Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit _ 11402ES
Rulla över bilden för att zooma in Klicka på bilden för att zooma
Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit _ 11402ES
Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit _ 11402ES
Firefly luciferas är ett protein med en molekylvikt på cirka 61 kDa, som kan katalysera oxidationen av luciferin till oxyluciferin i närvaro av ATP, magnesiumjoner och syre. Den avger bioluminescens med en våglängd på cirka 560 nm. Renilla luciferas är ett protein med en molekylvikt på cirka 36 kDa, som kan katalysera oxidationen av coelenterazin till coelenteramid i närvaro av syre, och avger en våglängd på 480 nm under oxidationsprocessen. om bioluminescens. Båda bioluminescensen kan mätas genom kemiluminescens. Detektionsprincipen visas i figur 1: Figur 1: Firefly och Renilla luciferasanalys schematisk...

Frequently Bought Together

Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit _ 11402ES

YeasenSku: 11402ES10
Storlek: 10 T
Pris:
$25.00
Stock:
I lager

Firefly luciferas är ett protein med en molekylvikt på cirka 61 kDa, som kan katalysera oxidationen av luciferin till oxyluciferin i närvaro av ATP, magnesiumjoner och syre. Den avger bioluminescens med en våglängd på cirka 560 nm. Renilla luciferas är ett protein med en molekylvikt på cirka 36 kDa, som kan katalysera oxidationen av coelenterazin till coelenteramid i närvaro av syre, och avger en våglängd på 480 nm under oxidationsprocessen. om bioluminescens. Båda bioluminescensen kan mätas genom kemiluminescens. Detektionsprincipen visas i figur 1:

Figur 1: Firefly och Renilla luciferasanalys schematisk

Vanligtvis klonas 5'UTR eller promotor för målgenen uppströms Firefly Luciferase, eller 3'UTR klonas nedströms Firefly Luciferase, och den transkriptionella regleringseffekten av promotorn eller det regulatoriska elementet detekteras genom att detektera mängden eldflugeluciferas. Renilla Luciferase användes som en intern kontroll för att eliminera skillnader i cellantal, transfektionseffektivitet, etc. Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit använder luciferin som ett substrat för att detektera aktiviteten hos eldflugans luciferasreportergen, och använder sedan coelenterazin som ett substrat för att detektera Renilla luciferin under fluorescensreaktionen. Enzymreportergenaktivitet. Satsen har egenskaperna för hög känslighet.

Drag

Förbättrad lyseringsförmåga: Kan fullständigt lysera de allra flesta celltyper.

Starkare signal: Exakt detektering av svagt promotoruttryck.

Högre känslighet: Detekterbar ner till 10-20 pikomol av luciferasmolekyler.

Bredare linjärt område: Linjärt detektionsområde överstiger 8 storleksordningar av enzymkoncentration.

Ansökningar

Verifiering av miRNA-interaktioner med målgenens 3'UTRs

Verifiering av lncRNA-miRNA-interaktioner

Verifiering av transkriptionsfaktorreglering i promotorregionen

Analys av signalvägar

SNP-aktivitetsanalys

Specifikationer

Form

flytande

Luciferas

Firefly och Renilla

Signal halveringstid

30 min

Antal produktkomponenter

5

Arbetsflöde

Två Step

Komponenter

Komponentnr.

Namn

11402ES60

11402ES80

11402-A

Celllysater

20 ml

10×20 ml

11402-B

Firefly Luciferase buffert

10 ml

10×10 ml

11402-C

Firefly luciferassubstrat (50 ×)

200 μL

10×200 μL

11402-D

Renilla Luciferasbuffert

10 ml

10×10 ml

11402-E

Renilla Luciferase-substrat (50 ×)

200 μL

10×200 μL

Frakt och förvaring

Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit-produkter bör förvaras vid -15 ℃ ~ -25℃ för 1 år.

Siffror

Figur 1. YEASEN (Katt#: 11402) har en fluorescensintensitet som är jämförbar med den för Brand P.

Figur2. YLÄTTA (Katt#: 11402) detektionsreagenser interagerar med luciferas för att uppnå optimal luminescensintensitet. Efter tillsatsen av Renilla luciferassubstrat släcks bioluminescensen av eldflugeluciferas: den kan i huvudsak släckas fullständigt.

Dokument:

Säkerhetsdatablad

11402 MSDS HB220209 EN.PDF

Manualer

11402 Manual HB241230 SV.pdf

Citat och referenser:

[1] Wang H, Yang J, Cai Y, Zhao Y. Makrofager undertrycker hjärtomprogrammering av fibroblaster in vivo via IFN-medierad intercellulär självstimulerande krets [publicerad korrigering visas i Protein Cell. 2024 dec 2;15(12):938. doi: 10.1093/procel/pwae038]. (IF=21,1)

[2] Zhao L, Zhu Y, Tao H, et al. Ailanthone förbättrar lungfibros genom att undertrycka JUN-beroende MEOX1-aktivering. Acta Pharm Sin B. 2024;14(8):3543-3560. doi:10.1016/j.apsb.2024.04.013(OM=14,5)

[3] Wu X, Chen S, Zhang Z, et al. En viral liten interfererande RNA-värdväxt-mRNA-väg modulerar virusinducerad torktolerans genom att förstärka autofagi. Växtcell. 2024;36(9):3219-3236. doi:10.1093/plcell/koae158(OM=12,6)

[4] Xuan H, Li Y, Liu Y, et al. H1/H5-domänen bidrar till OsTRBF2 fasseparation och genrepression under risutveckling. Växtcell. 2024;36(9):3787-3808. doi:10.1093/plcell/koae199(OM=12)

[5] Han Y, Hu Q, Gong N, et al. Naturlig variation i MORE GRAINS 1 reglerar kornantal och kornvikt i ris. J Integr Plant Biol. 2024;66(7):1440-1458. doi:10.1111/jipb.13674(OM=11,4)

[6] Pan M, Luo M, Liu L, et al. EGR1 undertrycker HCC-tillväxt och aerob glykolys genom att transkriptionellt nedreglera PFKL. J Exp Clin Cancer Res. 2024;43(1):35. Publicerad 2024 29 januari. doi:10.1186/s13046-024-02957-5(OM=11,3)

[7] Hao X, Wang S, Fu Y, et al. WRKY46-MYC2-modulen spelar en avgörande roll i E-2-hexenal-inducerade anti-växtätare svar genom att främja flavonoidackumulering. Plant Commun. 2024;5(2):100734. doi:10.1016/j.xplc.2023.100734(OM=10,5)

[8] Wu J, Li P, Li M, et al. Värmestress försämrar blommoristemavslutning och fruktutveckling genom att påverka BR-SlCRCa-kaskaden i tomat. Plant Commun. 2024;5(4):100790. doi:10.1016/j.xplc.2023.100790(OM=10,5)

[9] Chen L, Xia S, Wang F, et al. m6A-metyleringsinducerad NR1D1-ablation stör HSC-dygnsklockan och främjar leverfibros. Pharmacol Res. 2023;189:106704. doi:10.1016/j.phrs.2023.106704(IF=10,33)

[10] Niu MX, Feng CH, He F, et al. miR6445-NAC029-modulen reglerar torktolerans genom att reglera uttrycket av glutation S-transferas U23 och reaktiva syrearter som avlägsnar i Populus. Ny Phytol. 2024;242(5):2043-2058. doi:10.1111/nph.19703(OM=9,4)

[11]Huang T, You Q, Huang D, et al.En positiv återkoppling mellan PDIA3P1 och OCT4 främjar cancerstamcellsegenskaperna hos esofagus skivepitelcancer. Cell Commun Signal. 2024;22(1):60. Publicerad 2024 22 januari. doi:10.1186/s12964-024-01475-3(OM=8,4)

[12]Wang S, Liu Y, Hao X, Chen Y, Wang Z, Shen Y. Förbättring av växtdefensiner i en ökenbuske: Utforskar en regulatorisk väg för AnWRKY29. Int J Biol Macromol. 2024;270(Pt 1):132259. doi:10.1016/j.ijbiomac.2024.132259(OM=8,2)

Storage

The Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit products should be stored at -15℃ ~ -25℃ for 1 year.

FAQ

Yes, they can be stored at -80°C, similar to standard protein storage protocols. Lysed samples can be stored at -80°C for up to 6 months and at -20°C for up to 1 month.
Strict light protection is not required during operation. However, store them protected from light. Low temperature is a more critical storage condition—especially for coelenterazine (the Renilla substrate), which is recommended to be stored at -80°C.
The ratio should be adjusted according to specific experimental conditions. Pilot experiments are recommended—for instance, testing Renilla vector to Firefly vector ratios at 1:10, 1:20, 1:50, and 1:100.
They are assayed in the same well. There is no mutual interference because the Renilla luciferase substrate reagent contains a compound that quenches Firefly luminescence. While separate assays are possible, sequential measurement in a single well is standard.
Different microplate readers vary in sensitivity and parameter settings, which can lead to differences in background signal readings for the same sample.
Opaque white microplates.
Add 0.3 mL of Triton X-100 to 10 mL of PBS to prepare a 3% Triton X-100 solution.
Dilute the cell lysate sample 5-fold prior to testing.
1. Luciferase is expressed intracellularly and is a enzyme non-native to humans (yielding extremely low background). It cannot cross cell membranes. In contrast, luciferase substrates are hydrophobic, cyclic small molecules that penetrate cell membranes easily. Thus, any luciferase expression is exogenous, and adding substrate directly to culture media or injecting it in vivo yields detectable signals.
2. In vitro reporter assays require cell lysis to homogenize samples, overcoming transfection heterogeneity, uneven substrate permeability, and signal variation. In vitro reporter assays are highly quantitative and sensitive, requiring ATP and oxygen. Cell lysis fully releases expressed luciferase to optimize the reaction; since intracellular oxygen is limited, omitting lysis leads to signal reduction (some lysis buffers include optimized additives like ATP to boost signal). Therefore, cell lysis ensures superior signal in in vitro assays. 3. In vivo imaging instruments possess high sensitivity and power capable of penetrating skin and tissue, enabling strong signal detection without cell lysis.
No, the order cannot be adjusted. In this kit, Component B (Firefly Luciferase Buffer) is essential for detecting both Firefly and Renilla luciferases. The optimal reaction environment for Renilla luciferase requires the presence of Component B; otherwise, Renilla luciferase readings will be extremely low.

Citations

Documents

Manual
11402_Manual_HB260114_EN.pdf
MSDS
11402_MSDS_HB220209_EN.pdf

Applications

Du kanske också gillar

Förfrågan

Vanliga frågor

Produkten är endast avsedd för forskningsändamål och är inte avsedd för terapeutisk eller diagnostisk användning hos människor eller djur. Produkter och innehåll skyddas av patent, varumärken och upphovsrätt som ägs av Yeasen Biotechnology. Varumärkessymboler anger ursprungsland, inte nödvändigtvis registrering i alla regioner.

Vissa applikationer kan kräva ytterligare immateriella rättigheter från tredje part.

Yeasen är dedikerad till etisk vetenskap, och anser att vår forskning bör behandla kritiska frågor samtidigt som den säkerställer säkerhet och etiska standarder.