説明
DNase Iは、一本鎖および二本鎖DNAを消化して、単一のデオキシヌクレオチド、または一本鎖もしくは二本鎖のオリゴデオキシヌクレオチドを生成するエンドヌクレアーゼです。リン酸ジエステル結合を加水分解して、5'-リン酸基と3'-OH基を含むモノデオキシヌクレオチドおよびオリゴデオキシヌクレオチドを生成します。平均的な消化産物は最小のポリテトラヌクレオチドです。DNase Iは、一本鎖DNA、二本鎖DNA、さらにはクロマチン(切断速度はヒストンの影響を受ける)など、多くの形態のDNAを触媒できます。最適pH範囲は7~8です。DNase Iの活性はCa 2+に依存し、Co 2+ 、Mn 2+ 、Zn 2+などの二価金属イオンによって活性化されます。5 mM Ca 2+ は酵素の加水分解を防ぎます。 Mg 2+が存在すると、酵素は DNA の任意の鎖の任意の部位をランダムに認識して切断できます。また、Mn 2+が存在すると、2 本の DNA 鎖を同時に認識し、ほぼ同じ部位を切断して平滑末端、または 1 ~ 2 ヌクレオチドが突出した粘着末端を形成できます。DNase I は、DNA フリー RNA の調製、in vitro 転写後のテンプレート DNA の除去、RT-PCR および RT-qPCR 反応前の DNA フリー RNA の調製、DNA ポリメラーゼ I と組み合わせてニック転座による DNA 標識付け、DNA 断片化ライブラリの構築に広く使用されています。
この製品は GMP プロセス要件に従って製造されており、液体の形で提供されます。
特徴
- DNA特異的エンドヌクレアーゼ
- 二本鎖および一本鎖DNAを分解する
- 製品は5'-リン酸と3'-OHを持つ短いオリゴである
応用
- RNAサンプルから汚染ゲノムDNAを除去する
- 転写反応におけるDNAテンプレートの分解
仕様
ソース | DNase I遺伝子を導入した組み換え大腸菌 |
最適温度 | 37℃ |
ストレージバッファ | 10 mM トリス塩酸 pH 7.6、2 mM CaCl 2 、50% (v/v) グリセロール |
ユニット定義 | 37℃で10分以内に1μgのプラスミドDNAを完全に分解するために必要な酵素量。(反応緩衝液:10 mM Tris-HCl pH 7.6、2.5 mM MgCl 2 、0.5 mM CaCl 2 、1μgのプラスミドDNA) |
コンポーネント
コンポーネント番号 | 名前 | 10611ES76 (500ユニット) | 10611ES84 (2,000ユニット) | 10611ES92 (10,000単位) |
10611 | デオキシリボヌクレアーゼI(DNase I)GMPグレード(2 U/μL) | 250μL | 1mL | 5mL |
配送と保管
デオキシリボヌクレアーゼI(DNase I)GMPグレード製品はドライアイスとともに出荷され、-15℃~-25℃で1年間保存できます。
数字
図 1. YEASEN の DNase I は、競合ブランドと比較して、転写中に DNA テンプレートを効果的に除去できます。
[1] Lu Z, Liu H, Song N, et al. METTL14はN6-メチルアデノシン依存性のSirt1ダウンレギュレーションを介して足細胞障害および糸球体症の進行を悪化させる. Cell Death Dis. 2021;12(10):881. 2021年9月27日発行. doi:10.1038/s41419-021-04156-y(IF:8.469)
[2] Yu Y, Wang Y, Zhang W, et al. 骨芽細胞由来マトリックスとハイドロゲルからなる生体模倣骨膜骨代替物による大分節骨欠損修復. Acta Biomater. 2020;113:317-327. doi:10.1016/j.actbio.2020.06.030(IF:7.242)
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よくある質問
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