2 × Hieff Canace ™ AdvanceFast High -Fidelity PCR Master Mix (med farvestof) -10164ES

YeasenSKU: 10166ES01

Størrelse: 250 μl
Pris:
Salgspris$20.00
Lager:
På lager


2× Hieff Canace™ AdvanceFast PCR Master Mix (With Dye) er en klar-til-brug 2x forblandet opløsning indeholdende Hieff Canace™ AdvanceFast High-Fidelity DNA-polymerase, dNTP'er og et optimeret buffersystem, som indeholder forudtilsatte elektroforeseindikatorer. Forblandingen indeholder forudtilsat elektroforeseindikator, PCR-produkter kan elektroforeres direkte, amplifikationsprodukterne er flade ender. 2× Hieff Canace™ AdvanceFast PCR Master Mix (With Dye) har fordelene ved hurtig og nem, høj sensitivitet, høj specificitet, god stabilitet osv., reaktionssystemet kan tilføjes med kun primere og skabeloner. Derudover indeholder produktet også et specifikt beskyttelsesmiddel, så præmixen stadig kan opretholde en stabil aktivitet efter gentagen frysning og optøning.

Ultra-high fidelity: Lav mismatchrate hos mutationstilbøjelige højt GC-gen;
Hurtig hastighed: Hastigheden er lige så høj som 5 sek/kb;
Bred anvendelighed: Det kan bruges til at amplificere gener med 20-80% GC-indhold og tolerere 20% blod- og muselysater;
God stabilitet: Opbevares ved 37°C i 7 dage uden at påvirke ydeevnen;
Nem brug: Bare tilføjelse af primere og skabeloner til amplifikation, med blå loading farvestof til direkte elektroforese.

Specifikationer

Kat.nr. 10164ES01 10164ES03 10164ES08
Størrelse 250 μL 1 ml 5×1 ml

Figurer

Figur: Hieff Canace™ AdvanceFast High-Fidelity DNA-polymerase har høj kvalitet sammenlignet med andre mærkers produkter (A). Assayet blev udført ved at undersøge mutationsfrekvensen af ​​PCR-produkter af 6 GC-rige (ca. 80%) segmenter amplificeret fra genomerne fra forskellige arter. PCR-produkterne amplificeret af Hieff Canace™ AdvanceFast High-Fidelity DNA-polymerase blev klonet ind i vektorer, og 100 udvalgte enkeltkloner for hver sekvens blev udsat for Sanger-sekventering.

Hieff Canace™ AdvanceFast High-Fidelity DNA-polymerase har høj amplifikationshastighed (B), høj GC-amplifikationskompatibilitet (C) og blodtolerance (D). Resultater fra kundernes PCR og sekventering viser, at Hieff Canace™ AdvanceFast High-Fidelity DNA-polymerase har god ydeevne i PCR-udbytte og specificitet (EH).

Opbevaring

Dette produkt bør opbevares ved -25~-15 ℃ i 1 år.

Instruktioner

  1. Anbefalede PCR-reaktionssystemer.

Komponenter

Volumen (μL)

Finale koncentration

2× Hieff Canace™ AdvanceFast PCR Master Mix (med farvestof)*

25

1×

Skabelon**

x

-

Forward Primer(10 μmol/L)***

2

0,4 μmol/L

Bagside Primer (10 μmol/L)

2

0.4 μmol/L

ddH2O

Op til 50

-

Tabel 1 PCR-reaktionssystem

*I 1× forblandinger indeholdende 2 mM Mg2+ og 200 μM dNTP'er.

**Anbefalet område 10-200 ng, cDNA prøve upload volumen område ikke mere end 1/10 af reaktionssystemet, anbefalet 1-2,5 μL.

***Den endelige primerkoncentration i PCR-reaktionssystemet varierer fra 0,2-1 μM, og 0,4 μM anbefales.

  1. Reaktionsprogram.

Cyklus trin

Temp.

Tid

Cykler

Indledende denaturering

98℃

30 sek

1

Denaturering

98℃

10 sek

30-35

Udglødning*

60℃

5 sek

Udvidelse**

72℃

5-10 sek/kb

Finale forlængelse

72℃

2 min

1

Tabel 2 PCR-reaktionsprogram

*Anbefalet temperatur: 60°C, en temperaturgradient kan sættes op for at finde den optimale temperatur til primer-annealing. Den anbefalede udglødningstid er indstillet til 5 sek og kan justeres fra 5-30 sek. For lang annealingstid kan resultere i diffuse amplifikationsprodukter på gelen.

**Forlængelsestid: Anbefalet 5 sek/kb, kan også forlænges til 10 sek/kb efter behov.

Noter

  1. Dette produkt er kun til forskningsbrug.
  2. Brug venligst laboratoriefrakker og engangshandsker, for din sikkerhed.

Dokumenter:

Manualer

Citater og referencer:

[1] Dong W, Zhu Y, Chang H, et al. Et SHR-SCR-modul specificerer skæbne til bælgfrugtbarkceller for at muliggøre nodulation. Natur. 2021;589(7843):586-590. doi:10.1038/s41586-020-3016-z(IF:42.779)

[2] Sun L, Yan Y, Lv H, et al. Rapamycin retter sig mod STAT3 og påvirker c-Myc for at undertrykke tumorvækst. Cell Chem Biol. 2022;29(3):373-385.e6. doi:10.1016/j.chembiol.2021.10.006(IF:8.116)

[3] Ye M, Xiong L, Dong Y, et al. Den potentielle rolle af methioninaminopeptidase-genet PxMetAP1 i et kosmopolitisk skadedyr for Bacillus thuringiensis-toksintolerance. Int J Mol Sci. 2022;23(21):13005. Udgivet 2022 27. okt. doi:10.3390/ijms232113005(IF:6.208)

[4] He Y, Zhou J, Fu R, et al. Anvendelsen af ​​DNA-HRP-funktionaliserede AuNP-prober til kolorimetrisk påvisning af citrus-associerede Alternaria-gener. Talanta. 2022;237:122917. doi:10.1016/j.talanta.2021.122917(IF:6.057)

[5] Guo L, Yang W, Huang Q, et al. Selenocystein-specifik massespektrometri afslører vævssærskilte selenoproteomer og kandidatselenoproteiner. Cell Chem Biol. 2018;25(11):1380-1388.e4. doi:10.1016/j.chembiol.2018.08.006(IF:5.592)

[6] Dou W, Zhu Q, Zhang M, Jia Z, Guan W. Screening og evaluering af de stærke endogene promotorer i Pichia pastoris. Fakta om mikrobceller. 2021;20(1):156. Udgivet 2021 9. august doi:10.1186/s12934-021-01648-6(HVIS:5.328)

[7] Xiong Y, Yi Y, Wang Y, Yang N, Rudd CE, Liu H. Ubc9 interagerer med og SUMOylerer TCR-adapteren SLP-76 til NFAT-transskription i T-celler. J Immunol. 2019;203(11):3023-3036. doi:10.4049/jimmunol.1900556(IF:4.718)

[8] Huang L, Xiang M, Ye P, Zhou W, Chen M. Beta-catenin fremmer makrofag-medieret akut inflammatorisk respons efter myokardieinfarkt. Immunol Cell Biol. 2018;96(1):100-113. doi:10.1111/imcb.1019(IF:4.557)

[9] Wang X, Du A, Yu G, Deng Z, He X. Guanidin-N-methylering af BlsL er afhængig af acylering af beta-amin-arginin i biosyntesen af ​​Blasticidin S. Front Microbiol. 2017;8:1565. Udgivet 2017 22. august doi:10.3389/fmicb.2017.01565(IF:4.076)

[10] Yu P, Zhou L, Yang WT, et al. Sammenlignende mitogenomanalyser afdækker mitogenomegenskaber og fylogenetiske implikationer af underfamilien Cobitinae. BMC Genomics. 2021;22(1):50. Udgivet 2021 14. januar. doi:10.1186/s12864-020-07360-w(IF:3.969)

[11] Liu G, Liu Y, Niu B, et al. Genetisk mutation af TRPV2 inducerer angst ved at reducere GABA-B R2-ekspression i hippocampus. Biochem Biophys Res Commun. 2022;620:135-142. doi:10.1016/j.bbrc.2022.06.079(IF:3.575)

[12] Tan KS, Zhang Y, Liu L, et al. Molekylær kloning og karakterisering af et atypisk butyrylcholinesterase-lignende protein i zebrafisk. Comp Biochem Physiol B Biochem Mol Biol. 2021;255:110590. doi:10.1016/j.cbpb.2021.110590(IF:2.231)

Storage

This product should be stored at -25~-15℃ for 1 years.

FAQ

When dealing with fragments larger than 10 kb, it is advisable to combine 68℃ with 10 sec/kb to enhance the amplification success rate. For fragments smaller than 10 kb, an amplification speed of 5 sec/kb can be used.
(1) This 10166ES product can accommodate cDNA amplification ranging from 1 kb to 14 kb. If you need to perform long fragment amplification, it is recommended to use the validated 11149ES reverse transcription kit from Yeasen Biotechnology to reverse transcribe the target RNA. The resulting cDNA template can then be used in conjunction with 10166ES for long fragment amplification.
(2) If the RNA sample is small or if you need to obtain a very long target fragment, it is recommended not to perform digestion during reverse transcription. The longer the target fragment, the more RNA needs to be input, and accordingly, more cDNA will be required.
10166ES is a high-fidelity PCR product. High fidelity means a lower error rate and more accurate sequences. However, different experimental methods may result in variations. Product mutations are low-probability events. It is recommended to perform multiple repeated sets of new amplifications to obtain unmutated amplification products.
Yes, after testing, the 10166ES can cover fragments with GC content ranging from 20% to 80%. When expanding fragments with a high GC content, it is recommended to adjust the temperature to 68℃, which will significantly increase the success rate.
The 10166ES can tolerate a certain amount of bacterial solution. After testing, it has been found that this product can tolerate bacterial solution at a proportion of 12.5% in the reaction system, and it has good specificity. If you need to directly expand the bacterial solution, please keep the proportion below 12.5%.
The 10166ES product can tolerate a certain amount of cDNA stock solution, which contains residual RNA and degraded RNA. Therefore, cDNA containing uracil can be used as the template. However, there is a certain range. After product performance testing, 10166ES can meet the requirement of a cDNA input volume accounting for 15% of the reaction system.
(1) For plant genomes, after product performance testing, it can detect as low as 100pg of plant genome.
(2) For animal genomes, after product performance testing, the minimum detectable amount is 100pg of animal genome.
(3) For plasmids, since they are relatively pure, after product performance testing, the minimum detectable amount is 1pg of plasmid.
Possible causes and solutions:
(1)The thawing requirements for 10166ES stipulate that it should be thawed slowly on ice, and it cannot be thawed at room temperature or through heating.
(2) When performing the amplification process, it is recommended to set the temperature at 68℃ and the amplification speed at 10 seconds per kilobase.
(3) The longer the target fragment to be amplified is, the more template should be used.
(4) In the PCR system, the concentration of primers is too low or the number of cycles is insufficient: appropriately increase the amount of primers, or increase the number of amplification cycles;

Citations

Applications

Du kan også lide

Forespørgsel

FAQ

Produktet er kun til forskningsformål og er ikke beregnet til terapeutisk eller diagnostisk brug hos mennesker eller dyr. Produkter og indhold er beskyttet af patenter, varemærker og ophavsrettigheder ejet af Yeasen Biotechnology. Varemærkesymboler angiver oprindelseslandet, ikke nødvendigvis registrering i alle regioner.

Visse applikationer kan kræve yderligere tredjeparts intellektuelle ejendomsrettigheder.

Yeasen er dedikeret til etisk videnskab og mener, at vores forskning bør adressere kritiske spørgsmål og samtidig sikre sikkerhed og etiske standarder.