Hifair ™ AdvanceFast 1st Strand Cdna Supermix для QPCR (GDNA Digester Plus) _ 11155es

YeasenSku: 11155ES10

Размер: 10 т
Цена:
Цена продажи$55.00
Запас:
В наличии

Хайфайр™ AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix для qPCR (gDNA digester plus) — это усовершенствованная версия Hifair™ Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix для qPCR (gDNA digester plus). По сравнению с предыдущим поколением Hifair™ Ⅲ Обратная транскриптаза, этот продукт демонстрирует повышенную толерантность к ингибиторам, более высокую скорость обратной транскрипции и более высокий выход кДНК, что делает его пригодным для реакций обратной транскрипции РНК животных, растений и микроорганизмов. Смесь gDNA Digester Mix -V2, входящая в этот продукт, была значительно улучшена в своей способности удалять остаточную ДНК, эффективно переваривая до 1000 нг ДНК, обеспечивая более надежные результаты за счет устранения загрязнения ДНК в матрицах РНК.

Хайфайр™ AdvanceFast SuperMix содержит все компоненты, необходимые для обратной транскрипции. Просто добавьте РНК-шаблон и свободный от РНКазы H2O для инициирования реакции, одновременно прекращая активность геномного ДНК-дигестера для обеспечения целостности кДНК.

Продукты обратной транскрипции подходят для qPCR на основе красителя и зонда. Однако они не рекомендуются для амплификации длинных фрагментов, например, для клонирования генов. Для таких приложений Hifair™ Набор для синтеза первой цепи ДНК AdvanceFast (кат. № 11150ES) рекомендуется для высокоэффективной обратной транскрипции.

Технические характеристики

Кат.№

11155ES10 / 11155ES60

Размер

10 т / 100 Т

Компоненты

Номер компонента

Имя

11155ES10

11155ES60

11155-А

Хайфайр™ AdvanceFast SuperMix

60 мкл

600 мкл

11155-Б

Смесь для переваривания ДНК -V2

20 мкл

200 μЛ

11155-С

Свободная от РНКазы H2О

200 мкл

2×1 мл

Хранилище

Этот продукт следует хранить при температуре от -25 до -15℃. 1 годы.

Инструкции

1. Когда требуется удаление ДНК

1) Расщепление ДНК

Приготовьте следующую смесь в микроцентрифужной пробирке, свободной от РНКазы, осторожно перемешайте пипеткой и инкубируйте при температуре 37℃ в течение 2 минут:

Компоненты

Объем(мкл)

Смесь для переваривания ДНК -V2

2

Общая РНК

10 пг–2 мкг*

или мРНК

10 пг–500 нг

Свободная от РНКазы H2О

До 14

*Рекомендуется использовать ≤ 2 мкг общей РНК. Если экспрессия целевого гена низкая, количество можно увеличить до 5 мкг общей РНК.

2) Настройка реакции обратной транскрипции (система объемом 20 мкл):

Компоненты

Объем(мкл)

Реакционная смесь из шага 1

14

Хайфайр™ AdvanceFast SuperMix

6

3) Программа реакции:

Температура

Время

50℃

5 мин.

85℃

5 сек.

2. Когда удаление ДНК Нет Необходимый

1) Настройка реакции обратной транскрипции (система объемом 20 мкл):

Компоненты

Объем(мкл)

Хайфайр™ AdvanceFast SuperMix

6

Общая РНК

10 пг–2 мкг*

или мРНК

10 пг–500 нг

Свободная от РНКазы H2О

До 20

*Рекомендуется использовать ≤ 2 мкг общей РНК. Если экспрессия целевого гена низкая, количество можно увеличить до 5 мкг общей РНК.

2) Программа реакции:

Температура

Время

50℃

5 мин.

85℃

5 сек.

Примечания

1. Данный продукт предназначен только для исследовательских целей.

2. Пожалуйста, работайте в лабораторных халатах и ​​одноразовых перчатках.,для вашей безопасности.

3. Для сохранения целостности образца все этапы пипетирования и смешивания выполняйте на льду.

4. Перед использованием осторожно переверните и центрифугируйте каждый компонент на низкой скорости, чтобы обеспечить надлежащее смешивание.

Документ:

Руководство

Storage

This product should be stored at -25~ -15℃ for 1 year.

FAQ

This product is subsequently used for qPCR of common RNA. Random primers N6 and Oligo dT have been added in a certain proportion in the reverse transcription premix, so no additional primers are required. If qPCR or long fragment PCR for special RNAs such as small RNAs or circular RNAs is to be conducted subsequently, it is recommended to use the separate primer reverse transcription kits 11139ES or 11149ES.
For molecular enzyme reagents, simply invert and mix them together, then perform a gentle centrifugation. It is not recommended to vigorously shake to mix them.
The 11155ES can accommodate RNA input ranging from 10 pg to 5 μg. However, an excessively high RNA input does not necessarily lead to a more forward Ct value. Additionally, an excessively high input of self-prepared RNA also brings about residual other components. These inhibitory components remaining in the reverse transcription product may inhibit the subsequent qPCR reaction, resulting in an increased Ct value, fluctuation of the curve, or precipitation of the product. Ultimately, it is necessary to dilute the cDNA for use to achieve the final result.
It is not recommended to use a longer reverse transcription time. Using a longer time may cause the Ct value to be delayed. It is recommended to follow the procedure suggested in the manual.
For the PCR instrument, proper settings should be made. It is recommended to set the temperature at 4℃ for an infinite duration (∞) after the reaction is completely terminated. This is to prevent the possibility of forgetting to remove the tube after the reaction is completed. The PCR hot lid, through heat conduction, keeps the product in a high-temperature heating state.
No need. The reverse transcription product is usually a mixture, besides the cDNA product, there are also residual RNA, proteins, salt ions, dNTPs, etc. Among them, dNTPs cause significant interference for the determination using a microplate spectrophotometer, and the final measured value obtained from the product determination is not the concentration of the product. The equal amount level has been controlled and added in the RNA section before reverse transcription.
The product has been tested and found to be stable for one week at room temperature without any adverse effects. Therefore, it can be used to complete the subsequent experiments.
After opening, ensure that the reagents have not been contaminated by the syringe tips. Then, they can be stored at 4℃. However, it is recommended to use them up within 2 weeks.
We recommend using products 11188–11190ES.

Citations

Вам также может понравиться

Расследование

Часто задаваемые вопросы

Продукт предназначен только для исследовательских целей и не предназначен для терапевтического или диагностического использования на людях или животных. Продукты и содержимое защищены патентами, товарными знаками и авторскими правами, принадлежащими Yeasen Biotechnology. Символы товарных знаков указывают на страну происхождения, а не обязательно на регистрацию во всех регионах.

Для некоторых приложений могут потребоваться дополнительные права интеллектуальной собственности третьих лиц.

Йесен привержен этической науке, полагая, что наши исследования должны затрагивать важнейшие вопросы, обеспечивая при этом безопасность и соблюдение этических стандартов.