Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit _ 11402es
Gulung gambar untuk memperbesar Klik gambar untuk memperbesar
Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit _ 11402es
Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit _ 11402es
Luciferase kunang-kunang adalah protein dengan berat molekul sekitar 61 kDa, yang dapat mengkatalisis oksidasi luciferin menjadi oksilusiferin dengan adanya ATP, ion magnesium, dan oksigen. Ia memancarkan bioluminesensi dengan panjang gelombang sekitar 560 nm. Luciferase renila adalah protein dengan berat molekul sekitar 36 kDa, yang dapat mengkatalisis oksidasi coelenterazine menjadi coelenteramide dengan adanya oksigen, dan memancarkan panjang gelombang 480 nm selama proses oksidasi. tentang bioluminesensi. Kedua bioluminesensi dapat diukur dengan chemiluminescence. Prinsip deteksi ditunjukkan pada gambar 1: Gambar 1: Skema pengujian luciferase Firefly dan Renilla Biasanya, 5´UTR atau promotor gen target...

Frequently Bought Together

Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit _ 11402es

YeasenSKU: 11402ES10
Ukuran: 10 t
Harga:
$25.00
Saham:
Dalam stok

Luciferase kunang-kunang adalah protein dengan berat molekul sekitar 61 kDa, yang dapat mengkatalisis oksidasi luciferin menjadi oksilusiferin dengan adanya ATP, ion magnesium, dan oksigen. Ia memancarkan bioluminesensi dengan panjang gelombang sekitar 560 nm. Luciferase renila adalah protein dengan berat molekul sekitar 36 kDa, yang dapat mengkatalisis oksidasi coelenterazine menjadi coelenteramide dengan adanya oksigen, dan memancarkan panjang gelombang 480 nm selama proses oksidasi. tentang bioluminesensi. Kedua bioluminesensi dapat diukur dengan chemiluminescence. Prinsip deteksi ditunjukkan pada gambar 1:

Gambar 1: Skema pengujian luciferase Firefly dan Renilla

Biasanya, 5´UTR atau promotor gen target dikloning di hulu Firefly Luciferase, atau 3´UTR dikloning di hilir Firefly Luciferase, dan efek regulasi transkripsi promotor atau elemen regulatori dideteksi dengan mendeteksi jumlah firefly luciferase. Renilla Luciferase digunakan sebagai kontrol internal untuk menghilangkan perbedaan dalam jumlah sel, efisiensi transfeksi, dll. Kit Uji Gen Reporter Luciferase Ganda menggunakan luciferin sebagai substrat untuk mendeteksi aktivitas gen reporter firefly luciferase, dan kemudian menggunakan coelenterazine sebagai substrat untuk mendeteksi Renilla luciferin sambil memadamkan reaksi fluoresensi. Aktivitas gen reporter enzim. Kit ini memiliki karakteristik sensitivitas tinggi.

Fitur

Kemampuan Lisis yang Ditingkatkan: Mampu melisiskan sebagian besar jenis sel secara menyeluruh.

Sinyal Lebih Kuat: Deteksi tepat ekspresi promotor yang lemah.

Sensitivitas Lebih Tinggi: Dapat dideteksi hingga 10-20 pikomol molekul luciferase.

Jangkauan Linear Lebih Luas: Jangkauan deteksi linear melebihi 8 orde besaran konsentrasi enzim.

Aplikasi

Verifikasi interaksi miRNA dengan gen target 3'UTR

Verifikasi interaksi lncRNA-miRNA

Verifikasi regulasi faktor transkripsi di wilayah promotor

Analisis jalur sinyal

Analisis aktivitas SNP

Spesifikasi

Membentuk

cairan

luciferase

Kunang-kunang dan Renilla

Waktu paruh sinyal

30 menit

Jumlah Komponen Produk

5

Alur kerja

Dua Slangkah

Komponen

Komponen No.

Nama

nomor 11402ES60

nomor 11402ES80

11402-A

Lisat Sel

20 ml air

10×20ml

11402-B

Penyangga Luciferase Kunang-kunang

10 ml air

10x10ml

11402-C

Substrat luciferase kunang-kunang (50 ×)

200 mikroliter

10×200 mikroliter

11402-D

Penyangga Renilla Luciferase

10 ml air

10x10ml

11402-E

Substrat Renilla Luciferase (50 ×)

200 mikroliter

10×200 mikroliter

Pengiriman dan Penyimpanan

Produk Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit harus disimpan pada suhu -15℃ ~ -25℃ untuk 1 tahun.

Angka

Gambar 1. Yeasen (Kucing#: 11402) memiliki intensitas fluoresensi yang sebanding dengan Merek P.

Angka2. kamuMUDAH (Kucing#: 11402) reagen deteksi berinteraksi dengan luciferase untuk mencapai intensitas pendaran cahaya yang optimal. Setelah penambahan substrat Renilla luciferase, bioluminesensi luciferase kunang-kunang dipadamkan: pada dasarnya dapat dipadamkan sepenuhnya.

Dokumen:

Lembar Data Keselamatan

11402 MSDS HB220209 EN.PDF

Buku Panduan

11402 Manual HB241230 EN.Bahasa Indonesia:

Kutipan & Referensi:

[1] Wang H, Yang J, Cai Y, Zhao Y. Makrofag menekan pemrograman ulang jantung fibroblas secara in vivo melalui sirkuit stimulasi diri antar sel yang dimediasi IFN [koreksi yang diterbitkan muncul di Protein Cell. 2024 Desember 2;15(12):938. doi: 10.1093/procel/pwae038]. (JIKA=21.1)

[2] Zhao L, Zhu Y, Tao H, dkk. Ailanthone memperbaiki fibrosis paru dengan menekan aktivasi MEOX1 yang bergantung pada JUN. Acta Pharm Sin B. 2024;14(8):3543-3560. doi:10.1016/j.apsb.2024.04.013(JIKA=14,5)

[3[Bahasa Indonesia] Wu X, Chen S, Zhang Z, dkk. Jalur mRNA tanaman inang RNA pengganggu kecil virus memodulasi toleransi kekeringan yang disebabkan virus dengan meningkatkan autofagi. Sel Tanaman. 2024;36(9):3219-3236. doi:10.1093/plcell/koae158(JIKA=12,6)

[4[Bahasa Indonesia] Xuan H, Li Y, Liu Y, dkk. Domain H1/H5 berkontribusi terhadap pemisahan fase OsTRBF2 dan represi gen selama perkembangan padi. ​​Plant Cell. 2024;36(9):3787-3808. doi:10.1093/plcell/koae199(JIKA=12)

[5[Bahasa Indonesia] Han Y, Hu Q, Gong N, dkk. Variasi alami pada MORE GRAINS 1 mengatur jumlah gabah dan berat gabah pada padi. ​​J Integr Plant Biol. 2024;66(7):1440-1458. doi:10.1111/jipb.13674(JIKA=11,4)

[6[Bahasa Indonesia] Pan M, Luo M, Liu L, dkk. EGR1 menekan pertumbuhan HCC dan glikolisis aerobik dengan menurunkan regulasi PFKL secara transkripsi. J Exp Clin Cancer Res. 2024;43(1):35. Diterbitkan 29 Januari 2024. doi:10.1186/s13046-024-02957-5(JIKA=11,3)

[7[Bahasa Indonesia] Hao X, Wang S, Fu Y, dkk. Modul WRKY46-MYC2 memainkan peran penting dalam respons antiherbivora yang diinduksi E-2-heksenal dengan mendorong akumulasi flavonoid. Plant Commun. 2024;5(2):100734. doi:10.1016/j.xplc.2023.100734(JIKA=10,5)

[8[Bahasa Indonesia] Wu J, Li P, Li M, dkk. Stres panas mengganggu penghentian meristem bunga dan perkembangan buah dengan memengaruhi kaskade BR-SlCRCa pada tomat. Plant Commun. 2024;5(4):100790. doi:10.1016/j.xplc.2023.100790(JIKA=10,5)

[9[Bahasa Indonesia] Chen L, Xia S, Wang F, dkk. Ablasi NR1D1 yang diinduksi metilasi m6A mengganggu jam sirkadian HSC dan meningkatkan fibrosis hati. Pharmacol Res. 2023;189:106704. doi:10.1016/j.phrs.2023.106704(JIKA=10,33)

[10[Bahasa Indonesia] Niu MX, Feng CH, He F, dkk. Modul miR6445-NAC029 mengatur toleransi kekeringan dengan mengatur ekspresi glutathione S-transferase U23 dan pemulungan spesies oksigen reaktif di Populus. New Phytol. 2024;242(5):2043-2058. doi:10.1111/nph.19703(JIKA=9,4)

[11]Huang T, You Q, Huang D, dkk.Umpan balik positif antara PDIA3P1 dan OCT4 meningkatkan sifat sel induk kanker pada karsinoma sel skuamosa esofagus. Cell Commun Signal. 2024;22(1):60. Diterbitkan 22 Jan 2024. doi:10.1186/s12964-024-01475-3(JIKA=8,4)

[12]Wang S, Liu Y, Hao X, Chen Y, Wang Z, Shen Y. Meningkatkan defensin tanaman pada semak gurun: Menjelajahi jalur regulasi AnWRKY29. Int J Biol Macromol. 2024;270(Pt 1):132259. doi:10.1016/j.ijbiomac.2024.132259(JIKA=8.2)

Storage

The Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit products should be stored at -15℃ ~ -25℃ for 1 year.

FAQ

Yes, they can be stored at -80°C, similar to standard protein storage protocols. Lysed samples can be stored at -80°C for up to 6 months and at -20°C for up to 1 month.
Strict light protection is not required during operation. However, store them protected from light. Low temperature is a more critical storage condition—especially for coelenterazine (the Renilla substrate), which is recommended to be stored at -80°C.
The ratio should be adjusted according to specific experimental conditions. Pilot experiments are recommended—for instance, testing Renilla vector to Firefly vector ratios at 1:10, 1:20, 1:50, and 1:100.
They are assayed in the same well. There is no mutual interference because the Renilla luciferase substrate reagent contains a compound that quenches Firefly luminescence. While separate assays are possible, sequential measurement in a single well is standard.
Different microplate readers vary in sensitivity and parameter settings, which can lead to differences in background signal readings for the same sample.
Opaque white microplates.
Add 0.3 mL of Triton X-100 to 10 mL of PBS to prepare a 3% Triton X-100 solution.
Dilute the cell lysate sample 5-fold prior to testing.
1. Luciferase is expressed intracellularly and is a enzyme non-native to humans (yielding extremely low background). It cannot cross cell membranes. In contrast, luciferase substrates are hydrophobic, cyclic small molecules that penetrate cell membranes easily. Thus, any luciferase expression is exogenous, and adding substrate directly to culture media or injecting it in vivo yields detectable signals.
2. In vitro reporter assays require cell lysis to homogenize samples, overcoming transfection heterogeneity, uneven substrate permeability, and signal variation. In vitro reporter assays are highly quantitative and sensitive, requiring ATP and oxygen. Cell lysis fully releases expressed luciferase to optimize the reaction; since intracellular oxygen is limited, omitting lysis leads to signal reduction (some lysis buffers include optimized additives like ATP to boost signal). Therefore, cell lysis ensures superior signal in in vitro assays. 3. In vivo imaging instruments possess high sensitivity and power capable of penetrating skin and tissue, enabling strong signal detection without cell lysis.
No, the order cannot be adjusted. In this kit, Component B (Firefly Luciferase Buffer) is essential for detecting both Firefly and Renilla luciferases. The optimal reaction environment for Renilla luciferase requires the presence of Component B; otherwise, Renilla luciferase readings will be extremely low.

Citations

Documents

Manual
11402_Manual_HB260114_EN.pdf
MSDS
11402_MSDS_HB220209_EN.pdf

Applications

Anda mungkin juga menyukai

Pertanyaan

FAQ

Produk ini hanya untuk keperluan penelitian dan tidak ditujukan untuk penggunaan terapeutik atau diagnostik pada manusia atau hewan. Produk dan konten dilindungi oleh paten, merek dagang, dan hak cipta milik Yeasen Bioteknologi. Simbol merek dagang menunjukkan negara asal, belum tentu pendaftaran di semua wilayah.

Aplikasi tertentu mungkin memerlukan hak kekayaan intelektual pihak ketiga tambahan.

Yeasen didedikasikan untuk ilmu etika, meyakini penelitian kami harus menjawab pertanyaan kritis sambil memastikan standar keselamatan dan etika.