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DNase I एक एंडोन्यूक्लिएज है जो सिंगल-स्ट्रैंडेड और डबल-स्ट्रैंडेड DNA को पचाकर सिंगल डीऑक्सीन्यूक्लियोटाइड या सिंगल-स्ट्रैंडेड या डबल-स्ट्रैंडेड ऑलिगोडेऑक्सीन्यूक्लियोटाइड का उत्पादन कर सकता है। यह फॉस्फोडाइस्टर बॉन्ड को हाइड्रोलाइज करके 5'-फॉस्फेट समूहों और 3'-OH समूहों वाले मोनोडिऑक्सीन्यूक्लियोटाइड और ऑलिगोडेऑक्सीन्यूक्लियोटाइड का उत्पादन कर सकता है। औसत पाचन उत्पाद सबसे छोटा पॉलीटेट्रान्यूक्लियोटाइड होता है। DNase I कई प्रकार के DNA को उत्प्रेरित कर सकता है, जैसे कि सिंगल-स्ट्रैंडेड DNA, डबल-स्ट्रैंडेड DNA और यहां तक कि क्रोमेटिन (इसकी कटिंग दर हिस्टोन से प्रभावित होती है)। इष्टतम pH रेंज 7-8 है। DNase I की गतिविधि Ca पर निर्भर करती है2+ और इसे द्विसंयोजी धातु आयनों द्वारा सक्रिय किया जा सकता है, जैसे Co2+, एमएन2+, जेडएन2+, आदि 5 मिमी सीए2+ एंजाइम को हाइड्रोलाइज्ड होने से बचा सकता है। Mg की उपस्थिति में2+एंजाइम डीएनए के किसी भी स्ट्रैंड पर किसी भी स्थान को पहचान सकता है और काट सकता है; और Mn की उपस्थिति में2+, यह एक ही समय में डीएनए के दो स्ट्रैंड को पहचान सकता है और लगभग एक ही स्थान पर काटकर कुंद सिरे बना सकता है, या 1-2 न्यूक्लियोटाइड्स के साथ चिपचिपा सिरे बना सकता है। डीएनएसे I का व्यापक रूप से डीएनए-मुक्त आरएनए की तैयारी में उपयोग किया जाता है; इन विट्रो प्रतिलेखन के बाद टेम्पलेट डीएनए को हटा दें; आरटी-पीसीआर और आरटी-क्यूपीसीआर प्रतिक्रियाओं से पहले डीएनए-मुक्त आरएनए तैयार करें; निक ट्रांसलोकेशन के माध्यम से डीएनए लेबलिंग करने के लिए डीएनए पॉलीमरेज़ I के साथ संयोजन करें; डीएनए विखंडन पुस्तकालय निर्माण।
यह उत्पाद जीएमपी प्रक्रिया आवश्यकताओं के अनुसार निर्मित किया जाता है, और उत्पाद तरल रूप में उपलब्ध कराया जाता है।
विशेषता
- डीएनए विशिष्ट एंडोन्यूक्लिऐस
- डबल-स्ट्रैंडेड और सिंगल-स्ट्रैंडेड डीएनए को ख़राब करता है
- उत्पाद 5'-फॉस्फेट और 3'-OH वाले छोटे ओलिगोस हैं
आवेदन
- आरएनए नमूनों से दूषित जीनोमिक डीएनए को हटाना
- प्रतिलेखन प्रतिक्रियाओं में डीएनए टेम्पलेट्स का क्षरण
विनिर्देश
| स्रोत | पुनः संयोजक ई कोलाई DNase I जीन के साथ |
| इष्टतम तापमान | 37℃ |
| भंडारण बफर | 10 मिमी ट्रिस-एचसीएल पीएच 7.6，2 मिमी CaCl2, 50% (v/v) ग्लिसरॉल |
| इकाई परिभाषा | 37°C पर 10 मिनट के भीतर 1 μg प्लास्मिड DNA को पूरी तरह से विघटित करने के लिए आवश्यक एंजाइम की मात्रा। (प्रतिक्रिया बफर है: 10 mM ट्रिस-HCl pH 7.6, 2.5 mM MgCl2, 0.5 मिमी CaCl2, 1 μg प्लास्मिड डीएनए) |
अवयव
| घटक सं. | नाम | 10611ES76 (500 यू) | 10611ES84 (2,000 यू) | 10611ES92 (10,000 यू) |
| 10611 | डीऑक्सीराइबोन्यूक्लिऐस I (DNase I) GMP-ग्रेड (2 U/μL) | 250 μएल | 1 एमएल | 5 एमएल |
शिपिंग और भंडारण
डीऑक्सीराइबोन्यूक्लिऐस I (DNase I) GMP-ग्रेड उत्पादों को सूखी बर्फ के साथ भेजा जाता है और इन्हें -15℃ ~ -25℃ तापमान पर एक वर्ष तक संग्रहीत किया जा सकता है।
आंकड़ों
चित्र 1. प्रतिस्पर्धी ब्रांडों की तुलना में YEASEN का DNase I प्रतिलेखन के दौरान DNA टेम्पलेट को प्रभावी ढंग से हटा सकता है।
[1] लू जेड, लियू एच, सॉन्ग एन, एट अल. METTL14 N<sup>6</sup>-मेथिलैडेनोसिन-निर्भर Sirt1 के डाउनरेगुलेशन के माध्यम से पोडोसाइट चोट और ग्लोमेरुलोपैथी प्रगति को बढ़ाता है। सेल डेथ डिस. 2021;12(10):881. प्रकाशित 2021 सितंबर 27. doi:10.1038/s41419-021-04156-y(IF:8.469)
[2] यू वाई, वांग वाई, झांग डब्ल्यू, एट अल. बड़े सेगमेंटल बोन डिफेक्ट रिपेयर के लिए प्रीओस्टियोब्लास्ट-व्युत्पन्न मैट्रिक्स और हाइड्रोजेल से बना बायोमिमेटिक पेरीओस्टेम-बोन सब्स्टीट्यूट। एक्टा बायोमेटर। 2020;113:317-327. doi:10.1016/j.actbio.2020.06.030(IF:7.242)
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