설명
Hieff NGS ™ OnePot Pro DNA 라이브러리 준비 키트 V4는 Illumina ™ 및 MGI ™ 차세대 시퀀싱(NGS) 플랫폼과 호환되도록 설계된 고급 효소 DNA 라이브러리 준비 키트입니다. 고효율 효소 단편화를 활용하여 초음파 처리와 같은 기존의 기계적 전단 방법을 사용하지 않고도 작업 흐름을 간소화하고 작업 시간을 최소화할 수 있습니다.
이 키트는 DNA 단편화와 말단 복구를 단일 단계 반응으로 통합하여 전체 라이브러리 준비 시간과 비용을 크게 절감합니다. 식물 유전체, 동물 유전체, 미생물 유전체 등 다양한 샘플 유형에 적합하며, 1ng에서 1μg까지 유연한 DNA 입력 범위를 제공합니다.
최적화된 효소 단편화는 다양한 종에 걸쳐 일관되고 균일한 라이브러리 단편 크기를 보장하여 변이를 최소화하고 시퀀싱 성능을 향상시킵니다. 준비된 라이브러리는 Illumina ™ 또는 MGI ™ 와 완벽하게 호환됩니다. 어댑터와 프라이머를 통해 각 플랫폼에서 원활한 다운스트림 시퀀싱이 가능합니다.
특징
- 폭넓은 샘플 호환성: 100 pg에서 1 µg까지 광범위한 입력 DNA를 지원하여 모든 일반적인 샘플 유형을 포괄합니다.
- 높은 조각 복구: 단편화 후 복구율은 60%를 넘습니다.
- 우수한 도서관 균일성: 동일한 준비 조건에서 다양한 종에 걸쳐 일관된 라이브러리 분포가 가능합니다.
- 강력한 억제제 내성: 억제제가 포함된 복잡한 샘플에서 직접 라이브러리를 준비하는 데 성공률이 높습니다.
- 자동화 친화적: 일회용 시약은 4°C 또는 25°C에서 4주 동안 안정을 유지하므로 자동화가 용이합니다.
구성 요소
구성품 번호 |
이름 |
12972ES08 |
12972ES24 |
12972ES96 |
|
12972-A |
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80 μL |
240 μL |
960 μL |
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12972-B |
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스미어라제TM 효소 4.0 |
80 μL |
240 μL |
960 μL |
12972-C |
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라이게이션 인핸서 4.0 |
240 μL |
720 μL |
3×960 μL |
12972-D |
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래피드 DNA 리가제 4.0 |
80 μL |
240 μL |
2×480 μL |
12972-E |
|
2×Ultima HF 증폭 믹스 |
200 μL |
600 μL |
3×800 μL |
저장
본 제품은 -25~-15℃에서 1 년간 보관하시기 바랍니다 .
애플리케이션
DNA 라이브러리 준비; 전체 게놈 시퀀싱(WGS); 전체 엑솜 또는 기타 표적 캡처 시퀀싱; 앰플리콘 시퀀싱; 면역침전 시퀀싱; 메타게놈 시퀀싱;
수치
1. 워크플로

그림 1. OnePot Pro DNA 라이브러리 준비 키트의 워크플로
2. 유연하고 고효율적인 분할

그림 2. 12972 단편화 모듈을 사용하여 측정한 250 ng 인간 gDNA의 단편 크기 분포.
인간 gDNA(250 ng)를 30°C 또는 35°C에서 10, 15, 20, 25, 30 또는 40분 동안 단편화했습니다. 회수된 삽입체 크기의 분포를 나타내며, 10~40분 범위에 걸쳐 안정적이고 균일한 단편화가 이루어졌음을 보여줍니다.
3. 우수한 버퍼 내성

그림 3. 다양한 반응 완충액(H 2 O(pH 7.0), 1×TE(pH 7.5–8.0), 1×AE(pH 8.3), 1×EB(pH 8.5)) 에서의 12972ES의 단편화 성능 .
단편화 반응은 12972ES를 사용하여 293 gDNA 500 ng을 30°C에서 20분간 네 가지 다른 완충액에 넣어 수행했습니다. 각 완충액 10 μL를 DEPC 처리수에 첨가했을 때, 단편 크기는 순수 DEPC 처리수와 유사했습니다. 전체 반응 완충액으로 AE 또는 EB를 사용했을 때 단편 크기가 약간 더 컸습니다.
4. 광범위한 종 호환성

그림 4. 동일한 단편화 조건에서 12972를 사용하여 다양한 종에 대한 라이브러리 균일성 테스트.
동일한 조건에서 12972개의 DNA 샘플을 이용하여 여러 DNA 단편을 분리했습니다. 라이브러리는 종 전체에 걸쳐 양호한 균일성을 보이며 일관된 크기(~450 bp / ~320 bp)를 나타냈습니다.
5. 뛰어난 시퀀싱 데이터 성능

그림 5. 인간 및 소 샘플에 대한 10X WGS 데이터 성능
12972는 공급업체 W*보다 더 높은 유전자 커버리지를 보입니다. 거짓 키메라 비율과 헤어핀 아티팩트는 공급업체 W*보다 낮거나 유사합니다.
6. 강력한 안정성

그림 6. 4°C와 25°C에서 4주간 보관 후 라이브러리 수율 안정성. 4°C와 25°C에서 4주간 보관 후에도 라이브러리 수율 감소가 관찰되지 않았으며, 이는 본 키트가 자동화에 적합함을 보여줍니다.
서류:
안전 데이터 시트
12972 _MSDS_HB 250 620 _KO.PDF
매뉴얼
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자주 묻는 질문
이 제품은 연구 목적으로만 사용되며 인간이나 동물의 치료 또는 진단용으로 의도되지 않았습니다. 제품과 콘텐츠는
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