설명
Hieff NGS TM EvoMax RNA 라이브러리 준비 키트(스트랜드 특이적)는 Illumina 및 MGI 플랫폼 모두와 호환되는, 액티노마이신 D가 없는, 스트랜드 특이적 총 RNA 시퀀싱 라이브러리 준비 키트입니다. 튜브형과 밀봉형 키트의 두 가지 형태로 제공되는 이 키트는 자동 액체 처리 시스템과 수동 작동 모두에 편리함을 제공합니다.
이 키트에는 RNA 단편화, 역전사, 가닥 특이적 이중 가닥 cDNA 합성 및 라이브러리 증폭을 위한 시약이 포함되어 있습니다. mRNA 또는 lncRNA 연구를 위해 mRNA 정제 또는 rRNA 제거 키트와 함께 사용할 수 있습니다.
이 키트는 역전사 단계를 최적화하여 액티노마이신 D를 사용하지 않고도 높은 가닥 특이성을 달성하여 사용자 안전성을 향상시킵니다. 모든 시약은 라이브러리 제작 시 최고의 안정성과 재현성을 보장하기 위해 엄격한 품질 관리 및 기능 검증을 거칩니다.
특징
- 미리 혼합된 시약: 효소와 완충액은 시약 성분을 줄이고 준비를 간소화하기 위해 미리 혼합됩니다.
- 향상된 가닥 특이성을 갖춘 안전하고 빛에 강한 제품: 최적화된 역전사효소는 취급 중에 빛으로부터 보호할 필요 없이 높은 가닥 특이성을 보장합니다.
- 사전 장착된 플레이트 포맷 - 즉시 사용 가능: 자동화 장비와 완벽하게 통합되도록 설계된 사전 장착된 플레이트를 사용하면 편리한 자동화 워크플로를 위한 간편한 "뜯어서 사용" 작업이 가능합니다.
구성 요소
구성품 번호 |
이름 |
12340ES24 |
12340ES96 |
12340ES97 (자동화) |
12340ES98 (그릇 )** |
12340-A |
450 μL |
2×900 μL |
2×1064 μL |
8×266 μL |
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12340-B |
1차 반응 모듈 2.0 |
192 μL |
768 μL |
960 μL |
8×120 μL |
12340-C |
2차 반응 모듈(dUTP) |
840 μL |
3×1120 μL |
3×1280 μL |
8×480 μL |
12340-D |
결찰 반응 모듈 |
840 μL |
3×1120 μL |
3×1280 μL |
8×480 μL |
12340-E |
2×Super CanaceTM II 고음질 믹스 |
600 μL |
2×1200 μL |
2×1360 μL |
8×340 μL |
* |
프라이머 믹스* |
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[ 참고 ] : * 표기된 구성품은 키트에 포함되어 있지 않습니다. 전체 어댑터를 사용하는 경우 프라이머 믹스가 필요하며, 그렇지 않은 경우 필요하지 않습니다. 이 키트는 Illumina 및 MGI 플랫폼과 호환되지만, 전체 어댑터를 사용하는 경우 Illumina 또는 MGI 플랫폼용 추가 프라이머 믹스(MGI용 카탈로그 번호 13334 프라이머 믹스 및 Illumina용 카탈로그 번호 13335 프라이머 믹스)가 필요합니다.
** 플레이트 시약 그룹의 레이아웃은 다음 다이어그램을 참조하세요.

저장
본 제품은 -25~-15℃에서 1년간 보관하시기 바랍니다 .
애플리케이션
RNA 라이브러리 준비; 전사체 프로파일링 및 유전자 발현 분석; 코딩 RNA 연구를 위한 mRNA 시퀀싱; lncRNA(긴 비코딩 RNA) 연구; 소형 RNA 시퀀싱(해당되는 경우); 차등 유전자 발현 분석; RNA 바이오마커 발견; RNA 변이 및 융합 감지.
수치
1. 단순화된 제품 형식

그림 1. EvoMax RNA 라이브러리 준비 키트의 단순화된 구성 요소.
2. 유연한 RNA 라이브러리 준비: 고입력 및 저입력 호환

그림 2. RNA 품질과 입력량이 다른 동물 및 식물 샘플의 라이브러리 수율.
키트(Cat# 12629)와 12341을 이용한 라이브러리 준비; 94°C에서 7분간 DNA 단편화; PE 어댑터(Cat#12327ES), 1 μM, 5 μl; 라이게이션 후 0.4배 정제, 0.7배/0.1배 크기 선택, 증폭 후 0.8배 정제. 투입량: 100 ng(16회 사이클), 200 ng(15회 사이클), 400 ng(14회 사이클).”
3. 자동화 친화적

그림 3. 96채널 자동화로 준비된 매우 균일한 mRNA 및 lncRNA 라이브러리.
4. 탁월한 시퀀싱 데이터 성능

그림 5. EvoMax RNA Library Prep Kit을 사용한 전사체 시퀀싱 성능
전사체 시퀀싱 데이터는 유전자 본체 커버리지, 삽입 DNA 길이 분포 및 샘플 상관관계에서 좋은 성능을 보여줍니다.
5.강력한 안정성

그림 6. 실시간 안정성: 18개월간 보관한 후에도 성능은 참조 키트와 비슷한 수준을 유지합니다.
다양한 품질의 FFPE 샘플을 위한 RNA 라이브러리 준비
심하게 분해된 FFPE RNA(DV 200 <50%) 및 낮은 입력 샘플의 경우 라이브러리 손실을 줄이기 위해 어댑터 연결 후 이중 정제 프로토콜을 권장합니다.
다양한 품질의 FFPE 샘플의 피크 패턴
FFPE RNA 샘플 |
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린=2.2; DV200=74% |
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샘플 2 린=2.5; DV200=26% |
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샘플 3 린=2.5; DV200=11% |
샘플 1. RNA 라이브러리 준비 결과 |
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입력 RNA: 500 ng, 라이브러리 증폭: 12 사이클, 라이브러리 수율: 717.2ng |
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입력 RNA: 500 ng 단편화: 94℃, 7분 라이브러리 증폭: 13주기 라이브러리 수율: 437.8ng |
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입력 RNA: 100 ng 단편화: 94℃, 7분 이중 정화: 0.6×; 0.8× 라이브러리 증폭: 15 사이클 라이브러리 수율: 206.8ng |
샘플 2. RNA 라이브러리 준비 결과 |
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입력 RNA: 500 ng 단편화: 85℃, 8분 이중 정화: 0.6×; 0.8× 라이브러리 증폭: 12 사이클 라이브러리 수율: 207ng |
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입력 RNA: 500 ng 단편화: 85℃, 8분 정제 및 선택: 0.6× 및 0.7× / 0.15× 라이브러리 증폭: 13주기 라이브러리 수율: 98.56 ng |
샘플 3. RNA 라이브러리 준비 결과 |
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입력 RNA: 500 ng 단편화: 65℃, 8분 이중 정화: 0.6×; 0.8× 라이브러리 증폭: 12 사이클 라이브러리 수율: 354.2ng |
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투입량 : 500ng 단편화: 65℃, 8분 라이브러리 증폭: 13주기 라이브러리 수율: 172.48ng |
서류:
안전 데이터 시트
12340 _MSDS_HB 250 620 _KO.PDF
매뉴얼
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자주 묻는 질문
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