2 × Hieff Canace ™ Advaneffast High -Fidelity PCR Master Mix (Boya ile) -10164es

YeasenSKU: 10166ES01

Boyut: 250 uL
Fiyat:
Satış fiyatı$20.00
Stoklamak:
Stokta var


2× Hieff Canace™ AdvanceFast PCR Master Mix (Boya ile) Hieff Canace™ içeren kullanıma hazır 2× önceden karıştırılmış bir solüsyondur AdvanceFast Yüksek Sadakatli DNA Polimerazı, dNTP'ler ve önceden eklenmiş elektroforez göstergeleri içeren optimize edilmiş bir tampon sistemi. Ön karışım önceden eklenmiş elektroforez göstergesi içerir, PCR ürünleri doğrudan elektroforeze tabi tutulabilir, amplifikasyon ürünleri düz uçlardır. 2× Hieff Canace™ AdvanceFast PCR Master Mix (Boya ile) hızlı ve kolay, yüksek hassasiyet, yüksek özgüllük, iyi stabilite vb. avantajlara sahiptir, reaksiyon sistemi yalnızca primerler ve şablonlarla eklenebilir. Ek olarak, ürün ayrıca belirli bir koruyucu madde içerir, böylece ön karışım tekrarlanan dondurma ve çözme işlemlerinden sonra bile stabil aktivitesini koruyabilir.

Ultra yüksek doğruluk: Mutasyona yatkın olanlarda düşük uyumsuzluk oranı yüksek GC geni;
Hızlı hız: Hız, şu kadar hızlıdır: 5 sn/kb;
Geniş uygulanabilirlik: %20-80 GC içerikli genleri çoğaltmak için kullanılabilir ve %20 kan ve fare lizatlarına toleranslıdır;
İyi stabilite: 37°C'de 7 gün boyunca saklandığında performansı etkilenmez;
Kolay kullanım: Sadece amplifikasyon için primerler ve şablonlar ekleniyor, direkt elektroforez için mavi yükleme boyası kullanılıyor.

Özellikler

Kat.No. 10164ES01 10164ES03 10164ES08
Boyut 250 μL 1 ml 5×1 mL

Rakamlar

Şekil: Hieff Canace™ AdvanceFast Yüksek Sadakatli DNA Polimerazı, diğer markaların ürünlerine kıyasla yüksek sadakate sahiptir (A). Deneme, farklı türlerin genomlarından çoğaltılan 6 GC açısından zengin (yaklaşık %80) segmentin PCR ürünlerinin mutasyon sıklığının incelenmesiyle yapıldı. Hieff Canace™ AdvanceFast Yüksek Sadakatli DNA Polimerazı tarafından çoğaltılan PCR ürünleri vektörlere klonlandı ve her dizi için seçilen 100 tek klon Sanger dizilemesine tabi tutuldu.

Hieff Canace™ AdvanceFast Yüksek Sadakatli DNA Polimerazı yüksek amplifikasyon hızına (B), yüksek GC amplifikasyon uyumluluğuna (C) ve kan toleransına (D) sahiptir. Müşterilerimizin PCR ve dizileme sonuçları, Hieff Canace™ AdvanceFast Yüksek Doğruluklu DNA Polimerazının PCR verimi ve özgüllüğü (EH) açısından iyi bir performansa sahip olduğunu göstermektedir.

Depolamak

Bu ürün -25~-15℃'de 1 yıl süreyle saklanmalıdır.

Talimatlar

  1. Önerilen PCR reaksiyon sistemleri.

Bileşenler

Hacim (μL)

Son konsantrasyon

2× Hieff Canace™ AdvanceFast PCR Master Mix (Boya ile)*

25

1×

Şablon**

X

-

İleri Astar (10 μmol/L)***

2

0,4 μmol/L

Tersi Astar (10 μmol/L)

2

0.4 μmol/L

gdH2O

50'ye kadar

-

Tablo 1 PCR reaksiyon sistemi

*2 mM Mg2+ ve 200 μM dNTP içeren 1× premikslerde.

**Önerilen aralık 10-200 ng, cDNA örneği yükleme hacmi aralığı reaksiyon sisteminin 1/10'undan fazla olmamalıdır, önerilen 1-2,5 μL'dir.

***PCR reaksiyon sisteminde son primer konsantrasyonu 0,2-1 μM arasında değişmekte olup, 0,4 μM önerilmektedir.

  1. Tepki programı.

Döngü adım

Sıcaklık.

Zaman

Döngüler

İlk denatürasyon

98℃

30 saniye

1

Denatürasyon

98℃

10 saniye

30-35

Tavlama*

60℃

5 saniye

Eklenti**

72℃

5-10 sn/kb

Son eklenti

72℃

2 dk

1

Tablo 2 PCR reaksiyon programı

*Önerilen sıcaklık: 60°C, primer tavlama için optimum sıcaklığı bulmak için bir sıcaklık gradyanı ayarlanabilir. Önerilen tavlama süresi 5 saniyeye ayarlanır ve 5-30 saniye arasında ayarlanabilir. Çok uzun tavlama süresi jelde difüz amplifikasyon ürünlerine neden olabilir.

**Uzatma süresi: Tavsiye edilen 5 sn/kb'dir, ihtiyaç halinde 10 sn/kb'ye kadar uzatılabilir.

Notlar

  1. Bu ürün yalnızca araştırma amaçlıdır.
  2. Lütfen güvenliğiniz için laboratuvar önlüğü ve tek kullanımlık eldivenlerle çalışın.

Belgeler:

Kılavuzlar

Alıntılar ve Referanslar:

[1] Dong W, Zhu Y, Chang H, ve diğerleri. Bir SHR-SCR modülü, nodülasyona olanak sağlamak için baklagil korteks hücresi kaderini belirler. Doğa. 2021;589(7843):586-590. doi:10.1038/s41586-020-3016-z(EĞER:42.779)

[2] Sun L, Yan Y, Lv H, ve diğerleri. Rapamisin STAT3'ü hedef alır ve tümör büyümesini baskılamak için c-Myc'yi etkiler. Cell Chem Biol. 2022;29(3):373-385.e6. doi:10.1016/j.chembiol.2021.10.006(EĞER:8.116)

[3] Ye M, Xiong L, Dong Y, ve diğerleri. Bacillus thuringiensis Toksin Toleransı için Kozmopolit Bir Zararlıda Metiyonin Aminopeptidaz Geni PxMetAP1'in Potansiyel Rolü. Int J Mol Sci. 2022;23(21):13005. 27 Ekim 2022'de yayınlandı. doi:10.3390/ijms232113005(EĞER:6.208)

[4] He Y, Zhou J, Fu R, ve diğerleri. Narenciye ile ilişkili Alternaria genlerinin kolorimetrik tespitinde DNA-HRP işlevselleştirilmiş AuNP problarının uygulanması. Talanta. 2022;237:122917. doi:10.1016/j.talanta.2021.122917(EĞER:6.057)

[5] Guo L, Yang W, Huang Q, ve diğerleri. Selenosistein-Spesifik Kütle Spektrometrisi Dokuya Özgü Selenoproteomları ve Aday Selenoproteinleri Ortaya Çıkarıyor. Cell Chem Biol. 2018;25(11):1380-1388.e4. doi:10.1016/j.chembiol.2018.08.006(EĞER:5.592)

[6] Dou W, Zhu Q, Zhang M, Jia Z, Guan W. Pichia pastoris'teki güçlü endojen destekleyicilerin taranması ve değerlendirilmesi. Mikrob Hücre Gerçeği. 2021;20(1):156. 9 Ağustos 2021'de yayınlandı. doi:10.1186/s12934-021-01648-6(EĞER:5.328)

[7] Xiong Y, Yi Y, Wang Y, Yang N, Rudd CE, Liu H. Ubc9, T Hücrelerinde NFAT Transkripsiyonu için TCR Adaptörü SLP-76 ile Etkileşime Girer ve SUMOilleştirir. J Immunol. 2019;203(11):3023-3036. doi:10.4049/jimmunol.1900556(EĞER:4.718)

[8] Huang L, Xiang M, Ye P, Zhou W, Chen M. Beta-katenin, miyokard enfarktüsünden sonra makrofaj aracılı akut inflamatuar yanıtı teşvik eder. Immunol Cell Biol. 2018;96(1):100-113. doi:10.1111/imcb.1019(EĞER:4.557)

[9] Wang X, Du A, Yu G, Deng Z, He X. BlsL Tarafından Guanidin N-metilasyonu Blasticidin S Biyosentezinde Beta-amin Argininin Asilasyonu'na Bağımlıdır. Front Microbiol. 2017;8:1565. 22 Ağustos 2017'de yayınlandı. doi:10.3389/fmicb.2017.01565(EĞER:4.076)

[10] Yu P, Zhou L, Yang WT, ve diğerleri. Karşılaştırmalı mitogenom analizleri, Cobitinae alt ailesinin mitogenom özelliklerini ve filogenetik çıkarımlarını ortaya çıkarır. BMC Genomics. 2021;22(1):50. 14 Ocak 2021'de yayımlandı. doi:10.1186/s12864-020-07360-w(EĞER:3.969)

[11] Liu G, Liu Y, Niu B, ve diğerleri. TRPV2'nin genetik mutasyonu, hipokampüste GABA-B R2 ekspresyonunu azaltarak kaygıya neden olur. Biochem Biophys Res Commun. 2022;620:135-142. doi:10.1016/j.bbrc.2022.06.079(EĞER:3.575)

[12] Tan KS, Zhang Y, Liu L, ve diğerleri. Zebrafish'te atipik bir bütirilkolinesteraz benzeri proteinin moleküler klonlanması ve karakterizasyonu. Comp Biochem Physiol B Biochem Mol Biol. 2021;255:110590. doi:10.1016/j.cbpb.2021.110590(EĞER:2.231)

Storage

This product should be stored at -25~-15℃ for 1 years.

FAQ

When dealing with fragments larger than 10 kb, it is advisable to combine 68℃ with 10 sec/kb to enhance the amplification success rate. For fragments smaller than 10 kb, an amplification speed of 5 sec/kb can be used.
(1) This 10166ES product can accommodate cDNA amplification ranging from 1 kb to 14 kb. If you need to perform long fragment amplification, it is recommended to use the validated 11149ES reverse transcription kit from Yeasen Biotechnology to reverse transcribe the target RNA. The resulting cDNA template can then be used in conjunction with 10166ES for long fragment amplification.
(2) If the RNA sample is small or if you need to obtain a very long target fragment, it is recommended not to perform digestion during reverse transcription. The longer the target fragment, the more RNA needs to be input, and accordingly, more cDNA will be required.
10166ES is a high-fidelity PCR product. High fidelity means a lower error rate and more accurate sequences. However, different experimental methods may result in variations. Product mutations are low-probability events. It is recommended to perform multiple repeated sets of new amplifications to obtain unmutated amplification products.
Yes, after testing, the 10166ES can cover fragments with GC content ranging from 20% to 80%. When expanding fragments with a high GC content, it is recommended to adjust the temperature to 68℃, which will significantly increase the success rate.
The 10166ES can tolerate a certain amount of bacterial solution. After testing, it has been found that this product can tolerate bacterial solution at a proportion of 12.5% in the reaction system, and it has good specificity. If you need to directly expand the bacterial solution, please keep the proportion below 12.5%.
The 10166ES product can tolerate a certain amount of cDNA stock solution, which contains residual RNA and degraded RNA. Therefore, cDNA containing uracil can be used as the template. However, there is a certain range. After product performance testing, 10166ES can meet the requirement of a cDNA input volume accounting for 15% of the reaction system.
(1) For plant genomes, after product performance testing, it can detect as low as 100pg of plant genome.
(2) For animal genomes, after product performance testing, the minimum detectable amount is 100pg of animal genome.
(3) For plasmids, since they are relatively pure, after product performance testing, the minimum detectable amount is 1pg of plasmid.
Possible causes and solutions:
(1)The thawing requirements for 10166ES stipulate that it should be thawed slowly on ice, and it cannot be thawed at room temperature or through heating.
(2) When performing the amplification process, it is recommended to set the temperature at 68℃ and the amplification speed at 10 seconds per kilobase.
(3) The longer the target fragment to be amplified is, the more template should be used.
(4) In the PCR system, the concentration of primers is too low or the number of cycles is insufficient: appropriately increase the amount of primers, or increase the number of amplification cycles;

Citations

Applications

Ayrıca sevebilirsiniz

Sorgu

SSS

Ürün yalnızca araştırma amaçlıdır ve insanlarda veya hayvanlarda terapötik veya teşhis amaçlı kullanım için tasarlanmamıştır. Ürünler ve içerikler, Yeasen Biotechnology'nin sahip olduğu patentler, ticari markalar ve telif haklarıyla korunmaktadır. Ticari marka sembolleri, tüm bölgelerde tescilli olmayıp, menşe ülkesini gösterir.

Bazı uygulamalar üçüncü tarafların ek fikri mülkiyet haklarına ihtiyaç duyabilir.

Yeasen, araştırmalarımızın güvenlik ve etik standartları sağlarken kritik soruları ele alması gerektiğine inanarak etik bilime kendini adamıştır.