LZCAP GG (3'ACM), (50 mm) _ 10686ES

Spare $500.00
YeasenSKU: 10686ES60

Størrelse: 100 μl
Pris:
Salgspris$500.00 Regelmæssig pris$1,000.00
Lager:
På lager

LZCap GG (3'Acm) er en cap1-analog. Produktet anvendes til transkription med den indledende sekvens af 5'GG3', og den naturlige cap1-struktur er produceret ved Cap1-transkriptionsafdækning.

amerikansk patent godkendt.

Komponenter

Kat nr.

Navn

Størrelse

10686

LZCap GG (3'Acm) (50mM)

100 μL

1 ml

Produktdetaljer

Molekylær formel

C35H48N16O25P4 (fri syre)

Molekylvægt

1216,19 (fri syre)

Koncentration

50±3 mM

Renhed

HPLC ≥95 %

LZCap DNA skabelon Design

LZCap GG(3'Acm) er egnet for GG-initieret sekvenser. Som vist i figur nedenfor, den SP6 promotor (understreget) fulgte ved GG-sekvensen kan efeffektivt indlede transskription.

Protokol

1. Tø komponenter påkrævet til forsøgetgå ind på is.

2. Tilføje RNase frit vand og NTP'er til reaktionsrør.

3. Varme LZCap GG(3'Acm) alikvot for 15 min kl 60°C. Afkøles kl stuetemperatur for 5 min.

4. Tilføj straks LZCap GG(3'Acm) til rør og vortex til blande. Spin kort til samle flydende.

5. Tilføje 10x transskription Buffer og vortex.

6. Tilføje DNA skabelon and SP6 Enzym Blande.

7. Bland forberedt reaktionsopløsning, centrifugering kort, og inkuber kl 37°C for 2-3 timer. Hvis udskriften længde er mindre end 100 nt, øge reaktionstid til 4-8 h.

Komponent

Bind (μL)

Slutkoncentration

RNase Gratis vand

Op til 20 μL

/

ATP (100mM)

1

5mM

UTP (100 mm)

1

5 mM

CTP (100 mM)

1

5 mM

GTP (100 mm)

0,2

1 mM

LZCap GG(3'Acm) (50 mm)

1.6

4mM

10×Transskription Buffer

2

1 ×

Lineær DNA

1 μg

50 ng/μL

SP6 Enzym Blande

2

/

Endelig bind

20 μL

Noter:

1) De SP6 enzym blande vi anbefales til brugt er MEGAscript® Kit (AM1330).

2) LZCap GG(3'Acm) er velegnet til SP6-promotor-transkriptionsvektor med 5 'GG 3'-initierede sekvenser, hvilke har brug for overvejes, når vektoren konstrueres.

3) De reagenser, forbrugsvarer og containere brugt i de eksperiment er gratis of RNase forurening.

4) Det er anbefales til bruge en lineariseret DNA tempfor sent til transskription.

5) Når modificeret nukleotider var brugt i placere af vildtype nukleotider, de endelig koncentrattion af de reaktion var uændret.

6) Ændret N1-Mig-pUTP kan være brugt i placere af vildtype UTP. De modificeret N1-Mig-pUTP reducerer immunogenicitet af mRNA. Henovcom kan også give modificeret nukleotid N1-Mig-pUTP (Kat. Ingen.: HN1002).

7) Hvis PCR prokanal er brugt som transskriptionen indvielse DNA skabelon, de beløb af DNA skabelon kan være reduceret ved halv.

Opbevaring

Dette produkt kan opbevares ved -25~-15 ℃ i to år.

Forholdsregler

  1. For din sikkerhed og sundhed skal du bære personlige værnemidler (PPE), såsom laboratoriefrakker og engangshandsker, når du arbejder med dette produkt.
  2. Kun til forskningsbrug.

F&Q

1. Hvordan designer du LZCap?

Enzymer har en relativt "specifik" genkendelse af substrater. Derfor, når vi designer en ny hættestruktur, har vi på den ene side brug for nye strukturelle modifikationer til patentformål, men på den anden side stræber vi efter at bevare ligheden med naturlige/kendte strukturer så meget som muligt. Den naturlige struktur har en ribose 3' OH, som kan modificeres (f.eks. methylering). Baseret på denne betragtning valgte vi at tilføje et carbon ved 3'-positionen for patentnyhed, efterfulgt af en NH for at efterligne hydrogenbindingen af ​​OH og derefter en acetylgruppe for at reducere NH's basicitet og forbedre dens hydrogenbindingsevne. Aktiviteten af LzCap er bedre end methylated naturlig kasket, muligvis på grund af øget hydrogenbinding. Sammenlignet med methyl- og methoxygrupperne kan acetylaminogruppen også øge van der Waals interaktioner mellem substratet (cap) og den initierende faktor (enzym).

2.Er acetylaminogruppen stabil?

Acetylaminogruppen er allerede tilstrækkelig stabil. Det er meget mere stabilt end den 7-methylerede position og phosphodiesterbindingen, som er de mindst stabile dele af hætten.

Kontakt os venligst for flere detaljer om LZCap-licensen.

Storage

This product could be stored at -25~-15 ℃ for two years.

FAQ

Enzymes have a relatively "specific" recognition of substrates. Therefore, when designing a new cap structure, on one hand, we need novel structural modifications for patent purposes, but on the other hand, we strive to maintain similarity with natural/known structures as much as possible. The natural structure has a ribose 3' OH, which can be modified (e.g., methylation). Based on this consideration, we chose to add a carbon at the 3' position for patent novelty, followed by an NH to mimic the hydrogen bonding of OH, and then an acetyl group to reduce the basicity of NH and enhance its hydrogen bonding capability. The activity of LzCap is better than methylated natural cap, possibly due to increased hydrogen bonding. Compared to the methyl and methoxy groups, the acetyl amino group may also increase van der Waals interactions between the substrate (cap) and the initiating factor (enzyme).
The acetyl amino group is already sufficiently stable. It is much more stable than the 7-methylated position and the phosphodiester bond, which are the least stable parts of the cap.

Citations

Documents

Applications

Du kan også lide

Forespørgsel

FAQ

Produktet er kun til forskningsformål og er ikke beregnet til terapeutisk eller diagnostisk brug hos mennesker eller dyr. Produkter og indhold er beskyttet af patenter, varemærker og ophavsrettigheder ejet af Yeasen Biotechnology. Varemærkesymboler angiver oprindelseslandet, ikke nødvendigvis registrering i alle regioner.

Visse applikationer kan kræve yderligere tredjeparts intellektuelle ejendomsrettigheder.

Yeasen er dedikeret til etisk videnskab og mener, at vores forskning bør adressere kritiske spørgsmål og samtidig sikre sikkerhed og etiske standarder.