Bu ürün, Escherichia coli'deki rekombinant protein ekspresyonundan türetilen bir bakteriyofaj T7 RNA polimerazıdır. T7 promotör dizisinden (5'-TAATACGACTCACTATAG*-3') çift sarmallı DNA'daki RNA'nın 5'→3' sentezini katalize eder ve substrat olarak NTP'leri kullanır. Çift sarmallı doğrusal künt uçlu veya 5' çıkıntılı uçlu DNA, T7 RNA polimerazı için şablon olarak kullanılabilir, bu nedenle doğrusallaştırılmış plazmitler ve PCR ürünleri in vitro için şablon olarak kullanılabilir RNA sentezi.
Not: G* RNA transkriptinin ilk bazıdır.
Bu ürün GMP kurallarına uygun olarak üretilmiş olup sıvı formda sunulmaktadır.
Özellik
- Uzun transkriptleri ve kısa transkriptleri sentezleyin, 1 μg DNA şablonuyla 100-200 μg RNA üretilebilir
- Daha yüksek verim ve kullanımı kolay
- Alt endotoksinler
- Endonükleazların, ekzonükleazların, RNazların yokluğu test edildi
Başvuru
- Radyoaktif etiketli RNA probunun hazırlanması
- RNA yapısı, işlenmesi ve katalizinin incelenmesi için RNA üretimi
- Antisens RNA aracılığıyla ifade kontrolü
- mRNA, sgRNA sentezi
Şartname
| Kaynak | İfade edildiği gibi E. koli basili rekombinant T7 RNA Polimeraz geni ile |
| Optimum Sıcaklık | 37℃ |
| Depolama Arabellek | 50 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, 10 mM DTT, 100 mM NaCl, %0,1 Triton X-100, %50 (v/v) gliserin, pH7.9 25℃ |
| Birim Tanımı | 37°C ve pH 8,0'da 1 saat içinde asitte çözünmeyen çökeltiye 1 nmol [3H] GMP'yi dahil etmek için gereken enzim miktarı 1 birim olarak tanımlanmaktadır. |
Kalite
| COA Öğeleri | Standart |
| Etkinlik | 250-300U/μL |
| Protein konsantrasyon | ≥0,5 mg/mL |
| Saflık | ≥%95 |
| Endotoksin | <20 AB/mg |
| Kalıntı Proteaz | Negatif |
| Kalıntı Ekzonükleaz | Negatif |
| Kalan Nickase | Negatif |
| Kalan RNaz | Negatif |
| E. coli konak proteini | <50ppm |
| E.coli konakçısı DNA | <10 fg/U |
| Mikoplazma DNA | Negatif |
Bileşenler
| Bileşenler No. | İsim | 10625ES10 (10 KU) | 10625ES60 (100 KU) | 10625ES86 (2.500 KU) | 10625ES99 (100 MU) |
| 10625 | T7 RNA Polimeraz GMP sınıfı (250 U/μL) | 40 μL | 400 μL | 10 ml | 400 ml |
Nakliye ve Depolama
T7 RNA Polimeraz GMP sınıfı ürünler kuru buzla gönderilir ve -15℃ ~ -25℃'de bir yıl saklanabilir.
Rakamlar
Şekil 1. Standart RNA, T7 RNA sentez kiti kullanılarak in vitro sentezlendi.
Reaksiyon PCR cihazında 37℃'de 2 saat inkübe edildi ve ardından manyetik boncuklarla (Cat#12602) saflaştırıldı. Verim sonucu Şekil 1'de gösterildiği gibi NanoDrop spektrofotometresi ile analiz edildi.
Şekil 2. Elektroforetogramda (Şekil 2A), kapiler elektroforez diyagramında (Şekil 2B) ve kromatogramda (Şekil 2C) sırasıyla T7 kiti ile farklı uzunluklardaki RNA'nın transkripsiyon gösterimi
Şekil 3. İn vitro kapalı RNA sentezi.
Reaksiyon 2 saat boyunca 37℃'de PCR cihazında inkübe edildi ve ardından manyetik boncuklarla (Cat#12602) saflaştırıldı. Verim sonucu Şekil 3A'da gösterildiği gibi NanoDrop spektrofotometresi ile ölçüldü. Bütünlük sonucu Şekil 3B'de gösterildiği gibi kapiler elektroforez ile analiz edildi.
10625_Manual_HB221111_TR.pdf
Alıntılar ve Referanslar:
Storage
FAQ
1)ptimizing the sequence immediately upstream of the template's 3' end;
2)Controlling the IVT yield, as excessively high transcription levels tend to increase the frequency of self-extension events.
Citations
Documents
Ayrıca sevebilirsiniz
Sorgu
SSS
Ürün yalnızca araştırma amaçlıdır ve insanlarda veya hayvanlarda terapötik veya teşhis amaçlı kullanım için tasarlanmamıştır. Ürünler ve içerikler, Yeasen Biotechnology'nin sahip olduğu patentler, ticari markalar ve telif haklarıyla korunmaktadır. Ticari marka sembolleri, tüm bölgelerde tescilli olmayıp, menşe ülkesini gösterir.
Bazı uygulamalar üçüncü tarafların ek fikri mülkiyet haklarına ihtiyaç duyabilir.
Yeasen, araştırmalarımızın güvenlik ve etik standartları sağlarken kritik soruları ele alması gerektiğine inanarak etik bilime kendini adamıştır.