMix per qPCR (gDNA digester plus). Rispetto alla generazione precedente Hifair™ Ⅲ Trascrittasi inversa, questo prodotto mostra una tolleranza migliorata agli inibitori, una velocità di trascrizione inversa più rapida e una resa di cDNA più elevata, rendendolo adatto per reazioni di trascrizione inversa di RNA da animali, piante e microrganismi. Il gDNA Digester Mix -V2 incluso in questo prodotto è stato notevolmente migliorato nella sua capacità di rimuovere il DNA residuo, digerendo efficacemente fino a 1000 ng di DNA, garantendo risultati più affidabili eliminando la contaminazione del DNA nei modelli di RNA.

Hifair™ AdvanceFast SuperMix contiene tutti i componenti necessari per la trascrizione inversa. Basta aggiungere il modello di RNA e H privo di RNasi.2O per avviare la reazione, terminando contemporaneamente l'attività di gDNA Digester per garantire l'integrità del cDNA.

I prodotti di trascrizione inversa sono adatti per qPCR basati su coloranti e sonde. Tuttavia, non sono consigliati per l'amplificazione di frammenti lunghi come la clonazione genica. Per tali applicazioni, Hifair™ Per una trascrizione inversa ad alta efficienza si consiglia il kit di sintesi del cDNA AdvanceFast 1st Strand (Cat#11150ES).

Specifiche

N. di cat.

11155ES10 / 11155ES60

Misurare

10 T / 100 T

Componenti

Componenti n.

Nome

11155ES10

11155ES60

11155-A

Hifair™ SuperMix AvanzatoVeloce

60 microlitri

600 microlitro

11155-B

Miscela digestiva gDNA -V2

20 microlitri

200 ioL

11155-C

RNasi H libera2Lo

200 microlitri

2×1 ml.

Magazzinaggio

Questo prodotto deve essere conservato a -25~-15℃ per 1 anni.

Istruzioni

1. Quando è richiesta la rimozione del DNA

1) Digestione del DNA

Preparare la seguente miscela in una provetta da microcentrifuga priva di RNasi, mescolare delicatamente pipettando e incubare a 37℃ per 2 minuti:

Componenti

Volume(microlitro)

Miscela digestiva gDNA -V2

2

RNA totale

10 pg–2 µg*

o mRNA

10 pg–500 ng

RNasi H libera2Lo

Fino a 14

*Si raccomanda di utilizzare ≤ 2 µg di RNA totale. Se l'espressione del gene target è bassa, la quantità può essere aumentata fino a 5 µg di RNA totale.

2) Impostazione della reazione di trascrizione inversa (sistema da 20 µL):

Componenti

Volume(microlitro)

Miscela di reazione dal passaggio 1

14

Hifair™ SuperMix AvanzatoVeloce

6

3) Programma di reazione:

Temperatura

Tempo

50℃

5 minuti

85℃

5 secondi

2. Quando la rimozione del DNA è Non Necessario

1) Configurazione della reazione di trascrizione inversa (sistema da 20 µL):

Componenti

Volume(microlitro)

Hifair™ SuperMix AvanzatoVeloce

6

RNA totale

10 pg–2 µg*

o mRNA

10 pg–500 ng

RNasi H libera2Lo

Fino a 20

*Si raccomanda di utilizzare ≤ 2 µg di RNA totale. Se l'espressione del gene target è bassa, la quantità può essere aumentata fino a 5 µg di RNA totale.

2) Programma di reazione:

Temperatura

Tempo

50℃

5 minuti

85℃

5 secondi

Appunti

1. Questo prodotto è destinato esclusivamente alla ricerca.

2. Si prega di operare con camici da laboratorio e guanti monouso,per la tua sicurezza.

3. Eseguire tutte le fasi di pipettaggio e miscelazione su ghiaccio per preservare l'integrità del campione.

4. Prima dell'uso, capovolgere delicatamente e centrifugare ogni componente a bassa velocità per garantire una corretta miscelazione.

Documento:

Manuale

Storage

This product should be stored at -25~ -15℃ for 1 year.

FAQ

This product is subsequently used for qPCR of common RNA. Random primers N6 and Oligo dT have been added in a certain proportion in the reverse transcription premix, so no additional primers are required. If qPCR or long fragment PCR for special RNAs such as small RNAs or circular RNAs is to be conducted subsequently, it is recommended to use the separate primer reverse transcription kits 11139ES or 11149ES.
For molecular enzyme reagents, simply invert and mix them together, then perform a gentle centrifugation. It is not recommended to vigorously shake to mix them.
The 11155ES can accommodate RNA input ranging from 10 pg to 5 μg. However, an excessively high RNA input does not necessarily lead to a more forward Ct value. Additionally, an excessively high input of self-prepared RNA also brings about residual other components. These inhibitory components remaining in the reverse transcription product may inhibit the subsequent qPCR reaction, resulting in an increased Ct value, fluctuation of the curve, or precipitation of the product. Ultimately, it is necessary to dilute the cDNA for use to achieve the final result.
It is not recommended to use a longer reverse transcription time. Using a longer time may cause the Ct value to be delayed. It is recommended to follow the procedure suggested in the manual.
For the PCR instrument, proper settings should be made. It is recommended to set the temperature at 4℃ for an infinite duration (∞) after the reaction is completely terminated. This is to prevent the possibility of forgetting to remove the tube after the reaction is completed. The PCR hot lid, through heat conduction, keeps the product in a high-temperature heating state.
No need. The reverse transcription product is usually a mixture, besides the cDNA product, there are also residual RNA, proteins, salt ions, dNTPs, etc. Among them, dNTPs cause significant interference for the determination using a microplate spectrophotometer, and the final measured value obtained from the product determination is not the concentration of the product. The equal amount level has been controlled and added in the RNA section before reverse transcription.
The product has been tested and found to be stable for one week at room temperature without any adverse effects. Therefore, it can be used to complete the subsequent experiments.
After opening, ensure that the reagents have not been contaminated by the syringe tips. Then, they can be stored at 4℃. However, it is recommended to use them up within 2 weeks.
We recommend using products 11188–11190ES.

Citations

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Indagine

FAQ

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