Çift lusiferaz raportör gen test kiti _ 11402es
Yakınlaştırmak için görüntüyü yuvarlayın Yakınlaştırmak için resme tıklayın
Çift lusiferaz raportör gen test kiti _ 11402es
Çift lusiferaz raportör gen test kiti _ 11402es
Ateş böceği lüsiferaz, ATP, magnezyum iyonları ve oksijen varlığında lüsiferinin oksilüsiferine oksidasyonunu katalize edebilen yaklaşık 61 kDa moleküler ağırlığa sahip bir proteindir. Yaklaşık 560 nm dalga boyunda biyolüminesans yayar. Renilla lüsiferaz, oksijen varlığında koelenterazinin koelenteramide oksidasyonunu katalize edebilen yaklaşık 36 kDa moleküler ağırlığa sahip bir proteindir ve oksidasyon süreci sırasında 480 nm dalga boyunda yayar. biyolüminesans hakkında. Her iki biyolüminesans da kemilüminesans ile ölçülebilir. Algılama prensibi şekil 1'de gösterilmiştir: Şekil 1: Firefly ve Renilla lüsiferaz deneyi şeması Genellikle, hedef genin 5'UTR'si veya promotörü Firefly Luciferase'ın yukarı akışında klonlanır veya 3'UTR...

Frequently Bought Together

Çift lusiferaz raportör gen test kiti _ 11402es

YeasenSKU: 11402ES10
Boyut: 10 T
Fiyat:
$25.00
Stoklamak:
Stokta var

Ateş böceği lüsiferaz, ATP, magnezyum iyonları ve oksijen varlığında lüsiferinin oksilüsiferine oksidasyonunu katalize edebilen yaklaşık 61 kDa moleküler ağırlığa sahip bir proteindir. Yaklaşık 560 nm dalga boyunda biyolüminesans yayar. Renilla lüsiferaz, oksijen varlığında koelenterazinin koelenteramide oksidasyonunu katalize edebilen yaklaşık 36 kDa moleküler ağırlığa sahip bir proteindir ve oksidasyon süreci sırasında 480 nm dalga boyunda yayar. biyolüminesans hakkında. Her iki biyolüminesans da kemilüminesans ile ölçülebilir. Algılama prensibi şekil 1'de gösterilmiştir:

Şekil 1: Firefly ve Renilla lüsiferaz deneyi şeması

Genellikle, hedef genin 5'UTR'si veya promotörü Firefly Luciferase'ın yukarı akışında klonlanır veya 3'UTR Firefly Luciferase'ın aşağı akışında klonlanır ve promotörün veya düzenleyici elementin transkripsiyonel düzenleme etkisi firefly luciferase miktarının saptanmasıyla saptanır. Renilla Luciferase, hücre sayısı, transfeksiyon verimliliği vb.'deki farklılıkları ortadan kaldırmak için dahili kontrol olarak kullanıldı. Dual Luciferase Reporter Gen Assay Kit, firefly luciferase reporter geninin aktivitesini saptamak için substrat olarak luciferin kullanır ve ardından floresan reaksiyonunu söndürürken Renilla luciferine'i saptamak için substrat olarak koelenterazin kullanır. Enzim reporter gen aktivitesi. Kit, yüksek hassasiyet özelliklerine sahiptir.

Özellikler

Gelişmiş Lizis Yeteneği: Hücre tiplerinin büyük çoğunluğunu tamamen lize edebilme yeteneğine sahiptir.

Daha Güçlü Sinyal: Zayıf promotör ifadesinin hassas tespiti.

Yüksek Hassasiyet: Lüsiferaz moleküllerinin 10-20 pikomol seviyesine kadar tespit edilebilir.

Daha Geniş Doğrusal Aralık: Doğrusal tespit aralığı, enzim konsantrasyonunun 8 büyüklük sırasını aşar.

Uygulamalar

Hedef gen 3'UTR'leri ile miRNA etkileşimlerinin doğrulanması

LncRNA-miRNA etkileşimlerinin doğrulanması

Promoter bölgesinde transkripsiyon faktörü düzenlemesinin doğrulanması

Sinyal yolu analizi

SNP aktivite analizi

Özellikler

Biçim

sıvı

Lüsiferaz

Ateşböceği ve Renilla

Sinyal Yarı Ömrü

30 dk

Ürün Bileşenlerinin Sayısı

5

İş akışı

İki Step

Bileşenler

Bileşenler No.

İsim

11402ES60

11402ES80

11402-A

Hücre Lizatları

20 ml

10×20 mL

11402-B

Firefly Luciferase Tamponu

10 ml

10×10 mL

11402-C

Ateş böceği lüsiferaz substratı (50 ×)

200 μL

10×200 μL

11402-D

Renilla Luciferase Tamponu

10 ml

10×10 mL

11402-E

Renilla Luciferase substratı (50 ×)

200 μL

10×200 μL

Nakliye ve Depolama

Dual Luciferase Reporter Gen Testi Kiti ürünleri -15℃'de saklanmalıdır. ~ -25℃ için 1 yıl.

Rakamlar

Şekil 1. EVET (Kedi#: 11402) Brand P'ninkine benzer bir floresan yoğunluğuna sahiptir.

Figür2. SenKOLAYLAŞTIRMAK (Kedi#: 11402) tespit reaktifleri, optimum lüminesans yoğunluğuna ulaşmak için lüsiferaz ile etkileşime girer. Renilla lüsiferaz substratının eklenmesinden sonra, ateş böceği lüsiferazının biyolüminesansı söndürülür: esasen tamamen söndürülebilir.

Belgeler:

Güvenlik Bilgi Formu

11402 MSDS HB220209 TR.PDF

Kılavuzlar

11402 Kılavuz HB241230 TR.pdf

Alıntılar ve Referanslar:

[1] Wang H, Yang J, Cai Y, Zhao Y. Makrofajlar, IFN aracılı hücreler arası kendi kendini uyaran devre aracılığıyla fibroblastların kardiyak yeniden programlanmasını in vivo bastırır [yayınlanmış düzeltme Protein Cell'de yer almaktadır. 2024 Aralık 2;15(12):938. doi: 10.1093/procel/pwae038]. (EĞER=21.1)

[2] Zhao L, Zhu Y, Tao H, ve diğerleri. Ailanthone, JUN'a bağlı MEOX1 aktivasyonunu baskılayarak akciğer fibrozunu iyileştirir. Acta Pharm Sin B. 2024;14(8):3543-3560. doi:10.1016/j.apsb.2024.04.013(EĞER=14,5)

[3] Wu X, Chen S, Zhang Z, ve diğerleri. Viral küçük müdahaleci RNA-konak bitki mRNA yolu, otofajiyi artırarak virüs kaynaklı kuraklık toleransını düzenler. Bitki Hücresi. 2024;36(9):3219-3236. doi:10.1093/plcell/koae158(EĞER=12.6)

[4] Xuan H, Li Y, Liu Y, ve diğerleri. H1/H5 alanı, pirinç gelişimi sırasında OsTRBF2 faz ayrımına ve gen baskılanmasına katkıda bulunur. Bitki Hücresi. 2024;36(9):3787-3808. doi:10.1093/plcell/koae199(EĞER=12)

[5] Han Y, Hu Q, Gong N, ve diğerleri. MORE GRAINS 1'deki doğal değişim pirinçteki tane sayısını ve tane ağırlığını düzenler. J Integr Plant Biol. 2024;66(7):1440-1458. doi:10.1111/jipb.13674(EĞER=11.4)

[6] Pan M, Luo M, Liu L, ve diğerleri. EGR1, PFKL'yi transkripsiyonel olarak aşağı düzenleyerek HCC büyümesini ve aerobik glikolizi baskılar. J Exp Clin Cancer Res. 2024;43(1):35. 29 Ocak 2024'te yayımlandı. doi:10.1186/s13046-024-02957-5(EĞER=11.3)

[7] Hao X, Wang S, Fu Y ve diğerleri. WRKY46-MYC2 modülü, flavonoid birikimini teşvik ederek E-2-heksenal kaynaklı anti-otçul tepkilerinde kritik bir rol oynar. Plant Commun. 2024;5(2):100734. doi:10.1016/j.xplc.2023.100734(EĞER=10.5)

[8] Wu J, Li P, Li M, ve diğerleri. Isı stresi, domateste BR-SlCRCa kaskadını etkileyerek çiçek meristeminin sonlanmasını ve meyve gelişimini bozar. Plant Commun. 2024;5(4):100790. doi:10.1016/j.xplc.2023.100790(EĞER=10.5)

[9] Chen L, Xia S, Wang F, ve diğerleri. m6A metilasyon kaynaklı NR1D1 ablasyonu HSC sirkadiyen saatini bozar ve hepatik fibrozu teşvik eder. Pharmacol Res. 2023;189:106704. doi:10.1016/j.phrs.2023.106704(EĞER=10.33)

[10] Niu MX, Feng CH, He F, ve diğerleri. miR6445-NAC029 modülü, Populus'ta glutatyon S-transferaz U23 ve reaktif oksijen türlerinin süpürülmesini düzenleyerek kuraklık toleransını düzenler. New Phytol. 2024;242(5):2043-2058. doi:10.1111/nph.19703(EĞER=9.4)

[11]Huang T, You Q, Huang D, ve diğerleri.PDIA3P1 ve OCT4 arasındaki pozitif geri bildirim, özofageal skuamöz hücreli karsinomunun kanser kök hücre özelliklerini destekler. Hücre İletişim Sinyali. 2024;22(1):60. 22 Ocak 2024'te yayımlandı. doi:10.1186/s12964-024-01475-3(EĞER=8.4)

[12]Wang S, Liu Y, Hao X, Chen Y, Wang Z, Shen Y. Çöl çalılığında bitki defensinlerini artırma: AnWRKY29'un düzenleyici yolunu keşfetme. Int J Biol Macromol. 2024;270(Pt 1):132259. doi:10.1016/j.ijbiomac.2024.132259(EĞER=8.2)

Storage

The Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit products should be stored at -15℃ ~ -25℃ for 1 year.

FAQ

Yes, they can be stored at -80°C, similar to standard protein storage protocols. Lysed samples can be stored at -80°C for up to 6 months and at -20°C for up to 1 month.
Strict light protection is not required during operation. However, store them protected from light. Low temperature is a more critical storage condition—especially for coelenterazine (the Renilla substrate), which is recommended to be stored at -80°C.
The ratio should be adjusted according to specific experimental conditions. Pilot experiments are recommended—for instance, testing Renilla vector to Firefly vector ratios at 1:10, 1:20, 1:50, and 1:100.
They are assayed in the same well. There is no mutual interference because the Renilla luciferase substrate reagent contains a compound that quenches Firefly luminescence. While separate assays are possible, sequential measurement in a single well is standard.
Different microplate readers vary in sensitivity and parameter settings, which can lead to differences in background signal readings for the same sample.
Opaque white microplates.
Add 0.3 mL of Triton X-100 to 10 mL of PBS to prepare a 3% Triton X-100 solution.
Dilute the cell lysate sample 5-fold prior to testing.
1. Luciferase is expressed intracellularly and is a enzyme non-native to humans (yielding extremely low background). It cannot cross cell membranes. In contrast, luciferase substrates are hydrophobic, cyclic small molecules that penetrate cell membranes easily. Thus, any luciferase expression is exogenous, and adding substrate directly to culture media or injecting it in vivo yields detectable signals.
2. In vitro reporter assays require cell lysis to homogenize samples, overcoming transfection heterogeneity, uneven substrate permeability, and signal variation. In vitro reporter assays are highly quantitative and sensitive, requiring ATP and oxygen. Cell lysis fully releases expressed luciferase to optimize the reaction; since intracellular oxygen is limited, omitting lysis leads to signal reduction (some lysis buffers include optimized additives like ATP to boost signal). Therefore, cell lysis ensures superior signal in in vitro assays. 3. In vivo imaging instruments possess high sensitivity and power capable of penetrating skin and tissue, enabling strong signal detection without cell lysis.
No, the order cannot be adjusted. In this kit, Component B (Firefly Luciferase Buffer) is essential for detecting both Firefly and Renilla luciferases. The optimal reaction environment for Renilla luciferase requires the presence of Component B; otherwise, Renilla luciferase readings will be extremely low.

Citations

Documents

Manual
11402_Manual_HB260114_EN.pdf
MSDS
11402_MSDS_HB220209_EN.pdf

Applications

Ayrıca sevebilirsiniz

Sorgu

SSS

Ürün yalnızca araştırma amaçlıdır ve insanlarda veya hayvanlarda terapötik veya teşhis amaçlı kullanım için tasarlanmamıştır. Ürünler ve içerikler, Yeasen Biotechnology'nin sahip olduğu patentler, ticari markalar ve telif haklarıyla korunmaktadır. Ticari marka sembolleri, tüm bölgelerde tescilli olmayıp, menşe ülkesini gösterir.

Bazı uygulamalar üçüncü tarafların ek fikri mülkiyet haklarına ihtiyaç duyabilir.

Yeasen, araştırmalarımızın güvenlik ve etik standartları sağlarken kritik soruları ele alması gerektiğine inanarak etik bilime kendini adamıştır.