Hieff Trans™ Lipozomal Transfeksiyon Reaktifi SSS

(1) S: Nükleik asit transfeksiyon reaktif kompleksi hazırlanırken serum bulunabilir mi?

A: Serumun varlığı lipozomların oluşumunu etkileyecektir. Nükleik asit transfeksiyon reaktif kompleksleri hazırlanırken serumsuz ortam (genellikle MEM ortamı) kullanılması önerilir.

(2) S: Transfeksiyon reaktifi dondurulabilir mi?

C: Hayır. Bu reaktif 2-8 ℃'de saklanmalı ve kapağın uzun süre tekrar tekrar açılmasından kaçınılmalıdır, çünkü kapağın uzun süre açılması lipozom oksidasyonuna neden olacak ve transfeksiyon verimliliğini etkileyecektir.

(3) S: Hieff Trans™ Lipozom Nükleik Asit Transfeksiyon Reaktifini kullanırken nelere dikkat etmeliyim?

A: 1) Transfeksiyon işlemi sırasında hücre birleşmesinin %80-95'e ulaşması daha iyi olup, spesifik plaka yoğunluğu hücrelerin durumuna göre belirlenmektedir;

2) Yüksek saflıkta DNA kullanımı daha yüksek transfeksiyon veriminin elde edilmesine yardımcı olur;

3) Transfeksiyon kompleksleri hazırlanırken DNA ve transfeksiyon reaktiflerinin serumsuz besiyeri ile seyreltilmesi gerekmektedir;

4) Transfeksiyon sırasında ortama antibiyotik eklenemez;

5) Maksimum transfeksiyon verimliliğini elde etmek için ilk kullanımda DNA konsantrasyonu ve katyonik lipozom reaktifinin miktarı optimize edilmelidir. DNA'nın transfeksiyon reaktifine oranı Genellikle 1:2-1:3 olması önerilir.

(4) S: Transfeksiyondan sonra sonlandırılması gerekiyor mu?

A: Gerek yok. Lipozom kompleksleri 6 saat boyunca stabildir. Hücre ortamı transfeksiyondan önce değiştirilmezse, normal hücre büyümesi için gereken besinleri sağlamak için 4 ila 6 saat sonra yeni bir ortama geçmek gerekir. Ancak ortam transfeksiyondan önce değiştirilmişse, lipozom transfeksiyonundan sonra ortamı değiştirmek gerekli değildir.

(5) S: Transfeksiyon verimliliğini artırmak istiyorsam nelere dikkat etmeliyim?

A: a: Transfeksiyon sırasında hücre yoğunluğu %90-95’tir.

b: Transfeksiyon sırasında nükleik asit ve lipozom seyreltmeleri için MEM serumsuz besiyeri kullanın.

c: Transfeksiyondan 4-6 saat sonra ortam değiştirilebilir.

(6) S: DNA ve siRNA'nın eş-transfeksiyonu gerçekleştirilebilir mi? Etkisi nasıldır?

A: Eş-transfeksiyon yapılabilir, ancak ayrı transfeksiyon yapılması önerilir ve DNA transfeksiyonu siRNA'dan 6 saat sonra yapılmalıdır. Birlikte gerçekleştirilirse, siRNA transfeksiyon verimliliği daha kötü olacaktır.

(7) S: Transfeksiyon reaktifi lentiviral paketleme transfeksiyonu için kullanılabilir mi?

C: Lentiviral paketleme mümkündür, ancak lentiviral paketlemenin etkinliği transfeksiyonun etkinliğine bağlı olmayıp, paketleme plazmitlerinin seçimi ve plazmitler arasındaki orana da bağlıdır.

(8) S: Hieff Trans™ Lipozom Nükleik Asit Transfeksiyon Reaktifi süspansiyon hücrelerinin transfeksiyonunda kullanılabilir mi?

A: Hieff Trans™ Lipozom Nükleik Asit Transfeksiyon Reaktifi süspansiyon hücre transfeksiyonu için kullanılabilir, ayrıntılar için Protokol'e bakın. Ayrıca, süspansiyon hücreleri için özel bir transfeksiyon reaktifi de piyasaya sürdük (Kat No. 40805, Süspansiyon hücreleri için Lipozom nükleik asit transfeksiyon reaktifi).

[1] Liu R, Yang J, Yao J, Zhao Z, He W, Su N, Zhang Z, Zhang C, Zhang Z, Cai H, Zhu L, Zhao Y, Quan S, Chen X, Yang Y. Mühendislikle üretilmiş ışıkla değiştirilebilir RNA bağlayıcı proteinler kullanılarak RNA fonksiyonu ve metabolizmasının optogenetik kontrolü. Nat Biotechnol. 2022 Ocak 3. doi: 10.1038/s41587-021-01112-1. Baskıdan önce epub. PMID: 34980910. (IF:54.908)

[2] Zhou J, Chen P, Wang H, Liu H, Li Y, Zhang Y, Wu Y, Paek C, Sun Z, Lei J, Yin L. Sıkı PAM tanıma yoluyla daha düşük genom çapında hedef dışı etki için tasarlanmış Cas12a varyantları. Mol Ther. 2022 Ocak 5;30(1):244-255. doi: 10.1016/j.ymthe.2021.10.010. Epub 2021 Ekim 20. PMID: 34687846; PMCID: PMC8753454. (IF:11.454)

[3] Chen S, Cao X, Zhang J, Wu W, Zhang B, Zhao F. circVAMP3, c-Myc Translasyonunu Baskılayarak CAPRIN1 Faz Ayrımını Yönlendirir ve Hepatosit Karsinomasını Engeller. Adv Sci (Weinh).2022 Mar;9(8):e2103817. doi: 10.1002/advs.202103817. Epub 2022 Oca 24. PMID: 35072355; PMCID: PMC8922094. (IF:16.808)

[4] Zhang Y, Yu X, Sun R, Min J, Tang X, Lin Z, Xie S, Li X, Lu S, Tian Z, Gu C, Teng L, Yang Y. Ekleme faktörü arginin/serin açısından zengin 8, CACYBP'nin alternatif eklenmesi ve ekzosom tabanlı hücresel iletişim yoluyla multipl miyelom malignitesini ve kemik lezyonunu teşvik eder. Clin Transl Med. 2022 Şubat;12(2):e684. doi: 10.1002/ctm2.684. PMID: 35184390. (IF:11.492)

[5] Tang X, Deng Z, Ding P, Qiang W, Lu Y, Gao S, Hu Y, Yang Y, Du J, Gu C. circHNRNPU tarafından kodlanan yeni bir protein, kemik iliği mikro ortamını ve alternatif birleştirmeyi düzenleyerek multipl miyelomun ilerlemesini destekler. J Exp Clin Kanser Arş. 2022 Mart 8;41(1):85. doi: 10.1186/s13046-022-02276-7. PMID: 35260179. (IF:11.161)

[6] Hua Z, Wei R, Guo M, Lin Z, Yu X, Li X, Gu C, Yang Y. YTHDF2, STAT5A/MAP2K2/p-ERK ekseni aracılığıyla multipl miyelom hücre çoğalmasını teşvik eder. Onkogen. 2022 Mar;41(10):1482-1491. doi: 10.1038/s41388-022-02191-3. Epub 2022 Jan 24. PMID: 35075244. (IF:9.867)

[7] Liang Y, Lu Q, Li W, Zhang D, Zhang F, Zou Q, Chen L, Tong Y, Liu M, Wang S, Li W, Ren X, Xu P, Yang Z, Dong S, Zhang B, Huang Y, Li D, Wang H, Yu W. NamiRNA ağı aracılığıyla güçlendirici geçişiyle meme kanserinde tümör baskılayıcının yeniden aktifleştirilmesi. Nükleik Asitler Araştırması. 2021 Eylül 7;49(15):8556-8572. doi: 10.1093/nar/gkab626. PMID: 34329471; PMCID: PMC8421228. (EĞER:16.9)

[8] Dai L, Dai Y, Han J, Huang Y, Wang L, Huang J, Zhou Z. Hasarlı kromatine BRCA1-BARD1 kompleksinin katılımına ilişkin yapısal içgörü. Mol Cell. 2021 Temmuz 1;81(13):2765-2777.e6. doi: 10.1016/j.molcel.2021.05.010. Epub 2021 Haziran 7. PMID: 34102105. (IF:17.97)

[9] Zhang K, Wang A, Zhong K, Qi S, Wei C, Shu X, Tu WY, Xu W, Xia C, Xiao Y, Chen A, Bai L, Zhang J, Luo B, Wang W, Shen C. UBQLN2-HSP70 ekseni poli-Gli-Ala kümelerini azaltır ve C9ORF72 hayvan modelindeki davranışsal kusurları hafifletir. Nöron. 2021 Haziran 16;109(12):1949-1962.e6. doi: 10.1016/j.neuron.2021.04.023. Epub 2021 Mayıs 14. PMID: 33991504. (IF:17.17)

[10] Liang Y, Lu Q, Li W, Zhang D, Zhang F, Zou Q, Chen L, Tong Y, Liu M, Wang S, Li W, Ren X, Xu P, Yang Z, Dong S, Zhang B, Huang Y, Li D, Wang H, Yu W. NamiRNA ağı aracılığıyla güçlendirici geçişiyle meme kanserinde tümör baskılayıcının yeniden aktivasyonu. Nükleik Asitler Araştırması. 2021 Eylül 7;49(15):8556-8572. doi: 10.1093/nar/gkab626. PMID: 34329471; PMCID: PMC8421228. (IF:16.9)

[11] Li T, Chen X, Qian Y, Shao J, Li X, Liu S, Zhu L, Zhao Y, Ye H, Yang Y. Farelerde glikoz homeostazını sağlayan pulsatil transgen ekspresyonu için sentetik bir BRET tabanlı optogenetik cihaz. Nat Commun. 27 Ocak 2021;12(1):615. doi: 10.1038/s41467-021-20913-1. PMID: 33504786; PMCID: PMC7840992. (IF:14.92)

[12] Pan Y, He X, Li C, Li Y, Li W, Zhang H, Wang Y, Zhou G, Yang J, Li J, Qu J, Wang H, Gao Z, Shen Y, Li T, Hu H, Ma H. Nöronal aktivite, geç faz LTD'yi korumak için transkripsiyona bağlı otofajiyi yönlendirmek üzere CRTC1/CREB eksenini harekete geçirir. Cell Rep. 2021 Jul 20;36(3):109398. doi: 10.1016/j.celrep.2021.109398. PMID: 34289350. (IF:9.42)

[13] Liu H, Xing R, Ou Z, Zhao J, Hong G, Zhao TJ, Han Y, Chen Y. G-protein-bağlantılı reseptör GPR17, polikomb baskılayıcı kompleks 1 aracılı ROS üretimini artırarak glioma gelişimini engeller. Hücre Ölümü Çalışması 2021 Haziran 12;12(6):610. doi: 10.1038/s41419-021-03897-0. PMID: 34120140; PMCID: PMC8197764. (IF:8.463)

[14] Fan Y, Wang J, Jin W, Sun Y, Xu Y, Wang Y, Liang X, Su D. CircNR3C2, üçlü negatif meme kanserinde miR-513a-3p'yi süngerleştirerek HRD1 aracılı tümör baskılayıcı etkiyi teşvik eder. Mol Cancer. 2021 Şubat 2;20(1):25. doi: 10.1186/s12943-021-01321-x.PMID: 33530981; PMCID: PMC7851937. (IF:27.403)

[15] Gu C, Wang Y, Zhang L, Qiao L, Sun S, Shao M, Tang X, Ding P, Tang C, Cao Y, Zhou Y, Guo M, Wei R, Li N, Xiao Y, Duan J, Yang Y. AHSA1, multipl miyelomda hücresel proliferasyon ve proteazom inhibitör direnci için umut vadeden bir terapötik hedeftir. J Exp Clin Cancer Res. 2022 Ocak 6;41(1):11. doi: 10.1186/s13046-021-02220-1. PMID: 34991674; PMCID: PMC8734095. (IF:11.161)

[16] Luo Q, Wu X, Zhao P, Nan Y, Chang W, Zhu X, Su D, Liu Z. OTUD1, AIF Nükleer Translokasyonunu ve MCL1 Bozunmasını Destekleyerek Kaspaz Bağımsız ve Kaspaz Bağımlı Apoptozu Aktive Eder. Adv Sci (Weinh). 2021 Şubat 8;8(8):2002874. doi: 10.1002/advs.202002874. PMID: 33898171; PMCID: PMC8061361. (IF:15.84)

[17] Luo Q, Wu X, Nan Y, Chang W, Zhao P, Zhang Y, Su D, Liu Z. TRIM32/USP11, ARID1A Stabilitesini ve Skuamöz Hücreli Karsinomun Onkojenik/Tümör Baskılayıcı Durumunu Dengeler. Cell Rep. 2020 7 Ocak;30(1):98-111.e5. doi: 10.1016/j.celrep.2019.12.017. PMID: 31914402. (IF:9.42)

[18] Sun X, Peng X, Cao Y, Zhou Y, Sun Y. ADNP, Wnt/β-katenin sinyalini modüle ederek sinir farklılaşmasını destekler. Nat İletişim. 2020 Haziran 12;11(1):2984. doi: 10.1038/s41467-020-16799-0. PMID: 32533114; PMCID: PMC7293280. (EĞER:14.911)

[19] Yang X, Wang H, Xie E, Tang B, Mu Q, Song Z, Chen J, Wang F, Min J. ERBB3 ve ERK sinyallemesinin yeniden düzenlenmesi, ERBB3-E928G mutasyonu barındıran gastrointestinal kanserlerde FGFR1 inhibisyonuna karşı direnç sağlar. Protein Hücresi. 2020 Aralık;11(12):915-920. doi: 10.1007/s13238-020-00749-z. PMID: 32632529; PMCID: PMC7719122. (IF:14.872)

[20] Chen, T., Chen, Y., Chen, H. ve diğerleri. Düşük ifadeli mikroRNA'nın hücre içi görüntülenmesi için çift enzimle çalışan sınırsız DNA yürüyen nanomakine. Nano Res. 12, 1055–1060 (2019). https://doi.org/10.1007/s12274-019-2344-5 (EĞER:8.21)

[21] Zhang X, Qi Z, Yin H, Yang G. p53 ve Ras sinyalizasyonu arasındaki etkileşim, apoptozis ve otofaji üzerinde HDAC4 ve HIF-1α aracılı düzenleme yoluyla sisplatin direncini kontrol eder. Theranostics. 30 Ocak 2019; 9(4): 1096-1114. doi: 10.7150/thno.29673. PMID: 30867818; PMCID: PMC6401400. (IF: 8.12)

[22] Zou Y, Wang A, Shi M, Chen X, Liu R, Li T, Zhang C, Zhang Z, Zhu L, Ju Z, Loscalzo J, Yang Y, Zhao Y. Genetik olarak kodlanmış floresan sensörler kullanılarak canlı hücrelerde ve canlılarda redoks manzaralarının ve dinamiklerinin analizi. Nat Protoc. 2018 Ekim;13(10):2362-2386. doi: 10.1038/s41596-018-0042-5. PMID: 30258175; PMCID: PMC6714056. (IF:13.49)

[23] Zhang K, Zhao X, Chen X, Wei Y, Du W, Wang Y, Liu L, Zhao W, Han Z, Kong D, Zhao Q, Guo Z, Han Z, Liu N, Ma F, Li Z. Arka Bacak İskemisi Tedavisi için Enjekte Edilebilir Bir Hidrojel ile Mezenkimal Kök Hücre Türevi Ekzosomların Geliştirilmiş Terapötik Etkileri. ACS Appl Mater Arayüzleri. 2018 Eylül 12;10(36):30081-30091. doi: 10.1021/acsami.8b08449. Epub 2018 Ağustos 29. PMID: 30118197. (IF:8.09)

[24] Hao H, Hu S, Chen H, Bu D, Zhu L, Xu C, Chu F, Huo X, Tang Y, Sun X, Ding BS, Liu DP, Hu S, Wang M. Endotelyal CXCR7 Kaybı Miyokard Enfarktüsünden Sonra Vasküler Homeostazisi ve Kardiyak Yeniden Şekillenmeyi Bozar: Kardiyovasküler İlaç Keşfi İçin Sonuçlar. Circulation. 28 Mart 2017;135(13):1253-1264. doi: 10.1161/CIRCULATIONAHA.116.023027. Epub 2017 2 Şubat. PMID: 28154007. (IF:18.881)