2× Hieff Canace™ AdvanceFast PCR Master Mix (avec colorant) est une solution pré-mélangée 2× prête à l'emploi contenant Hieff Canace™ ADN polymérase haute fidélité AdvanceFast, dNTP et un système tampon optimisé, qui contient des indicateurs d'électrophorèse pré-ajoutés. Le pré-mélange contient un indicateur d'électrophorèse pré-ajouté, les produits PCR peuvent être directement électrophorésés, les produits d'amplification sont des extrémités plates. 2× Hieff Canace™ AdvanceFast PCR Master Mix (avec colorant) présente les avantages d'une mise en œuvre rapide et facile, d'une sensibilité élevée, d'une spécificité élevée, d'une bonne stabilité, etc. Le système de réaction peut être ajouté uniquement avec les amorces et les modèles. De plus, le produit contient également un agent protecteur spécifique, de sorte que le prémélange peut toujours conserver une activité stable après des congélations et décongélations répétées.
Ultra haute fidélité: Faible taux de mésappariement chez les sujets sujets aux mutations gène à GC élevé;
Vitesse rapide : La vitesse est aussi rapide que 5 s/ko ;
Large applicabilité : Il peut être utilisé pour amplifier des gènes avec une teneur en GC de 20 à 80 % et tolérer 20 % de lysats de sang et de souris ;
Bonne stabilité : Stocké à 37°C pendant 7 jours sans affecter les performances ;
Utilisation facile : Ajout simple d'amorces et de modèles pour l'amplification, avec un colorant de chargement bleu pour l'électrophorèse directe.
Caractéristiques
| N° de cat. | 10164ES01 | 10164ES03 | 10164ES08 |
| Taille | 250 μL | 1 ml | 5×1 mL |
Chiffres
Figure : L'ADN polymérase haute fidélité Hieff Canace™ AdvanceFast présente une fidélité élevée par rapport aux produits d'autres marques (A). L'analyse a été réalisée en examinant la fréquence de mutation des produits PCR de 6 segments riches en GC (environ 80 %) amplifiés à partir des génomes de différentes espèces. Les produits PCR amplifiés par l'ADN polymérase haute fidélité Hieff Canace™ AdvanceFast ont été clonés dans des vecteurs et 100 clones individuels sélectionnés pour chaque séquence ont été soumis au séquençage Sanger.
L'ADN polymérase haute fidélité Hieff Canace™ AdvanceFast présente une vitesse d'amplification élevée (B), une compatibilité d'amplification GC élevée (C) et une tolérance sanguine (D). Les résultats de la PCR et du séquençage des clients montrent que l'ADN polymérase haute fidélité Hieff Canace™ AdvanceFast présente de bonnes performances en termes de rendement et de spécificité de PCR (EH).
Stockage
Ce produit doit être conservé entre -25 et -15 ℃ pendant 1 an.
Instructions
- Systèmes de réaction PCR recommandés.
| Composants | Volume (μL) | Final concentration |
| 2× Mélange maître PCR Hieff Canace™ AdvanceFast (avec colorant)* | 25 | 1× |
| Modèle** | x | - |
| Avant Apprêt (10 μmol/L)*** | 2 | 0,4 μmol/L |
| Inverse Apprêt (10 μmol/L) | 2 | 0.4 μmol/L |
| ddH2O | Jusqu'à 50 | - |
Tableau 1 Système de réaction PCR
*Dans des prémélanges 1× contenant 2 mM de Mg2+ et 200 μM de dNTP.
**Plage recommandée de 10 à 200 ng, plage de volume de téléchargement d'échantillon d'ADNc ne dépassant pas 1/10 du système de réaction, recommandée de 1 à 2,5 μL.
***La concentration finale de l'amorce dans le système de réaction PCR varie de 0,2 à 1 μM, et 0,4 μM est recommandé.
- Programme de réaction.
| Faire du vélo étape | Temp. | Temps | Cycles |
| Dénaturation initiale | 98℃ | 30 secondes | 1 |
| Dénaturation | 98℃ | 10 secondes | 30-35 |
| Recuit* | 60℃ | 5 secondes | |
| Extension** | 72℃ | 5 à 10 secondes/Ko | |
| Final extension | 72℃ | 2 minutes | 1 |
Tableau 2 Programme de réaction PCR
*Température recommandée : 60°C, un gradient de température peut être défini pour trouver la température optimale pour le recuit des amorces. Le temps de recuit recommandé est fixé à 5 secondes et peut être ajusté de 5 à 30 secondes. Un temps de recuit trop long peut entraîner des produits d'amplification diffus sur le gel.
**Durée d'extension : recommandée 5 s/ko, peut également être étendue à 10 s/ko selon les besoins.
Remarques
- Ce produit est destiné à la recherche uniquement.
- Veuillez travailler avec des blouses de laboratoire et des gants jetables, pour votre sécurité.
Documents:
Citations et références :
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Storage
FAQ
(2) If the RNA sample is small or if you need to obtain a very long target fragment, it is recommended not to perform digestion during reverse transcription. The longer the target fragment, the more RNA needs to be input, and accordingly, more cDNA will be required.
(2) For animal genomes, after product performance testing, the minimum detectable amount is 100pg of animal genome.
(3) For plasmids, since they are relatively pure, after product performance testing, the minimum detectable amount is 1pg of plasmid.
(1)The thawing requirements for 10166ES stipulate that it should be thawed slowly on ice, and it cannot be thawed at room temperature or through heating.
(2) When performing the amplification process, it is recommended to set the temperature at 68℃ and the amplification speed at 10 seconds per kilobase.
(3) The longer the target fragment to be amplified is, the more template should be used.
(4) In the PCR system, the concentration of primers is too low or the number of cycles is insufficient: appropriately increase the amount of primers, or increase the number of amplification cycles;
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