İlaç geliştirme, etkinliği test etmek için hayvan modelleri gerektirir. 50 yılı aşkın geliştirme ve optimizasyonla, çeşitli hayvan modelleri arasında Dekstran Sülfat Sodyum Tuzu (DSS) ülseratif kolit (UC) modeli, inflamatuar bağırsak hastalığının (IBD) etiyolojisi ve patogenezini incelemek için yaygın olarak kullanılmaktadır.
Şekil 1. DSS ülseratif kolit modelinin gelişimi
1. UC modelinin özellikleri tarafından inşa edildi DSS
2. DSS UC Modelinin Avantajları
3. DSS UC model inşa örneği
4. Başarı değerlendirme kriterlerinin modellenmesi
5. Bu kaynağa bağlantılar
6. Yeasen DSS ile modelleme için başarılı bir vaka
7. SSS
8. Ürün siparişi
9. Reaktiflerimizle yayınlanan makaleler
10. Okumaya Bakın
1. UC modelinin özellikleri tarafından inşa edildi DSS
UC'nin birden fazla akut veya kronik semptomu tetiklenebilir, örneğin: Farklı DSS dozlarına bağlı olarak ishal, mukus benzeri dışkılama, dışkıda gizli kan, belirgin kanlı dışkılama, kilo kaybı, aktivitede azalma ve tüy renginde bozulmalar görüldü.
Tablo 1 DSS kolit modelinin histolojik özellikleri
| DSS kolit modeli kategorisi | akut kolit modeli | Kronik faz kolit modeli |
|---|---|---|
| Histolojik değişiklikler | Kolon hiperemisi, ödem, kısalma, kırılganlık, ağırlık-uzunluk oranında artış | Önemli ölçüde kısalmış kolon |
| Çeşitli derecelerde kolon ülserleri | Mukozal kalınlaşma, lenfadenopati | |
| Mukozal ödem, kadeh hücresi kaybı, kript şişmesi ve yıkımı | Goblet hücre kaybı, kript kaybı | |
| Mukoza ve submukozada farklı derecelerde inflamatuar hücre infiltrasyonu, epitel hücre hasarı | Az sayıda hayvanda adenomatöz polipler ve tümör benzeri değişiklikler |
2. DSS UC Modelinin Avantajları
👍 1. Protokollerin uygulanması kolaydır.
👍 2. DSS UC modeli, yüksek tekrarlanabilirlik özelliğiyle insan UC semptomlarına oldukça benzemektedir.
👍 3. DSS UC modeline özgü olan uygulanan DSS dozunun kontrol edilmesiyle çeşitli karakteristik semptomlar ortaya çıkarılabilir.
👍 4. DSS UC modeli, fare, sıçan, zebra balığı, domuz, meyve sineği vb. gibi yaygın olarak kullanılan çeşitli model hayvanlarla oluşturulabilir.
👍 5. IBD kaynaklı kolit ilişkili kanser (CAC) modeli, azoksimetan (AOM)'ın kombine kullanımıyla oluşturulabilir.
3. DSS UC model inşa örneği
3.1 Fare modeli(Detaylar için tıklayınız)
1) BALB/c fareleri, dişi, 6-8 hafta, 25 g;
2) %3 DSS içeren steril içme suyu ve 0,75 µg/L'lik filtre.22 μm membran;
3) DSS 7 gün süreyle uygulandı;
4) Kolon gibi iltihaplar HE boyama sonrası ödem ve konjesyon gözlendi.
Şekil 2 DSS akut kolit kesitlerinin HE boyama sonuçları [1]
3.2 Zebra balığı modeli(Detaylar için tıklayınız)
1) Zebra balığı embriyoları doğal yumurtlamadan elde edildi ve döllenmeden sonraki 1 güne kadar (dpf) 28,5℃ sıcaklıktaki bir inkübatörde devridaim suyunda (60 μg/mL hazır okyanus deniz tuzu) büyütüldü ve 1 dpf'ye kadar metilen mavisi ile desteklendi;
2) 1 dpf'den sonra, metilen mavisi içermeyen E3 embriyo kültür ortamını kullanarak 3 dpf'ye kadar kültürleyin;
3) E3 ortamı ile %10 DSS depolama solüsyonu hazırlayın;
4) DSS'yi kültür ortamıyla maksimum öldürücü olmayan doza kadar seyreltin (DSS konsantrasyon referansı: %0,5);
5) Zebrafish'lere 3 dpf'den 6 dpf'ye kadar %0,5'lik DSS uygulandı ve indeksler gözlendi.
Şekil 3 DSS, zebra balığı karaciğerinde inflamatuar bir yanıta neden olur [2]
3.3 Domuz modeli(Detaylar için tıklayınız)
1) Yorkshire domuz yavruları, yaşlarında 4-5 günler;
2) DSS dozu: 1,25 g/kg, 5 gün süreyle oral yoldan alınır;
3) D-mannitol tutulum oranında artış gözlendi.
Şekil 4 Domuz yavrularında DSS kaynaklı D-mannitol konsantrasyonu kontrol grubundakinden daha yüksekti [3]
3.4 Drosophila modeli(Detaylar için tıklayınız)
1) Drosophila, dişi, 5-10 günler;
2) Beslenme orta %3 DSS ve 25 μg/mL içeren %5 sakaroz çözeltisi ile hazırlandı bleomisin;
3) Drosophila, kültür şişesinin günlük olarak değiştirilmesiyle 29°C'de üç gün boyunca kültüre edildi;
4) DSS, ISC öncü hücrelerinin çoğalmasını indükledi ve drosophila üzerinde öldürücü etkiye sahipti.
Şekil 5 DSS, Drosophila'da ISC öncü hücrelerinin çoğalmasını sağlar [4].
3.5 Kolit ilişkili kanser(Detaylar için tıklayınız)
1)BALB/c fareleri, erkek, 7 haftalık;
2)1. günde fareleri tartın ve işaretleyin. Farelere intraperitoneal olarak 10 mg/kg AOM solüsyonu enjekte edin.
3) Fare kafeslerinin içme suyunu suyla doldurun. Fare başına günde 7-10 mL su hesaplayın. Bir hafta boyunca besleyin.
4) İçme suyunu bir hafta boyunca %2,5 DSS ile değiştirin;
5) İki hafta boyunca düzenli içme suyuyla besleyin;
6) 3-4. adımları 3 kez tekrarlayın.
![Fig.6 Schematic diagram of CAC induced by AOM/DSS [5] .](https://seas.ysbuy.com/file/32626/24d9-166605804688444368.jpg?imageView2/2/format/webp/q/100)
Şekil 6 AOM/DSS tarafından oluşturulan CAC'nin şematik diyagramı [5] .
4. Başarı değerlendirme kriterlerinin modellenmesi
4.1 Hastalık Aktivite İndeksi (DAI skoru)
Model, vücut ağırlığı, dışkı viskozitesi ve gizli kan gibi birden fazla parametre ile değerlendirildi ve bu parametreler aracılığıyla genel DAI oluşturuldu.
Tablo 2 DAI puanlama kuralları
| Gol | yüzde kilo kaybı | dışkı kıvamı | dışkıda gizli kan |
|---|---|---|---|
| 0 | 0 | Normal | Negatif |
| 1 | %1-5 | Yumuşak dışkı | Açık mavi |
| 2 | %5-10 | Mukuslu dışkı | Mavi |
| 3 | %10-20 | Gevşek dışkı | Koyu mavi |
| 4 | >%20 | \ | İğrenç kanlı dışkı |
4.2 Histolojik Değişim Puanı
Yukarıdaki göstergeler için puanlar, akut kolit modeli için lenf nodu oluşumu hariç histolojik değişikliklere dayanarak verildi. Kullanılan HE boyama reaktifi Cat#60524ES60'tır.
Tablo 3 Histolojik değişim skoru
| Ağrılı ülser |
Ülser (ler)
| Epichanges inflamatuar | Enflamatuar infiltrat |
Lenf düğümü(leri)
|
|---|---|---|---|---|
| 0 | 0 | Normal | Hiçbiri | hiçbiri |
| 1 | 1 | Kadeh hücresi kaybı | Perikript sızması | 1 |
| 2 | 2 | Kadeh hücresi kaybı | Kas mukozasının infiltrasyonu | 2 |
| 3 | 3 | Kripto silme | Muskularis mukozanın genel infiltrasyonu, mukozanın kalınlaşması | 3 |
| 4 | >3 | Geniş kript kaybı veya polipoid rejenerasyon | Submukoza invazyonu | > |
4.3 Kolon uzunluk
Kronik kolit modelinde kolon uzunluğunun kısalması belirgin bir fenotip iken, akut kolit modelinde benzer değişiklikler 8. günde tespit edilebilmektedir.
4.4 Özet
DSS UC hayvan modelinin uygun kontrolle kullanılması için ön deneyler önerilir. Grup başına 8-10 hayvan asgari gerekliliktir. DAI, ön çalışmadan elde edilen sonuçları değerlendirmek için kriterdir.
5. Bu kaynağa bağlantılar
[1]Xiaona Gao ve diğerleri. Beslenme Biyokimyası Dergisi 83 (2020) 108438.
[2]Jing Ma ve diğerleri. Su Ürünleri Yetiştiriciliği ve Balıkçılık (2021) 548–557.
[3]Connie J. Kim ve diğerleri. Beslenme Biyokimyası Dergisi 21 (2010) 468–475.
[4]Fangfang Ren,et al.PNAS.2010.107 (49) 21064-21069.
[5]Jia-Rong Huang ve diğerleri. Farmakolojide Sınırlar.2020.11:586885.
6. Yeasen DSS ile modelleme için başarılı bir vaka
Başarılı akut kolit modelleri Yeasen ile üretilir DSS (Kat#60316ES, MW: 36000~50000) Aşağıdaki tabloda gösterildiği gibi belirgin fenotip ile 7 gün içinde.
Tablo 4 DSS ile farklı enterit modellerinin oluşturulması
| Örnek | Modelleme örnekleri | Modelleme planı | Modelleme sonuçları | Değerlendirmeyi kullan |
|---|---|---|---|---|
| Akut kolit | BALB/c fareleri, dişi, 6-8 hafta, 25 g | 3%-5% DSS'yi 7 gün boyunca serbestçe içebilirsiniz | 5. gün ortaya çıktı, kolonun uzunluğu kısaldı, HE boyanması vardı ve iltihap belirgindi | Kalıplama hızı hızlıdır ve zaman kısadır. Akut kolit modelinin özelliklerine uygundur |
| C57BL/6 fareler, erkek, 8 hafta, 20 g | %3-%5 DSS gavajla, sürekli uygulama | 5. gün meydana gelir, kolon kısalması, kilo kaybı, dışkıda kan, ishal | Yüksek küf oranı ve kısa süre. Akut kolit modelinin özellikleriyle tutarlı | |
| Kronik kolit | C57BL/6 fare, erkek, 8 hafta, 22 g | Gavaj yoluyla %1-2 DSS, sürekli uygulama | 40. gün belirir, kolon kısalması, kilo kaybı, dışkıda kan, ishal | Yüksek kalıplama oranı. Kronik kolit modelinin özelliklerine uygun |
| Kolon kanseri | C57BL/6 fare, erkek, 8 hafta, 21 g | 1%-2% DSS 3 hafta boyunca 5 gün boyunca isteğe bağlı | 14 hafta kolon uzunluğunda kısalma, kilo kaybı, HE lekelenmesi ve belirgin iltihaplanma | Yüksek kalıplama oranı. Kolon kanseri model özelliklerine uygundur |
7. SSS
Akut DSS kolit modeli veya kronik DSS kolit modeli fark etmeksizin, enteritin şiddeti ve başarısı fare türlerine (farklı genetik geçmişlere), DSS konsantrasyonuna ve doz döngüsüne bağlıdır.
Tablo 5 DSS kolit modellemesinin yaygın sorunları
| Olası sorunlar | Olası sebep | Önerilen çözüm |
|---|---|---|
| Farelerde yüksek ölüm oranı | DSS konsantrasyonu çok yüksek | Uygulanan DSS konsantrasyonunu azaltın |
| Enterit belirtileri olmayan veya düşük düzeyde olan fareler | DSS konsantrasyonu çok düşük | DSS dozaj konsantrasyonunu artırın; döngü aralığını azaltın (10-14 gün) |
| Aynı fare grubunda enterit belirtileri büyük ölçüde farklılık gösterir | Şişe kapağı tıkalı | Fare içme şişesini her gün kontrol edin |
8. Ürün siparişi:
Çok satan bir ürünün fiyatının sadece 1/3'üne ihtiyacı vardır M* aynı verimlilikle, büyük bir stok bulunduruyoruz.
Tablo 6 Ürün Sırası
| Ürün Adı | Kedi NO. | Boyut |
| Kolit BakımıT.M. Dekstran Sülfat Sodyum Tuzu (DSS), Kolit Derecesi MW: 36000~50000 | 60316ES25 | 25 gr |
| 60316ES60 | 100 gr | |
| 60316ES76 | 500 gr | |
| 60316ES80 | 1 kilo |
9. Reaktiflerimizle yayınlanan makaleler:
2024
[1]Zhong D, Jin K, Wang R, ve diğerleri. Enflamatuar Bağırsak Hastalığı ve İlişkili Anksiyete ve Depresyon için Mikroalg Bazlı Hidrojel. Adv Mater. 2024 Ocak 26:e2312275. doi: 10.1002/adma.202312275. EĞER=29.4
[2] Zhang Evet, Sen S, Ben X, Wu J, Meng J, Gao J, Şao X, Şi S, Vang G, Qiu J, Zhang Z, Hua C, Zhang Z, Çen S, Zhang Ben, Zhu SJ. Dubosiella newyorkensis modüle eder bağışıklık hoşgörü içinde kolit aracılığıyla , L-lizin aktive edilmiş AhR-IDO1-Kyn yol. Nat Topluluk. 2024 Şubat 13;15(1):1333. yap: 10.1038/s41467-024-45636-x. EĞER= 16.6
2022
[1]Mengmeng Xu, Ying Kong, Nannan Chen, ve diğerleri. Aktif Ülseratif Kolitte Bağışıklık İlgili Gen İmzasının Belirlenmesi ve CeRNA Ağının Tahmini[J].Frontiers in Immunology.2022; 13: 855645. EĞER=7.561
[2]Lujuan Xing, Lijuan Fu, Songmin Cao ve diğerleri. LPS kaynaklı RA'da Sığır Kemiği Jelatininden Elde Edilen Peptitlerin Anti-inflamatuar EtkisiW264.7 Makrofaj Hücreleri ve Dekstran Sülfat Sodyum İndüklenmiş C57BL/6 Fareleri[J]. Besinler 2022, 14, 1479. EĞER=5.717
[3]Vang S, Huang J, Bronzlaşmak KS, ve diğerleri.İzosteviol Sodyum, Metabolik Profilleme, Makrofaj Polarizasyonu ve NF-B Yolunun Düzenlenmesi Yoluyla Dekstran Sodyum Sülfat Kaynaklı Kronik Koliti İyileştirir[J].Oksidatif Tıp ve Hücresel Uzun Ömür. 2022,4636618. EĞER=5.076
[4]YuangengLi, PingYu, WenwenFu ve diğerleri.Panax ginseng CA Meyer'den elde edilen polisakkaritler, farelerde JAK2/STAT1/NLPR3 inflamasom sinyal yolunu inhibe ederek DSS kaynaklı IBD'yi hafifletti[J].Journal of Functional Foods.2022, 105013. EĞER=4.451
[5]Lei-NingChen, TaoJing, Zi-BinLin ve diğerleri. Fare testisinin dekstran sülfat sodyum kaynaklı kolite karşı metabolik ve transkriptomik tepkileri[J].Üreme Toksikolojisi.2022, Sayfalar 35-42. EĞER=3.143
2021
[1]Li Zhao, Fei Wang, Zhengwei Cai ve diğerleri. Ülseratif kolit tedavisinde enjekte edilebilir mukoadezif hidrojel ile ilaç kullanım platformunun iyileştirilmesi[J]. kimya mühendisliği dergisi.424(2021)130464.EĞER=16.744
[2]Lingjun Tong, Haining Hao, Zhe Zhang ve diğerleri. Süt kaynaklı ekstraselüler veziküller, bağırsak bağışıklığını düzenleyerek ve bağırsak mikrobiyotasını yeniden şekillendirerek ülseratif koliti hafifletir[J].Theranostics.2021; 11(17): 8570-8586 EĞER=11.556
[3]Jingjing Gan, Yuxiao Liu, Lingyu Sun ve diğerleri. Mikroakışkanlardan oral yoldan uygulanan nükleotid taşıma parçacıkları, inflamatuar bağırsak hastalığının tedavisi için[J]. Applied Materials Today.2021 Aralık;25:101231. EĞER=10.041
[4]JialiDong, YuanLi,HuiwenXiao ve diğerleri.Oral mikrobiyota, fare modellerinde kolorektal kanser için radyoterapinin etkinliğini ve prognozunu etkiler[J].Hücre raporları.2021, 109886.IF=9.423
[5]Hao H, Zhang X, Çingene Ben, Liu Q, ve diğerleri.Lactobacillus plantarumEkstraselüler Veziküllerin Etkisi Farelerde Bağırsak Mikrobiyotası ve Ülseratif Kolit Üzerine S7[J].Frontiers in Immunology.2021.777147. EĞER=7.561
[6]Yaohua Fan, Yanqun Fan, Kunfeng Liu ve diğerleri.Yenilebilir Kuş Yuvası, Th17/Treg Hücre Dengesini Geri Kazandırarak C57BL/6J Farelerinde Dekstran Sülfat Sodyum Kaynaklı Ülseratif Koliti İyileştirir[J].Farmakolojideki Sınırlar.2021.632602. EĞER=7.561
2020
[1]Li, Y., Dong, J., Xiao, H., Zhang, S., Wang, B., Cui, M. ve Fan, S. Bağırsak komensal kaynaklı valerik asit radyasyon yaralanmalarına karşı koruma sağlar. Bağırsak Mikropları,.2020 .1–18.IF=10.245
[2]Jia-Rong Huang, Sheng-Te Wang, Meng-Ning Wei ve diğerleri. Piperlongumin Fare Kolitini ve Kolitle İlişkili Kolorektal Kanseri Hafifletir[J]. Farmakolojideki Sınırlar.2020.586885. EĞER=7.561
[3]Gao X, Fan W, Tan L, ve diğerleri. Soya izoflavonları, ERα/NLRP3 inflamazom yollarını hedef alarak deneysel koliti iyileştirir[J]. Beslenme Biyokimyası Dergisi, 2020, 83. EĞER=6.048
2020'den önce
[1] Oehlers SH, Flores MV, Hall CJ, Crosier KE, Crosier PS. Retinoik asit bağırsak mukus üretimini baskılar ve deneysel enterokolitleri şiddetlendirir. Dis Model Mech. 2012 Tem;5(4):457-67. EĞER=4.973
[2] Kim CJ, Kovacs-Nolan JA, Yang C, Archbold T, Fan MZ, Mine Y. l-Triptofan, dekstran sodyum sülfat (DSS) kaynaklı kolitin bir domuz modelinde terapötik işlev göstermektedir. J Nutr Biochem. 2010 Haziran;21(6):468-75. EĞER=6.048
[3] Karpowicz, P., Perez, J. ve Perrimon, N.,. Hippo tümör baskılayıcı yolu bağırsak kök hücre rejenerasyonunu düzenler. Geliştirme (Cambridge, İngiltere), 2010,137(24), s.4135–4145. EĞER=6.868
[4] Fan H, Chen W, Zhu J, ve diğerleri. Toosendanin, M1 makrofaj polarizasyonunu inhibe ederek ve NLRP3 inflamazomunu ve Nrf2/HO-1 sinyallemesini düzenleyerek dekstran sülfat sodyum kaynaklı koliti hafifletir[J]. Uluslararası immünofarmakoloji, 2019, 76: 105909. EĞER=3.943
Okumaya Bakın
Dekstran sodyum sülfat (DSS) kullanılarak Ülseratif Kolit Zebra Balığı Modellemesinin protokolü
Dekstran sodyum sülfat (DSS) kullanılarak Ülseratif Kolit Drosophila Modellemesinin protokolü
Dekstran sodyum sülfat (DSS) kullanılarak Ülseratif Kolit Domuz Yavrusu Modellemesinin protokolü