HIFAIR ™ AdvanceFast 1st Strand cDNA -synthese Supermix voor qPCR (GDNA Digester Plus) _ 11155ES

YeasenSKU: 11155ES10

Maat: 10 t
Prijs:
Verkoopprijs$55.00
Voorraad:
Op voorraad

Hifair™ AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix voor qPCR (gDNA digester plus) is een verbeterde versie van Hifair™ Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix voor qPCR (gDNA digester plus). Vergeleken met de vorige generatie Hifair™ Ⅲ Reverse Transcriptase, dit product vertoont een verbeterde tolerantie voor remmers, snellere reverse transcriptiesnelheid en hogere cDNA-opbrengst, waardoor het geschikt is voor reverse transcriptiereacties van RNA van dieren, planten en micro-organismen. De gDNA Digester Mix -V2 in dit product is aanzienlijk verbeterd in zijn vermogen om resterend DNA te verwijderen, effectief tot 1000 ng DNA te verteren, wat zorgt voor betrouwbaardere resultaten door DNA-verontreiniging in RNA-sjablonen te elimineren.

Hifair™ AdvanceFast SuperMix bevat alle componenten die nodig zijn voor reverse transcriptie. Voeg eenvoudig RNA-template en RNase-vrije H toe2O om de reactie te starten en tegelijkertijd de activiteit van gDNA Digester te beëindigen om de cDNA-integriteit te waarborgen.

De reverse transcriptieproducten zijn geschikt voor dye-based en probe-based qPCR. Ze worden echter niet aanbevolen voor long-fragment amplificatie zoals genklonen. Voor dergelijke toepassingen is Hifair™ AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit (Cat.nr. 11150ES) wordt aanbevolen voor zeer efficiënte reverse transcriptie.

Specificaties

Cat.Nr.

11155ES10 / 11155ES60

Maat

10 ton / 100 T

Componenten

Componenten nr.

Naam

11155ES10

11155ES60

11155-A

Hifair™ AdvanceFast SuperMix

60 μL

600 μL

11155-B

gDNA-digestermix -V2

20 μL

200 μIk

11155-C

RNase-vrije H2O

200 μL

2×1 ml

Opslag

Dit product moet worden bewaard bij -25~-15℃ gedurende 1 jaren.

Instructies

1. Wanneer DNA-verwijdering vereist is

1) DNA-vertering

Bereid het volgende mengsel in een RNase-vrije microcentrifugebuis, meng voorzichtig door middel van pipetteren en incubeer gedurende 2 min bij 37℃:

Componenten

Volume(μL)

gDNA-digestermix -V2

2

Totaal RNA

10 pg–2 µg*

of mRNA

10 pg–500 ng

RNase-vrije H2O

Tot 14

*Het wordt aanbevolen om ≤ 2 µg Total RNA te gebruiken. Als de doelgenexpressie laag is, kan de hoeveelheid worden verhoogd tot 5 µg Total RNA.

2) Opzet van de omgekeerde transcriptiereactie (20 µL-systeem):

Componenten

Volume(μL)

Reactiemengsel van stap 1

14

Hifair™ AdvanceFast SuperMix

6

3) Reactieprogramma:

Temperatuur

Tijd

50℃

5 minuten

85℃

5 seconden

2. Wanneer DNA-verwijdering is Niet Vereist

1) Opzet van de omgekeerde transcriptiereactie (20 µL-systeem):

Componenten

Volume(μL)

Hifair™ AdvanceFast SuperMix

6

Totaal RNA

10 pg–2 µg*

of mRNA

10 pg–500 ng

RNase-vrije H2O

Tot 20

*Het wordt aanbevolen om ≤ 2 µg Total RNA te gebruiken. Als de doelgenexpressie laag is, kan de hoeveelheid worden verhoogd tot 5 µg Total RNA.

2) Reactieprogramma:

Temperatuur

Tijd

50℃

5 minuten

85℃

5 seconden

Notities

1. Dit product is uitsluitend bedoeld voor onderzoeksdoeleinden.

2. Werk alstublieft met labjassen en wegwerphandschoenen,voor uw veiligheid.

3. Voer alle pipetteer- en mengstappen uit op ijs om de integriteit van het monster te behouden.

4. Keer elk onderdeel voorzichtig om en centrifugeer het op lage snelheid voordat u het gebruikt, zodat alles goed gemengd wordt.

Document:

Handmatig

Storage

This product should be stored at -25~ -15℃ for 1 year.

FAQ

This product is subsequently used for qPCR of common RNA. Random primers N6 and Oligo dT have been added in a certain proportion in the reverse transcription premix, so no additional primers are required. If qPCR or long fragment PCR for special RNAs such as small RNAs or circular RNAs is to be conducted subsequently, it is recommended to use the separate primer reverse transcription kits 11139ES or 11149ES.
For molecular enzyme reagents, simply invert and mix them together, then perform a gentle centrifugation. It is not recommended to vigorously shake to mix them.
The 11155ES can accommodate RNA input ranging from 10 pg to 5 μg. However, an excessively high RNA input does not necessarily lead to a more forward Ct value. Additionally, an excessively high input of self-prepared RNA also brings about residual other components. These inhibitory components remaining in the reverse transcription product may inhibit the subsequent qPCR reaction, resulting in an increased Ct value, fluctuation of the curve, or precipitation of the product. Ultimately, it is necessary to dilute the cDNA for use to achieve the final result.
It is not recommended to use a longer reverse transcription time. Using a longer time may cause the Ct value to be delayed. It is recommended to follow the procedure suggested in the manual.
For the PCR instrument, proper settings should be made. It is recommended to set the temperature at 4℃ for an infinite duration (∞) after the reaction is completely terminated. This is to prevent the possibility of forgetting to remove the tube after the reaction is completed. The PCR hot lid, through heat conduction, keeps the product in a high-temperature heating state.
No need. The reverse transcription product is usually a mixture, besides the cDNA product, there are also residual RNA, proteins, salt ions, dNTPs, etc. Among them, dNTPs cause significant interference for the determination using a microplate spectrophotometer, and the final measured value obtained from the product determination is not the concentration of the product. The equal amount level has been controlled and added in the RNA section before reverse transcription.
The product has been tested and found to be stable for one week at room temperature without any adverse effects. Therefore, it can be used to complete the subsequent experiments.
After opening, ensure that the reagents have not been contaminated by the syringe tips. Then, they can be stored at 4℃. However, it is recommended to use them up within 2 weeks.
We recommend using products 11188–11190ES.

Citations

Misschien vind je het ook leuk

Navraag

FAQ

Het product is alleen bedoeld voor onderzoeksdoeleinden en is niet bedoeld voor therapeutisch of diagnostisch gebruik bij mensen of dieren. Producten en inhoud worden beschermd door patenten, handelsmerken en auteursrechten die eigendom zijn van Yeasen Biotechnologie. Handelsmerksymbolen geven het land van herkomst aan, niet noodzakelijkerwijs registratie in alle regio's.

Voor bepaalde toepassingen zijn mogelijk aanvullende intellectuele eigendomsrechten van derden vereist.

Yeasen is toegewijd aan ethische wetenschap en is van mening dat ons onderzoek kritische vragen moet beantwoorden en tegelijkertijd de veiligheid en ethische normen moet waarborgen.