Hifair ™ AdvanceFast 1. Strand cDNA Synthesis Supermix til QPCR (GDNA Digester Plus) _ 11155ES

YeasenSKU: 11155ES10

Størrelse: 10 t
Pris:
Salgspris$55.00
Lager:
På lager

Hifair™ AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix til qPCR (gDNA digester plus) er en opgraderet version af Hifair™ Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix til qPCR (gDNA digester plus). Sammenlignet med den tidligere generation af Hifair™ Ⅲ Revers Transcriptase, dette produkt udviser øget tolerance over for inhibitorer, hurtigere revers transkriptionshastighed og højere cDNA-udbytte, hvilket gør det velegnet til reverse transkriptionsreaktioner af RNA fra dyr, planter og mikroorganismer. gDNA Digester Mix -V2 inkluderet i dette produkt er blevet væsentligt forbedret i dets evne til at fjerne resterende DNA, effektivt fordøje op til 1000 ng DNA, hvilket sikrer mere pålidelige resultater ved at eliminere DNA-kontamination i RNA-skabeloner.

Hifair™ AdvanceFast SuperMix indeholder alle komponenter, der kræves til omvendt transkription. Du skal blot tilføje RNA-skabelon og RNase-fri H2O for at starte reaktionen, samtidig med at aktiviteten af ​​gDNA Digester afsluttes for at sikre cDNA-integritet.

De omvendte transkriptionsprodukter er velegnede til farvestofbaseret og probebaseret qPCR. De anbefales dog ikke til amplifikation med lange fragmenter, såsom genkloning. Til sådanne applikationer, Hifair™ AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit (Cat#11150ES) anbefales til højeffektiv revers transkription.

Specifikationer

Kat.nr.

11155ES10 / 11155ES60

Størrelse

10 T / 100 T

Komponenter

Komponenter nr.

Navn

11155ES10

11155ES60

11155-A

Hifair™ AdvanceFast SuperMix

60 μL

600 μL

11155-B

gDNA Digester Mix -V2

20 μL

200 μL

11155-C

RNase fri H2O

200 μL

2×1 ml

Opbevaring

Dette produkt skal opbevares ved -25~-15 ℃ til 1 år.

Instruktioner

1. Når DNA-fjernelse er påkrævet

1) DNA fordøjelse

Forbered følgende blanding i et RNase-frit mikrocentrifugerør, bland forsigtigt ved pipettering og inkuber ved 37 ℃ i 2 minutter:

Komponenter

Bind(μL)

gDNA Digester Mix -V2

2

Total RNA

10 pg-2 µg*

eller mRNA

10 pg-500 ng

RNase fri H2O

Op til 14

*Det anbefales at bruge ≤ 2 µg Total RNA. Hvis målgenekspressionen er lav, kan mængden øges op til 5 µg Total RNA.

2) Opsætning af omvendt transkriptionsreaktion (20 µL system):

Komponenter

Bind(μL)

Reaktionsblanding fra trin 1

14

Hifair™ AdvanceFast SuperMix

6

3) Reaktionsprogram:

Temperatur

Tid

50 ℃

5 min

85℃

5 sek

2. Når DNA-fjernelse er Ikke Påkrævet

1) Opsætning af omvendt transkriptionsreaktion (20 µL system):

Komponenter

Bind(μL)

Hifair™ AdvanceFast SuperMix

6

Total RNA

10 pg-2 µg*

eller mRNA

10 pg-500 ng

RNase fri H2O

Op til 20

*Det anbefales at bruge ≤ 2 µg Total RNA. Hvis målgenekspressionen er lav, kan mængden øges op til 5 µg Total RNA.

2) Reaktionsprogram:

Temperatur

Tid

50 ℃

5 min

85℃

5 sek

Noter

1. Dette produkt er kun til forskningsbrug.

2. Arbejd venligst med laboratoriefrakker og engangshandsker,for din sikkerhed.

3. Udfør alle pipettering og blandingstrin på is for at bevare prøvens integritet.

4. Vend forsigtigt og centrifuger hver komponent ved lav hastighed før brug for at sikre korrekt blanding.

Dokument:

Manuel

Storage

This product should be stored at -25~ -15℃ for 1 year.

FAQ

This product is subsequently used for qPCR of common RNA. Random primers N6 and Oligo dT have been added in a certain proportion in the reverse transcription premix, so no additional primers are required. If qPCR or long fragment PCR for special RNAs such as small RNAs or circular RNAs is to be conducted subsequently, it is recommended to use the separate primer reverse transcription kits 11139ES or 11149ES.
For molecular enzyme reagents, simply invert and mix them together, then perform a gentle centrifugation. It is not recommended to vigorously shake to mix them.
The 11155ES can accommodate RNA input ranging from 10 pg to 5 μg. However, an excessively high RNA input does not necessarily lead to a more forward Ct value. Additionally, an excessively high input of self-prepared RNA also brings about residual other components. These inhibitory components remaining in the reverse transcription product may inhibit the subsequent qPCR reaction, resulting in an increased Ct value, fluctuation of the curve, or precipitation of the product. Ultimately, it is necessary to dilute the cDNA for use to achieve the final result.
It is not recommended to use a longer reverse transcription time. Using a longer time may cause the Ct value to be delayed. It is recommended to follow the procedure suggested in the manual.
For the PCR instrument, proper settings should be made. It is recommended to set the temperature at 4℃ for an infinite duration (∞) after the reaction is completely terminated. This is to prevent the possibility of forgetting to remove the tube after the reaction is completed. The PCR hot lid, through heat conduction, keeps the product in a high-temperature heating state.
No need. The reverse transcription product is usually a mixture, besides the cDNA product, there are also residual RNA, proteins, salt ions, dNTPs, etc. Among them, dNTPs cause significant interference for the determination using a microplate spectrophotometer, and the final measured value obtained from the product determination is not the concentration of the product. The equal amount level has been controlled and added in the RNA section before reverse transcription.
The product has been tested and found to be stable for one week at room temperature without any adverse effects. Therefore, it can be used to complete the subsequent experiments.
After opening, ensure that the reagents have not been contaminated by the syringe tips. Then, they can be stored at 4℃. However, it is recommended to use them up within 2 weeks.
We recommend using products 11188–11190ES.

Citations

Du kan også lide

Forespørgsel

FAQ

Produktet er kun til forskningsformål og er ikke beregnet til terapeutisk eller diagnostisk brug hos mennesker eller dyr. Produkter og indhold er beskyttet af patenter, varemærker og ophavsrettigheder ejet af Yeasen Biotechnology. Varemærkesymboler angiver oprindelseslandet, ikke nødvendigvis registrering i alle regioner.

Visse applikationer kan kræve yderligere tredjeparts intellektuelle ejendomsrettigheder.

Yeasen er dedikeret til etisk videnskab og mener, at vores forskning bør adressere kritiske spørgsmål og samtidig sikre sikkerhed og etiske standarder.