ชุด assay นักข่าว Dual Luciferase Gene Assay _ 11402ES

YeasenSKU: 11402ES10

ขนาด: 10 t
ราคา:
ราคาขาย$25.00
คลังสินค้า:
ในสต็อก

ลูซิเฟอเรสของหิ่งห้อยเป็นโปรตีนที่มีน้ำหนักโมเลกุลประมาณ 61 kDa ซึ่งสามารถเร่งปฏิกิริยาออกซิเดชันของลูซิเฟอรินเป็นออกซิลูซิเฟอรินในสภาวะที่มี ATP ไอออนแมกนีเซียมและออกซิเจน โปรตีนนี้ปล่อยแสงเรืองแสงที่มีความยาวคลื่นประมาณ 560 นาโนเมตร ลูซิเฟอเรสของเรนิลลาเป็นโปรตีนที่มีน้ำหนักโมเลกุลประมาณ 36 kDa ซึ่งสามารถเร่งปฏิกิริยาออกซิเดชันของโคเอนเทอราซีนเป็นโคเอนเทอราไมด์ในสภาวะที่มีออกซิเจน และปล่อยแสงเรืองแสงที่มีความยาวคลื่น 480 นาโนเมตรในระหว่างกระบวนการออกซิเดชัน เกี่ยวกับการเรืองแสง การเรืองแสงทั้งสองแบบสามารถวัดได้ด้วยการเรืองแสงทางเคมี หลักการตรวจจับแสดงไว้ในรูปที่ 1:

รูปที่ 1: แผนผังการทดสอบ Firefly และ Renilla luciferase

โดยทั่วไป 5'UTR หรือโปรโมเตอร์ของยีนเป้าหมายจะถูกโคลนขึ้นก่อน Firefly Luciferase หรือ 3'UTR จะถูกโคลนลงหลัง Firefly Luciferase และผลการควบคุมการถอดรหัสของโปรโมเตอร์หรือองค์ประกอบควบคุมจะถูกตรวจจับโดยการตรวจจับปริมาณของ Firefly Luciferase Renilla Luciferase ถูกใช้เป็นตัวควบคุมภายในเพื่อกำจัดความแตกต่างในจำนวนเซลล์ ประสิทธิภาพการถ่ายโอน ฯลฯ ชุดทดสอบยีนรายงาน Dual Luciferase ใช้ลูซิเฟอรินเป็นสารตั้งต้นเพื่อตรวจจับกิจกรรมของยีนรายงานของ Firefly Luciferase จากนั้นจึงใช้โคเอนเทอราซีนเป็นสารตั้งต้นเพื่อตรวจจับ Renilla Luciferin ในขณะที่ดับปฏิกิริยาการเรืองแสง กิจกรรมยีนรายงานเอนไซม์ ชุดทดสอบนี้มีคุณลักษณะของความไวสูง

คุณสมบัติ

ความสามารถในการสลายเซลล์ที่เพิ่มขึ้น: มีความสามารถในการสลายเซลล์ประเภทต่างๆ ได้เกือบทั้งหมด

สัญญาณที่แรงกว่า: การตรวจจับการแสดงออกของโปรโมเตอร์ที่อ่อนแออย่างแม่นยำ

ความไวที่สูงขึ้น: ตรวจจับโมเลกุลลูซิเฟอเรสได้ละเอียดถึง 10-20 พิโคโมล

ช่วงเชิงเส้นที่กว้างขึ้น: ช่วงการตรวจจับเชิงเส้นเกินกว่า 8 ลำดับความสำคัญของความเข้มข้นของเอนไซม์

แอปพลิเคชั่น

การตรวจสอบการโต้ตอบของ miRNA กับยีนเป้าหมาย 3'UTRs

การตรวจสอบปฏิสัมพันธ์ระหว่าง lncRNA และ miRNA

การตรวจสอบการควบคุมปัจจัยการถอดรหัสในบริเวณโปรโมเตอร์

การวิเคราะห์เส้นทางการส่งสัญญาณ

การวิเคราะห์กิจกรรม SNP

ข้อมูลจำเพาะ

รูปร่าง

ของเหลว

ลูซิเฟอเรส

หิ่งห้อยและเรนิลลา

สัญญาณครึ่งชีวิต

30 นาที

จำนวนส่วนประกอบของผลิตภัณฑ์

5

เวิร์กโฟลว์

สอง สเทป

ส่วนประกอบ

ส่วนประกอบ หมายเลข

ชื่อ

11402ES60

11402ES80

11402-ก

เซลล์ไลเสท

20 มล.

10×20 มล.

11402-ข

บัฟเฟอร์ไฟร์ฟลายลูซิเฟอเรส

10 มล.

10×10 มล.

11402-ค

สารตั้งต้นลูซิเฟอเรสของหิ่งห้อย (50 ×)

200 ไมโครลิตร

10×200 ไมโครลิตร

11402-ง

บัฟเฟอร์เรนิลลา ลูซิเฟอเรส

10 มล.

10×10 มล.

11402-อี

ซับสเตรตเรนิลลา ลูซิเฟอเรส (50 ×)

200 ไมโครลิตร

10×200 ไมโครลิตร

การขนส่งและการเก็บรักษา

ควรเก็บผลิตภัณฑ์ Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit ไว้ที่ -15℃ ~ -25℃ สำหรับ 1 ปี.

ตัวเลข

รูปที่ 1. Yeasen -แมว#: 11402) มีความเข้มของการเรืองแสงเทียบเท่ากับยี่ห้อ P.

รูป2- ย.อีเซน -แมว#:11402) สารเคมีตรวจจับจะทำปฏิกิริยากับลูซิเฟอเรสเพื่อให้ได้ความเข้มข้นของการเรืองแสงที่เหมาะสมที่สุด หลังจากเติมสารตั้งต้นลูซิเฟอเรสของเรนิลลาแล้ว การเรืองแสงของลูซิเฟอเรสของหิ่งห้อยก็จะถูกระงับลง ซึ่งสามารถระงับได้เกือบหมด

เอกสาร:

เอกสารข้อมูลความปลอดภัย

11402 MSDS HB220209 TH.PDF เอกสารความปลอดภัย

คู่มือการใช้งาน

11402 คู่มือ HB241230 EN.พีดีเอฟ

การอ้างอิง & เอกสารอ้างอิง:

[1] Wang H, Yang J, Cai Y, Zhao Y. Macrophages ยับยั้งการรีโปรแกรมของไฟโบรบลาสต์ในหัวใจในร่างกายผ่านวงจรกระตุ้นตนเองระหว่างเซลล์ที่ควบคุมโดย IFN [การแก้ไขที่เผยแพร่ปรากฏใน Protein Cell. 2024 ธันวาคม 2;15(12):938. doi: 10.1093/procel/pwae038] (ถ้า=21.1)

[2] Zhao L, Zhu Y, Tao H และคณะ Ailanthone บรรเทาอาการพังผืดในปอดโดยยับยั้งการทำงานของ MEOX1 ที่ขึ้นอยู่กับ JUN Acta Pharm Sin B. 2024;14(8):3543-3560 doi:10.1016/j.apsb.2024.04.013(ถ้า=14.5)

-3- Wu X, Chen S, Zhang Z และคณะ ทางเดิน mRNA ของไวรัสขนาดเล็กที่รบกวนการทำงานของ RNA-โฮสต์ในพืชปรับเปลี่ยนความทนต่อความแห้งแล้งที่เกิดจากไวรัสโดยเพิ่มการทำงานของออโตฟาจี Plant Cell. 2024;36(9):3219-3236 doi:10.1093/plcell/koae158(ถ้า=12.6)

-4- Xuan H, Li Y, Liu Y และคณะ โดเมน H1/H5 มีส่วนช่วยในการแยกเฟส OsTRBF2 และการยับยั้งยีนระหว่างการพัฒนาของข้าว Plant Cell. 2024;36(9):3787-3808 doi:10.1093/plcell/koae199(ถ้า=12)

-5- Han Y, Hu Q, Gong N และคณะ การเปลี่ยนแปลงตามธรรมชาติใน MORE GRAINS 1 ควบคุมจำนวนเมล็ดและน้ำหนักเมล็ดในข้าว J Integr Plant Biol. 2024;66(7):1440-1458 doi:10.1111/jipb.13674(ถ้า=11.4)

-6- Pan M, Luo M, Liu L และคณะ EGR1 ยับยั้งการเติบโตของ HCC และไกลโคไลซิสแบบใช้ออกซิเจนโดยการลดการแสดงออกของ PFKL J Exp Clin Cancer Res. 2024;43(1):35. เผยแพร่เมื่อวันที่ 29 มกราคม 2024 doi:10.1186/s13046-024-02957-5(ถ้า=11.3)

-7- Hao X, Wang S, Fu Y และคณะ โมดูล WRKY46-MYC2 มีบทบาทสำคัญในการตอบสนองต่อต้านสัตว์กินพืชที่เกิดจาก E-2-hexenal โดยส่งเสริมการสะสมฟลาโวนอยด์ Plant Commun. 2024;5(2):100734. doi:10.1016/j.xplc.2023.100734(ถ้า=10.5)

-8- Wu J, Li P, Li M และคณะ ความเครียดจากความร้อนทำให้การสิ้นสุดของเนื้อเยื่อเจริญและการพัฒนาของผลเสียหายโดยส่งผลต่อกระบวนการ BR-SlCRCa ในมะเขือเทศ Plant Commun. 2024;5(4):100790. doi:10.1016/j.xplc.2023.100790(ถ้า=10.5)

-9- Chen L, Xia S, Wang F และคณะ การทำลาย NR1D1 ที่เกิดจากเมทิลเลชัน m6A ทำลายนาฬิกาชีวภาพของ HSC และส่งเสริมให้เกิดพังผืดในตับ Pharmacol Res. 2023;189:106704 doi:10.1016/j.phrs.2023.106704(ถ้า=10.33)

-10- Niu MX, Feng CH, He F และคณะ โมดูล miR6445-NAC029 ควบคุมความทนต่อภาวะแล้งโดยควบคุมการแสดงออกของกลูตาไธโอน S-transferase U23 และการกำจัดอนุมูลอิสระออกซิเจนใน Populus New Phytol. 2024;242(5):2043-2058 doi:10.1111/nph.19703(ถ้า=9.4)

-11]Huang T, You Q, Huang D, และคณะการตอบรับเชิงบวกระหว่าง PDIA3P1 และ OCT4 ส่งเสริมคุณสมบัติของเซลล์ต้นกำเนิดมะเร็งของมะเร็งเซลล์สความัสของหลอดอาหาร Cell Commun Signal 2024;22(1):60 เผยแพร่เมื่อวันที่ 22 มกราคม 2024 doi:10.1186/s12964-024-01475-3(ถ้า=8.4)

-12]Wang S, Liu Y, Hao X, Chen Y, Wang Z, Shen Y. การเพิ่มดีเฟนซินของพืชในพุ่มไม้ทะเลทราย: การสำรวจเส้นทางการควบคุมของ AnWRKY29 Int J Biol Macromol. 2024;270(Pt 1):132259. doi:10.1016/j.ijbiomac.2024.132259(ถ้า=8.2)

Storage

The Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit products should be stored at -15℃ ~ -25℃ for 1 year.

FAQ

Yes, they can be stored at -80°C, similar to standard protein storage protocols. Lysed samples can be stored at -80°C for up to 6 months and at -20°C for up to 1 month.
Strict light protection is not required during operation. However, store them protected from light. Low temperature is a more critical storage condition—especially for coelenterazine (the Renilla substrate), which is recommended to be stored at -80°C.
The ratio should be adjusted according to specific experimental conditions. Pilot experiments are recommended—for instance, testing Renilla vector to Firefly vector ratios at 1:10, 1:20, 1:50, and 1:100.
They are assayed in the same well. There is no mutual interference because the Renilla luciferase substrate reagent contains a compound that quenches Firefly luminescence. While separate assays are possible, sequential measurement in a single well is standard.
Different microplate readers vary in sensitivity and parameter settings, which can lead to differences in background signal readings for the same sample.
Opaque white microplates.
Add 0.3 mL of Triton X-100 to 10 mL of PBS to prepare a 3% Triton X-100 solution.
Dilute the cell lysate sample 5-fold prior to testing.
1. Luciferase is expressed intracellularly and is a enzyme non-native to humans (yielding extremely low background). It cannot cross cell membranes. In contrast, luciferase substrates are hydrophobic, cyclic small molecules that penetrate cell membranes easily. Thus, any luciferase expression is exogenous, and adding substrate directly to culture media or injecting it in vivo yields detectable signals.
2. In vitro reporter assays require cell lysis to homogenize samples, overcoming transfection heterogeneity, uneven substrate permeability, and signal variation. In vitro reporter assays are highly quantitative and sensitive, requiring ATP and oxygen. Cell lysis fully releases expressed luciferase to optimize the reaction; since intracellular oxygen is limited, omitting lysis leads to signal reduction (some lysis buffers include optimized additives like ATP to boost signal). Therefore, cell lysis ensures superior signal in in vitro assays. 3. In vivo imaging instruments possess high sensitivity and power capable of penetrating skin and tissue, enabling strong signal detection without cell lysis.
No, the order cannot be adjusted. In this kit, Component B (Firefly Luciferase Buffer) is essential for detecting both Firefly and Renilla luciferases. The optimal reaction environment for Renilla luciferase requires the presence of Component B; otherwise, Renilla luciferase readings will be extremely low.

Citations

Applications

คุณอาจชอบ

การสอบถาม

คำถามที่พบบ่อย

ผลิตภัณฑ์นี้มีวัตถุประสงค์เพื่อการวิจัยเท่านั้น และไม่ได้มีวัตถุประสงค์เพื่อใช้ในการรักษาหรือวินิจฉัยโรคในมนุษย์หรือสัตว์ ผลิตภัณฑ์และเนื้อหาได้รับการคุ้มครองโดยสิทธิบัตร เครื่องหมายการค้า และลิขสิทธิ์ที่เป็นของ Yeasen เทคโนโลยีชีวภาพ สัญลักษณ์เครื่องหมายการค้าระบุประเทศต้นกำเนิด ไม่จำเป็นต้องจดทะเบียนในทุกภูมิภาค

แอปพลิเคชั่นบางตัวอาจต้องใช้สิทธิ์ในทรัพย์สินทางปัญญาของบุคคลที่สามเพิ่มเติม

Yeasen มุ่งมั่นเพื่อวิทยาศาสตร์ที่มีจริยธรรม โดยเชื่อว่าการวิจัยของเราควรจะตอบคำถามสำคัญในขณะเดียวกันก็ต้องรับประกันความปลอดภัยและมาตรฐานทางจริยธรรม